Τα προϊόντα που λαμβάνονται με κυκλοποίηση in vitro και εμπλουτισμό RNase R απαιτούν περαιτέρω απομάκρυνση από την in vitro μεταγραφή (IVT), συμπεριλαμβανομένων των μη καταναλωμένων υποστρωμάτων στην αντίδραση κυκλοποίησης, των παραπροϊόντων της αντίδρασης και του χαραγμένου RNA.
Η Yaohai Bio-Pharma έχει ώριμο ίζημα LiCl, καθαρισμό με μαγνητικά σφαιρίδια, καθαρισμό που αναπτύχθηκε μόνος του και άλλα διαφοροποιημένα διαλύματα καθαρισμού για την αποτελεσματική αφαίρεση διαφόρων ακαθαρσιών και την παρασκευή εξαιρετικά καθαρού circRNA.
Διάλυμα καθαρισμού για μικρές ποσότητες circRNA για επιμόλυνση κυττάρων και ως μέρος πειραμάτων σε ζώα.
Διάλυμα καθαρισμού για μικρές ποσότητες circRNA για επιμόλυνση κυττάρων και ως μέρος πειραμάτων σε ζώα.
Σενάρια εφαρμογής με υψηλότερη ποιότητα;
Σταθερή και κλιμακούμενη διαδικασία καθαρισμού για την κάλυψη των απαιτήσεων παραγωγής GMP.
Διαδικασία | Προαιρετική εξυπηρέτηση | Λεπτομέρειες υπηρεσιών | Περίοδος παράδοσης (Ημέρα) | Παραδοτέα |
καθαρισμός circRNA | Συμβατικό διάλυμα καθαρισμού | Καθίζηση χλωριούχου λιθίου | 1 | φαρμακευτική ουσία circRNA |
Καθαρισμός με μαγνητικά σφαιρίδια | ||||
Καθαρισμός circRNA υψηλής καθαρότητας | Προπαρασκευαστική υγρή χρωματογραφία υψηλής απόδοσης (HPLC) | 1-2 | ||
Ανταλλαγή buffer | Υπερδιήθηση | 1 | ||
Έλεγχος ποιότητας circRNA | Συγκέντρωση/κάθαρση | Φασματοφωτομετρία υπεριώδους (UV). | 0.5 | Έκθεση δοκιμής |
Καθαρότητα | Ηλεκτροφόρηση γέλης αγαρόζης (AGE)/E-gel | |||
HPLC-προαιρετικό | 1 |
Μπορούν να επιτευχθούν σενάρια εφαρμογής.
circRNA με καθαρότητα μεγαλύτερη από 90%.
Μέσω του αυστηρού ελέγχου των RNases στο πειραματικό περιβάλλον και τα αναλώσιμα, αποτρέπεται αποτελεσματικά η αποικοδόμηση του RNA.
Η Yaohai Bio-Pharma έχει δημιουργήσει ένα ώριμο διάλυμα καθαρισμού circRNA που μπορεί να αφαιρέσει αποτελεσματικά διάφορες ακαθαρσίες που σχετίζονται με τη διαδικασία.
Τα κυκλικά προϊόντα RNA που καθαρίζονται με το συμβατικό διάλυμα εξακολουθούν να αναμιγνύονται προφανώς με ραβδωτό RNA και εσώνια.
Μετά το διάλυμα καθαρισμού που αναπτύχθηκε από την Yaohai Bio-Pharma, διάφορες ακαθαρσίες γραμμικού RNA, όπως ραβδωτό RNA και εσώνια, μπορούν να αφαιρεθούν επιτυχώς.
Επικύρωση έκφρασης circRNA
Χρησιμοποιώντας ένα συμβατικό λιπόσωμα, καθαρισμένο eGFP circRNA διαμολύνεται σε κύτταρα 293Τ και ένα σήμα φθορισμού παρατηρείται μετά από 24 ώρες και συνεχίζει να ενισχύεται στις 48 ώρες. Το σήμα φθορισμού μπορεί ακόμα να ανιχνευθεί την 7η ημέρα και τη 14η ημέρα μετά τη διαμόλυνση.