Az LNP lipid összetételének azonosítása és mennyisége
Az LNP lipidösszetétel-elemzés jelentősége
A kationos lipidet, koleszterint, foszfolipidet és PEG-konjugált lipidet tartalmazó lipid nanorészecskék (LNP-k) kiemelkedő szállítórendszerként szolgálnak az mRNS gyógyszertermékek számára. Az LNP-k stabilitása és kétrétegű folyékonysága a készítményrendszerben használt különböző lipidek tulajdonságaitól és tartalmától függ. A lipidek összetétele nagyon fontos ahhoz, hogy az LNP-k milyen jól szállítják a gyógyszereket.
A Yaohai-BioPharma megoldásokat kínál az mRNS-LNP lipidösszetétel azonosítására és mennyiségi meghatározására a nagy teljesítményű folyadékkromatográfiával töltött aeroszol detektálással (HPLC-CAD).
A lipidösszetételre vonatkozó szabályozási követelmények
A WHO szabályozási megfontolásai szerint „A vakcina végső összetételét, beleértve a lipideket is, le kell írni az egyes kiszerelésekben lévő komponensek mennyiségével együtt.”
Analitikai módszer
Elemzés |
Mód |
Lipid összetétel |
HPLC kombinálva Corona Charged Aerosol Detectorral (CAD) |
Eljárás
1. lépés Lipidminta előkészítése
A hígítószer megválasztása kiemelkedően fontos az mRNS-LNP gyógyszertermékek lipidkomponenseinek elemzéséhez. A hígítónak hatékonyan fel kell oldania az egyes lipidkomponenseket, és meg kell szakítania a lipidek és a kapszulázott mRNS közötti kölcsönhatásokat. A lehetséges hígítószerek közé tartozik az etanol, etanol/dimetil-szulfoxid (DMSO), etanol/formamid, etanol/trietil-amin-acetát és mások.
2. lépés: HPLC-CAD
A töltött aeroszol detektorral (CAD) párosított fordított fázisú folyadékkromatográfiát (RP-HPLC) beépítették az LNP lipidösszetétel vizsgálatába. Tekintettel arra, hogy a lipidekből hiányoznak kromoforok, és származékképződés nélkül nem nyeli el az ultraibolya (UV) sugárzást, az elpárologtatás jellemzően kihívást jelent. Mivel a CAD érzékenyebb, a lipidtartalom szélesebb spektrumát képes felismerni. Korábban ultranagy teljesítményű folyadékkromatográfiát (UHPLC) állítottak össze egy feltöltött aeroszoldetektor (CAD) módszerrel, és alkalmazták lipidanalízisben kis interferáló RNS (siRNS) LNP vizsgálatokhoz.
3. lépés Adatelemzés
A mintában lévő egyes lipidek mennyiségét a standard görbéből származó számítások szorozzák a hígítási tényezővel. Ez a folyamat az mRNS-LNP mintán belül minden egyes összetevő lipidtartalmát eredményezte.
Az LNP lipidösszetétel-elemzés esete HPLC-CAD-vel
A HPLC-CAD alapján a Yaohai-BioPharma robusztus módszert fejlesztett ki az mRNS-LNP lipidkomponenseinek elemzésére. Ezt a módszert lineárisnak, megismételhetőnek, precíznek, pontosnak és specifikusnak értékelték az LNP-készítményekre, amelyek támogathatják a folyamatfejlesztést, a készítményfejlesztést, a stabilitásvizsgálatot és az mRNS-LNP felszabadulását.
4 lipid kromatográfiás profilja a Yaohai-BioPharma HPLC-CAD módszerével
A Yaohai-BioPharma HPLC-CAD módszerének linearitása (R2＞0.99)
EN
