Το mRNA έχει χρησιμοποιηθεί ευρέως στη μελέτη γονιδιακών ή πρωτεϊνικών λειτουργιών. Εν τω μεταξύ, είναι κοινό στην ανάπτυξη προφυλακτικών και θεραπευτικών βιολογικών. Ως κοινή στρατηγική σύνθεσης για μόρια RNA, η in vitro μεταγραφή (IVT) μας δίνει τη δυνατότητα να λαμβάνουμε προσαρμοσμένες μεταγραφές αποτελεσματικά.
Η Yaohai Bio-Pharma έχει δημιουργήσει ένα σύνολο τεχνολογιών σύνθεσης mRNA για την παροχή RNA υψηλής ποιότητας, όπως σχεδιασμό και βελτιστοποίηση αλληλουχίας, IVT, καθαρισμό, λυοφιλοποίηση και ενθυλάκωση λιπιδικών νανοσωματιδίων (LNP). Όλα τα προϊόντα κυκλοφορούν σύμφωνα με αυστηρά πρότυπα ποιοτικού ελέγχου (QC).
Με το ξέσπασμα της πανδημίας COVID-19 το 2020, η τεχνολογία mRNA έχει προχωρήσει αλματωδώς και η σχετική έρευνα και οι εφαρμογές της έχουν αποκτήσει πρωτοφανή ανάπτυξη, συμπεριλαμβανομένων προφυλακτικών εμβολίων για την πρόληψη μολυσματικών ασθενειών, θεραπευτικών ογκολογικών εμβολίων και φαρμάκων, θεραπείας όγκων, πρωτεΐνης θεραπεία υποκατάστασης, αναγεννητική ιατρική και κυτταρική και γονιδιακή θεραπεία (CGT).
Εμβόλιο mRNA | mRNA Therapeutics |
|
Διαδικασία | Προαιρετική εξυπηρέτηση | Λεπτομέρειες υπηρεσιών | Περίοδος παράδοσης (εργάσιμη ημέρα) | Παραδοτέο |
Σχεδιασμός και Βελτιστοποίηση Αλληλουχίας mRNA | Σχεδιασμός και βελτιστοποίηση ακολουθιών κωδικοποίησης | Σχεδιασμός ακολουθίας CDS και βελτιστοποίηση κωδικονίων | 1-3 | Αρχείο ακολουθίας |
Σχεδιασμός και βελτιστοποίηση μη κωδικοποιητικών ακολουθιών | Σχεδιασμός και βελτιστοποίηση ακολουθιών UTR, polyA | |||
Παρασκευή πλασμιδίου προτύπου μεταγραφής | Παρασκευή ανασυνδυασμένου πλασμιδίου | Γονιδιακή σύνθεση | 7-10 | |
Ενίσχυση και εκχύλιση πλασμιδίου | 4 | |||
Γραμμικοποίηση και καθαρισμός πλασμιδίου | ||||
mRNA In Vitro Μεταγραφή | Συν-μεταγραφικό όριο (μέθοδος ενός βήματος) | Μεταγραφή in vitro (IVT) / Ανάλογο καπακιού | 1-2 | N / A |
Τροποποιήσεις νουκλεοτιδίων (τροποποιήσεις UTP/CTP) | ||||
Αφαίρεση προτύπου DNA (DNase I) | ||||
Ενζυματική κάλυψη (διαδικασία δύο σταδίων) | IVT | 2-3 | ||
Τροποποιήσεις νουκλεοτιδίων (τροποποιήσεις UTP/CTP) | ||||
Αφαίρεση προτύπου DNA (DNase I) | ||||
Καθαρισμός mRNA (χλωριούχο λίθιο/μαγνητικά σφαιρίδια) | ||||
Ενζυματική κάλυψη | ||||
Καθαρισμός mRNA | Συμβατικό σχήμα καθαρισμού | Καθίζηση χλωριούχου λιθίου | 1 | mRNA φαρμακευτική ουσία |
Καθαρισμός με μαγνητικά σφαιρίδια | ||||
Σχήμα καθαρισμού στήλης χρωματογραφίας | Συνδυασμός πολλαπλών μεθόδων χρωματογραφίας | 1-2 | ||
Ανταλλαγή buffer | Υπερδιήθηση | 1 | ||
Λυοφιλοποίηση mRNA | Λυοφιλοποίηση | Προκατάψυξη | 2-3 | mRNA λυοφιλοποιημένη σκόνη |
Πρωτογενής ξήρανση (εξάχνωση) | ||||
Δευτερεύουσα ξήρανση (εκρόφηση) | ||||
Ενθυλάκωση mRNA | Ενθυλάκωση LNP | Ενθυλάκωση LNP | 2-3 | mRNA-LNPD προϊόν |
Συγκέντρωση και ανταλλαγή ρυθμιστικού διαλύματος | ||||
Ανάλυση Ποιότητας mRNA | mRNA φαρμακευτική ουσία/λυοφιλοποιημένη σκόνη | Συγκέντρωση, αγνότητα | 1 | Έκθεση δοκιμής |
Ακεραιότητα, αποτελεσματικότητα κάλυψης, διανομή ουράς polyA | 2-5 | |||
mRNA-LNP φαρμακευτικό προϊόν | Αποτελεσματικότητα ενθυλάκωσης | 1 | ||
Μέγεθος σωματιδίων και κατανομή | ||||
Επιφανειακή χρέωση | ||||
Επικύρωση έκφρασης mRNA | Αξιολόγηση κυττάρων 293Τ | Κυψέλη | 4 | |
Παροδική επιμόλυνση κυττάρων | ||||
Παρατήρηση σήματος φθορισμού | 1-3 | |||
Western blot (WB)/Ενζυμική ανοσοπροσροφητική δοκιμασία (ELISA) |
5' Καπ |
▪ Χωρίς καπάκι ▪ Καπ0, συγκαλυμμένο ▪ Καπ1, συγκαλυμμένο ▪ Cap1, ενζυματικό πώμα |
5' UTR/3' UTR |
▪ Ακολουθία Nature UTR ▪ Μεταλλαγμένη/Μηχανική ακολουθία UTR |
3' PolyA Tail |
▪ Ουρά 100A ~120A (συνιστάται) ▪ Τμηματοποιημένη ουρά πολυΑ ▪ Άλλες προσαρμοσμένες ουρές |
Τροποποιημένοι νουκλεοσίτες |
▪ Μη τροποποιημένες βάσεις ▪ Ψευδουριδίνη (Ψ) ▪ Ν1-Μεθυλψευδοουριδίνη (N1Ψ) ▪ 5-μεθυλκυτοσίνη (m5C) ▪ 5-μεθυλουριδίνη (m5U) ▪ 5-μεθοξυουριδίνη (5moU) ▪ 2-θειουριδίνη (s2U) ▪ 2'-O-methyl-U ▪ Άλλες τροποποιήσεις |
Ολοκληρωμένη ροή υπηρεσιών
Παρέχετε μια σειρά υπηρεσιών από το σχεδιασμό αλληλουχίας μπροστινού άκρου έως την προετοιμασία του mRNA back-end, τον ποιοτικό έλεγχο και την επικύρωση έκφρασης.
Διεθνής σχεδιασμός και βελτιστοποίηση ακολουθιών αιχμής
Ο επαγγελματικός σχεδιασμός και η βελτιστοποίηση της αλληλουχίας mRNA διευκολύνουν την αποτελεσματική έκφραση του mRNA.
Διαφοροποιημένες Τροποποιήσεις Νουκλεοτιδίων
Αυξήστε αποτελεσματικά την έκφραση του mRNA και μειώστε τις ανεπιθύμητες ανοσοαποκρίσεις του mRNA.
Πλατφόρμα ώριμου καθαρισμού
Συνδυάζοντας μια συμβατική και αυτοσχεδιασμένη μέθοδο καθαρισμού, λαμβάνονται δείγματα mRNA με υψηλή καθαρότητα
Ολοκληρωμένη πλατφόρμα QC
Εμπλουτίστε τις επιλογές QC για την κάλυψη των απαιτήσεων των συνήθων δοκιμών, όπως η συγκέντρωση, η καθαρότητα και η ακεραιότητα A260/280, καθώς και οι απαιτήσεις ελέγχου υψηλής ποιότητας, όπως η απόδοση κάλυψης/διανομή πολυΑ.
Γρήγορη Παράδοση
Το προσαρμοσμένο mRNA μπορεί να παραδοθεί σε μόλις 7 ημέρες, εκτός από την εξωτερική ανάθεση σύνθεσης αλληλουχιών.