Menurut dogma sentral, messenger RNA (mRNA) adalah jembatan transmisi materi genetik dari DNA ke protein.
mRNA memainkan peran biologis dengan mengkode protein in vivo, dan mRNA matang pada organisme eukariotik terdiri dari lima komponen: 5' Cap (struktur tutup), 5' UTR (wilayah non-coding), ORF (bingkai bacaan terbuka), 3ʹ UTR , dan ekor poliA 3' (ekor poliadenilat).
Detail Layanan
| Proses | Layanan Opsional | Detail Layanan | Periode Pengiriman (Hari) |
| desain dan optimasi urutan mRNA | Desain dan optimalisasi urutan pengkodean | Penyelarasan urutan CDS Optimasi kodon CDS | 1 |
| Desain dan optimalisasi urutan non-coding | Desain dan optimasi urutan UTR 5' Desain dan optimasi urutan UTR 3' desain dan optimasi urutan polyA | 1-2 |
Opsi yang Dapat Disesuaikan
| 5' UTR/3' UTR | - Urutan UTR alam
- Urutan UTR Mutan/Rekayasa
|
| 3' Ekor PoliA | - 100A ~120A Ekor (disarankan)
- Ekor poliA tersegmentasi
- Ekor Kustom lainnya
|
Strategi Umum untuk Desain Urutan mRNA
| Komponen mRNA | Fungsi Biologis | Strategi Optimasi |
| 5' Kap | Melindungi mRNA dari degradasi oleh eksonuklease dan bertindak bersama dengan ekor poliA di ujung 3', protein pengikat poliA, dan protein faktor inisiasi translasi untuk memulai translasi protein. | Struktur Cap1 alami menghindari reseptor pengenalan pola dan dengan demikian mengurangi respons imun alami, yang dapat dicapai dengan pembatasan kotranskripsional satu langkah atau pembatasan enzimatik dua langkah [lihat pembatasan enzimatik mRNA dan pembatasan kotranskripsional untuk detailnya]. |
| 5' UTR | UTR 5' dapat dikenali oleh ribosom, mengatur translasi mRNA dan mempengaruhi stabilitas mRNA. | Berisi urutan Kozak tanpa struktur sekunder yang sangat stabil. UTR alami dengan gen yang berekspresi tinggi lebih disukai untuk mRNA transkripsi in vitro (IVT) seperti α-globin dan β-globin. |
| CDS | Daerah pengkode protein dan urutan pengkode antigen, antibodi, atau protein fungsional lainnya. | Optimalisasi kodon meningkatkan tingkat translasi, mengingat bahwa kodon tertentu yang tidak optimal mungkin berperan dalam pelipatan protein. |
| 3' UTR | Mengatur terjemahan dan stabilitas mRNA. | UTR alami dengan gen yang berekspresi tinggi lebih disukai untuk mRNA IVT seperti α-globin dan β-globin. |
| Ekor poliA 3' | Mengatur ekspresi protein dan melindungi struktur tutup dari degradasi. | Diperlukan panjang yang memadai (100-150 bp); pengkodean ekor poliA pada plasmid templat transkripsi memastikan panjang ekor poliA yang lebih jelas. |
Fitur kami
- Pemilihan sumber UTR yang terdiversifikasi
Berbagai sumber perpustakaan UTR alami dan termodifikasi yang sangat menonjol; strategi modifikasi UTR yang matang;
- Tim pengoptimalan CDS yang mutakhir
Bekerja sama dengan tim algoritma AI profesional untuk menyelesaikan optimalisasi kodon.
- Bahkan distribusi ekor poliA
Tambahkan urutan poliA sesuai dengan templat DNA untuk mengontrol panjang mRNA dengan lebih tepat.
- Kombinasi pengoptimalan yang terdiversifikasi
Mencapai ekspresi mRNA yang efisien dengan imunogenisitas rendah.
Studi kasus
Desain Urutan mRNA reporter ganda: mCherry-eGFP mRNA
Layanan mRNA Yaohai Bio-Pharma terus ditingkatkan dengan desain dan optimalisasi rangkaian tandem gen reporter ganda, yang menghasilkan koekspresi gen ganda.
Dengan menggunakan reagen transfeksi konvensional, urutan tandem gen ganda mCherry-eGFP mRNA ditransfusikan ke dalam sel 293T, dan dua sinyal fluoresen mCherry (merah) dan protein fluoresen hijau yang ditingkatkan (eGFP) dideteksi dengan ekspresi simultan setelah 48 jam, dan tumpukannya grafik disorot dengan warna kuning.
Ekspresi mRNA mCherry-eGFP dalam sel 293T
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
TIDAK
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
