Προκειμένου να βελτιωθεί η σταθερότητα του circRNA και να αποφευχθούν απώλειες στην αποθήκευση και τη μεταφορά, η Yaohai Bio-Pharma μπορεί να παρέχει υπηρεσίες λυοφιλοποίησης circRNA.
Η φαρμακευτική ουσία circRNA (DS) ξηραίνεται με ψύξη και αποθηκεύεται ή μεταφέρεται με τη μορφή λυοφιλοποιημένης σκόνης, η οποία μειώνει σημαντικά την αποδόμηση και την απώλεια του circRNA.
Διαδικασία | Προαιρετική εξυπηρέτηση | Λεπτομέρειες υπηρεσιών | Περίοδος παράδοσης (Ημέρα) | Παραδοτέα |
Λυοφιλοποίηση circRNA | Γέμισμα δείγματος | Πλήρωση | 2-3 | circRNA λυοφιλοποιημένη σκόνη |
Λυοφιλοποίηση | Προκατάψυξη | |||
Πρωτογενής ξήρανση (εξάχνωση) | ||||
Δευτερεύουσα ξήρανση (εκρόφηση) | ||||
Έλεγχος ποιότητας circRNA | Ανασύσταση λυοφιλοποιημένης σκόνης | Ανασύσταση/επαναιώρηση | - | Έκθεση δοκιμής |
Διαλυτότητα λυοφιλοποιημένης σκόνης | Επιθεώρηση εμφάνισης | - | ||
Συγκέντρωση | Φασματοφωτομετρία υπεριώδους (UV). | 0.5 | ||
Καθαρότητα | Ηλεκτροφόρηση γέλης αγαρόζης (AGE)/E-gel | |||
Ενζυμική ανοσοπροσροφητική δοκιμασία (HPLC) - προαιρετική | 1 |
Τα ποιοτικά χαρακτηριστικά των δειγμάτων πριν και μετά τη λυοφιλοποίηση είναι συνεπή, με καλή επαναληψιμότητα.
Τα δείγματα circRNA πριν και μετά τη λυοφιλοποίηση εκφράζουν με επιτυχία την πρωτεΐνη στόχο.
Η λυοφιλοποιημένη σκόνη circRNA είναι εύκολη στην αποθήκευση και τη μεταφορά.
Εκτελείται μια δοκιμασία ηλεκτροφόρησης E-gel για το circRNA πριν και μετά τη λυοφιλοποίηση για να αναλυθεί η ακεραιότητα και η καθαρότητα, αντίστοιχα. Τα αποτελέσματα δείχνουν ότι δεν υπάρχει σημαντική διαφορά μεταξύ των ζωνών circRNA πριν και μετά τη λυοφιλοποίηση και τα αποτελέσματα ανίχνευσης των δειγμάτων μετά τη λυοφιλοποίηση ήταν αναπαραγώγιμα.
Προσδιορισμός δειγμάτων circRNA eGFP πριν και μετά τη λυοφιλοποίηση
Η αξιολόγηση των κυττάρων 293Τ των δειγμάτων circRNA πριν και μετά τη λυοφιλοποίηση δείχνει ότι παρατηρούνται ισχυρά σήματα φθορισμού στα δείγματα circRNA eGFP πριν και μετά τη λυοφιλοποίηση και η πρωτεΐνη στόχος εκφράζεται αποτελεσματικά in vitro.
Έκφραση δειγμάτων circRNA eGFP πριν (αριστερά) και μετά (δεξιά) λυοφιλοποίηση