Στη διαδικασία παρασκευής του in vitro μεταγραφής (IVT) mRNA, απαιτείται γραμμικοποιημένο πλασμιδικό DNA ως πρότυπο μεταγραφής για IVT με τη βοήθεια πολυμεράσης Τ7 RNA. Το υψηλής ποιότητας πλασμιδιακό DNA είναι ζωτικής σημασίας για την in vitro μεταγραφή.
Με βάση την πλατφόρμα υπηρεσίας παρασκευής ώριμων πλασμιδίων, η Yaohai Bio-Pharma μπορεί να προσφέρει μια γραμμική υπηρεσία παρασκευής πλασμιδικού DNA υψηλής καθαρότητας και υψηλών προδιαγραφών για την επίτευξη αποτελεσματικής μεταγραφής IVT.
Στοιχεία υπηρεσιών
| Διαδικασία |
Προαιρετική εξυπηρέτηση |
Λεπτομέρειες υπηρεσιών |
Περίοδος παράδοσης (Εργάσιμη ημέρα) |
| Κυκλική παρασκευή πλασμιδίου |
Γονιδιακή σύνθεση |
Γονιδιακή σύνθεση (τρίτου μέρους) |
7-10 |
| Ενίσχυση πλασμιδίου |
Ενίσχυση πλασμιδίου |
2 |
| Εκχύλιση πλασμιδίου |
| Γραμμικοποιημένο παρασκεύασμα πλασμιδίου |
Γραμμικοποίηση και καθαρισμός πλασμιδίου |
Γραμμικοποίηση πλασμιδίου |
1 |
| Γραμμικοποίηση Καθαρισμός DNA |
| Έλεγχος ποιότητας πλασμιδίου DNA |
Καθαρότητα συγκέντρωσης |
Φασματοφωτομετρία υπεριώδους (UV). |
1-2 |
| Διαμόρφωση πλασμιδίου |
Ηλεκτροφόρηση γέλης αγαρόζης (AGE) |
| Τριχοειδής ηλεκτροφόρηση (CE)-προαιρετική |
| Ταυτοποίηση πλασμιδίου |
Αναγνώριση περιοριστικού ενζύμου/ AGE |
Τα χαρακτηριστικά μας
- Πρότυπο πλασμιδίου Freecut
Ευέλικτη επιλογή μεθόδων γραμμικοποίησης
Βελτιστοποίηση των μεθόδων εξαγωγής και καθαρισμού DNA για την επίτευξη υψηλών ποσοστών ανάκτησης.
- Αυστηρός ποιοτικός έλεγχος
Αυστηρά πρότυπα ελέγχου διεργασιών, με ποσοστό υπερέλικας διαμόρφωσης δειγμάτων πλασμιδίου για έρευνα άνω του 80%.
- Διαδικασία ώριμης πλατφόρμας
Υπηρεσίες παρασκευής πλασμιδίου και ποιοτικού ελέγχου υψηλών προδιαγραφών και υψηλής απόδοσης για την κάλυψη των πειραματικών αναγκών.
Μελέτη περίπτωσης
Λαμβάνοντας ως παράδειγμα το προϊόν mRNA_luciferase του καταλόγου Yaohai Bio-Pharma, το δείγμα πλασμιδίου προτύπου μεταγραφής (βαθμός έρευνας) έχει αναλογία υπερέλικτου άνω του 90%, αναλογία γραμμικοποίησης κοντά στο 100% και επακόλουθη αναλογία μεταγραφής έως 1:200 ( γραμμικοποιημένο πλασμιδικό DNA:mRNA).
Η mRNA_λουσιφεράση που λαμβάνεται μέσω της παρασκευής ενός γραμμικοποιημένου πλασμιδίου ως μήτρας επιμολύνεται σε κύτταρα 293Τ και η δραστικότητα αντίδρασης ενζύμου-υποστρώματος αξιολογείται 24 ώρες μετά τη διαμόλυνση.
Μπορεί να ανιχνευθεί ένα προφανές ισχυρό σήμα δραστηριότητας λουσιφεράσης, δηλ. η πρωτεΐνη λουσιφεράσης εκφράζεται αποτελεσματικά, υποδηλώνοντας ότι η καθαρότητα του εκμαγείου μεταγραφής μπορεί να ικανοποιήσει πλήρως την απαίτηση υψηλής ποιότητας παρασκευής mRNA.
Προσδιορισμός Αναλογίας Υπερτυλιγμένου Πλασμιδίου
Επικύρωση έκφρασης mRNA της λουσιφεράσης In vitro
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
ΟΧΙ
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
