Σύμφωνα με το κεντρικό δόγμα, το αγγελιοφόρο RNA (mRNA) είναι η γέφυρα για τη μετάδοση γενετικού υλικού από το DNA στις πρωτεΐνες.
Το mRNA παίζει βιολογικό ρόλο κωδικοποιώντας πρωτεΐνες in vivo και το ώριμο mRNA σε ευκαρυωτικούς οργανισμούς αποτελείται από πέντε συστατικά: 5' Cap (δομή καλύμματος), 5' UTR (μη κωδικοποιητική περιοχή), το ORF (ανοιχτό πλαίσιο ανάγνωσης), 3' UTR , και 3' ουρά πολυΑ (πολυαδενυλική ουρά).
Στοιχεία υπηρεσιών
| Διαδικασία | Προαιρετική εξυπηρέτηση | Λεπτομέρειες υπηρεσιών | Περίοδος παράδοσης (Ημέρα) |
| Σχεδιασμός και βελτιστοποίηση αλληλουχίας mRNA | Σχεδιασμός και βελτιστοποίηση ακολουθιών κωδικοποίησης | Ευθυγράμμιση ακολουθίας CDS Βελτιστοποίηση κωδικονίων CDS | 1 |
| Σχεδιασμός και βελτιστοποίηση μη κωδικοποιητικών ακολουθιών | Σχεδιασμός και βελτιστοποίηση ακολουθίας 5' UTR Σχεδιασμός και βελτιστοποίηση ακολουθίας 3' UTR Σχεδιασμός και βελτιστοποίηση ακολουθίας polyA | 1-2 |
Προσαρμοσμένες επιλογές
| 5' UTR/3' UTR | - Ακολουθία UTR της φύσης
- Μεταλλαγμένη/Μηχανική ακολουθία UTR
|
| 3' PolyA Tail | - Ουρά 100A ~120A (συνιστάται)
- Τμηματοποιημένη ουρά πολυΑ
- Άλλη Προσαρμοσμένη ουρά
|
Κοινές Στρατηγικές για Σχεδιασμό Αλληλουχίας mRNA
| Συστατικά mRNA | Βιολογικές Λειτουργίες | Στρατηγικές Βελτιστοποίησης |
| 5' Καπ | Προστατέψτε το mRNA από αποικοδόμηση από εξωνουκλεάσες και ενεργήστε σε συνεννόηση με την ουρά πολυΑ στο 3' άκρο, την πρωτεΐνη δέσμευσης πολυΑ και την πρωτεΐνη παράγοντα έναρξης μετάφρασης για να ξεκινήσει η μετάφραση πρωτεΐνης. | Η φυσική δομή Cap1 αποφεύγει τους υποδοχείς αναγνώρισης προτύπων και έτσι μειώνει τη φυσική ανοσοαπόκριση, η οποία μπορεί να επιτευχθεί με συν-μεταγραφική κάλυψη ενός σταδίου ή ενζυματική κάλυψη δύο σταδίων [βλ. |
| 5' UTR | Το 5' UTR μπορεί να αναγνωριστεί από τα ριβοσώματα, να ρυθμίσει τη μετάφραση του mRNA και να επηρεάσει τη σταθερότητα του mRNA. | Περιέχουν αλληλουχίες Kozak χωρίς πολύ σταθερή δευτερεύουσα δομή. Τα φυσικά UTR γονιδίων υψηλής έκφρασης προτιμώνται για τα mRNA μεταγραφής in vitro (IVT) όπως η α-σφαιρίνη και η β-σφαιρίνη. |
| CDS | Περιοχές κωδικοποίησης πρωτεΐνης και κωδικοποιητικές αλληλουχίες για αντιγόνα, αντισώματα ή άλλες λειτουργικές πρωτεΐνες. | Η βελτιστοποίηση κωδικονίων αυξάνει το επίπεδο μετάφρασης, σημειώνοντας ότι ορισμένα μη βέλτιστα κωδικόνια μπορεί να παίζουν ρόλο στην αναδίπλωση των πρωτεϊνών. |
| 3' UTR | Ρυθμίζει τη μετάφραση και τη σταθερότητα του mRNA. | Τα φυσικά UTR γονιδίων υψηλής έκφρασης προτιμώνται για τα mRNA IVT όπως η α-σφαιρίνη και η β-σφαιρίνη. |
| 3' πολυΑ ουρά | Ρυθμίζει την έκφραση των πρωτεϊνών και προστατεύει τη δομή του καλύμματος από την υποβάθμιση. | Απαιτείται επαρκές μήκος (100-150 bp). Η κωδικοποίηση της ουράς polyA στο πλασμίδιο του εκμαγείου μεταγραφής εξασφαλίζει ένα πιο καθορισμένο μήκος ουράς polyA. |
Τα χαρακτηριστικά μας
- Διαφοροποιημένη επιλογή πηγής UTR
Πολλαπλές πηγές φυσικών και τροποποιημένων βιβλιοθηκών UTR με υψηλή έκφραση. ώριμη στρατηγική τροποποίησης UTR.
- Αιχμής ομάδα βελτιστοποίησης CDS
Συνεργαστείτε με μια επαγγελματική ομάδα αλγορίθμων AI για να ολοκληρώσετε τη βελτιστοποίηση των κωδικονίων.
- Ακόμη και πολυΑ κατανομή ουράς
Προσθέστε αλληλουχίες polyA σύμφωνα με πρότυπα DNA για να ελέγξετε το μήκος mRNA με μεγαλύτερη ακρίβεια.
- Διαφοροποιημένοι συνδυασμοί βελτιστοποίησης
Επίτευξη αποτελεσματικής έκφρασης mRNA με χαμηλή ανοσογονικότητα.
Μελέτη περίπτωσης
Σχεδιασμός αλληλουχίας mRNA διπλού αναφορέα: mRNA mCherry-eGFP
Η υπηρεσία mRNA της Yaohai Bio-Pharma συνεχίζει να αναβαθμίζεται με το σχεδιασμό και τη βελτιστοποίηση μιας διπλής αλληλουχίας γονιδίων αναφοράς, η οποία επιτυγχάνει συνέκφραση διπλών γονιδίων.
Χρησιμοποιώντας ένα συμβατικό αντιδραστήριο επιμόλυνσης, η διπλή αλληλουχία γονιδίου mCherry-eGFP mRNA διαμολύνεται σε κύτταρα 293Τ και δύο φθορίζοντα σήματα mCherry (κόκκινο) και ενισχυμένη πράσινη φθορίζουσα πρωτεΐνη (eGFP) ανιχνεύονται με ταυτόχρονη έκφραση μετά από 48 ώρες στοίβαξης, το γράφημα επισημαίνεται με κίτρινο χρώμα.
Έκφραση mRNA mCherry-eGFP σε κύτταρο 293Τ
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
ΟΧΙ
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
