চক্রাকার RNA (circRNA)

পদ্ধতি

সার্কুলার RNAs (circRNAs) ১৯৭৯ সালে প্রথম অ-কোডিং RNA হিসাবে আবিষ্কৃত হয়েছিল; ২০১৫ সালে ড্রোসোফিলায় ট্রান্সক্রিপ্টেড circRNAs খুঁজে পাওয়া যাবার পরই চিকিৎসাগত এবং প্রতিরক্ষামূলক উদ্দেশ্যে in vitro circRNAs এর অধ্যয়ন শুরু হয়েছিল।

circRNAs স্বয়ংক্রিয়ভাবে বিস্তারিত হয় এবং তাই এর কোনও রূপান্তরিত সংরचনা থাকে না যেমন 5' cap বা 3' polyA tail। এই সংরচনা তাদেরকে আরও স্থিতিশীল এবং RNase R মতো এক্সোনিউক্লিয়েজের বিরুদ্ধে প্রতিরোধী করে।

সার্কুলার RNA (circRNA) এর সংরচনা উপাদান

সার্কুলার RNA (circRNA) সংশ্লেষণের জন্য টেমপ্লেট DNA সাধারণত আন্তর্বর্তী রিবোসোম এন্ট্রি সাইট (IRES), ওপেন রিডিং ফ্রেম (ORF) এবং অন্যান্য গুরুত্বপূর্ণ উপাদান যা in vitro পরিসংখ্যানের জন্য গুরুত্বপূর্ণ। উদাহরণস্বরূপ, আমরা একটি প্লাজমিড ডিজাইন করেছি যা in vitro transcript (IVT) টেমপ্লেট হিসেবে ব্যবহৃত হয়, যা হোমোলজি আর্মস, 3' intron, 3' exon, IRES, ORF, 5' exon এবং 5' intron এর সংমিশ্রণ থেকে গঠিত, যা self-splicing পদ্ধতি দ্বারা circRNA প্রস্তুত করতে ব্যবহৃত হয়।

আন্তর্বর্তী রিবোসোম এন্ট্রি সাইট (IRES) সার্কুলার RNA (cirRNAs) অনুবাদের জন্য গুরুত্বপূর্ণ ভূমিকা পালন করে। Encephalomyocarditis virus (EMCV) IRES, coxsackievirus B3 (CVB3) IRES, human rhinovirus B3 (HRV-B3) IRES এবং অন্যান্য IRES সাধারণত ব্যবহৃত হয় বাইরের সংশ্লেষণের জন্য cirRNAs অনুবাদের জন্য।

জীবানুগত প্রক্রিয়ায় circRNA লিনিয়ার পূর্বসূচকের চক্রবদ্ধকরণ হল circRNA সংশ্লেষণের একটি গুরুত্বপূর্ণ ধাপ, সাধারণত রসায়নিক, অনুzyme-ভিত্তিক এবং রাইবোসম-মাধ্যমিক নিজস্ব পুনর্নির্মাণের পথের মাধ্যমে। ১৯৮৮ সালে উদ্ভাবিত রসায়নিক পদ্ধতি ছিল এই ক্ষেত্রের একটি মilestone, কিন্তু আজকাল এটি ব্যবহার করা হয় না কারণ এটি উচ্চ খরচ, কম উৎপাদন, বেশি পরিমাণের উপপণ্য এবং শুধুমাত্র ৭০ নিউক্লিওটাইডের দৈর্ঘ্যের RNA-এর জন্য উপযুক্ত।

RNA-এর চক্রবদ্ধকরণের জন্য অনুzyme-ভিত্তিক পদ্ধতি T4 ফেজিওবায়ারাসের অনুzymes বা ribozymes যেমন T4 DNA ligase (T4 Dnl 1), T4 RNA ligase 1 (T4 Rnl 1) এবং T4 RNA ligase 2 (T4 Rnl 2) উপর ভিত্তি করে। T4 ফেজিওবায়ারাস অনুzymes দ্বারা চক্রবদ্ধ RNA তৈরি করতে হলে, নিউক্লিওসাইড monophosphates হতে হবে 5' প্রান্তে অবস্থিত এবং এটি র‌্যানা এর 3' প্রান্তে OH গ্রুপের সাথে যুক্ত। কারণ বিক্রিয়ার সময় nucleoside triphosphates যোগ হয়, IVT RNA-এ 5' প্রান্তে guanosine triphosphate (GTP) থাকে।

রিবোজাইমগুলি হল আরএনএ অনুক্রম যা অতিরিক্ত এনজাইমের প্রয়োজন ছাড়াই লিনিয়ার আরএনএ অণুকে সার্কুলার আরএনএ (সার্কিউলার আরএনএ) এ পরিণত করতে সহায়তা করে। এই সেলফ-অ্যাসেম্বলি প্রক্রিয়াটি দুটি ক্রমবর্ধমান ট্রান্সেস্টারিফিকেশন বিক্রিয়া জড়িত, যা নির্দিষ্ট সাইটে প্রয়োজনীয় সার্কিউলার আরএনএ পণ্য গঠন নিশ্চিত করে। গ্রুপ আই ইনট্রন সেলফ-স্প্লাইসিং পদ্ধতি, যা ইনট্রন এবং এক্সন এনক্যাপসুলেশন (PIE) নামেও পরিচিত, এটি ৫ কিবি এর চেয়ে বড় সার্কিউলার আরএনএ তৈরি করতে দেয় এবং এটি বিস্তৃতভাবে অধ্যয়ন করা হয়েছে এবং উপযোগী প্রমাণিত হয়েছে।

সার্কুলার আরএনএ (সার্কিউলার আরএনএ) এর প্রয়োগ

সার্কিউলার আরএনএ ভ্যাকসিন

রৈখিক mRNA-এর মতো, circRNA-গুলি লক্ষ্য সেলে নির্দিষ্ট প্রোটিনে রূপান্তরিত হতে পারে এবং শক্তিশালী হামলা এবং সেলুলার অনুরক্ষণশীলতা উদ্বোধিত করতে পারে। সাম্প্রতিককালে, কিছু গবেষণার দল সফলভাবে COVID-19-কে রোধ করার জন্য circRNA ভ্যাকসিন উন্নয়ন করেছে। তাদের ফলাফল শুধুমাত্র রৈখিক mRNA ভ্যাকসিনের সুবিধাগুলি থাকা ছাড়াও, রৈখিক mRNA-এর তুলনায় আরও ভালো স্থিতিশীলতা এবং প্রোটিন প্রকাশের আরও দীর্ঘ অवস্থার দাবি করেছে। সুতরাং, কম ডোজেও circRNA ভ্যাকসিন যথেষ্ট অনুরক্ষণশীল প্রতিক্রিয়া উত্পন্ন করতে পারে।

এছাড়াও, কিছু গবেষক মনে করেন যে circRNA ভ্যাকসিন, পরবর্তী-প্রজন্ম mRNA-রূপে, ভবিষ্যতে সাধারণ ভাইরাল/ব্যাকটেরিয়াল রোগ এবং মূল্যবান নতুন আগ্রাসক রোগের বিরুদ্ধে প্রতিরোধ করতে এবং ক্যান্সার এবং অন্যান্য রোগের চিকিৎসায় কার্যকর যন্ত্র হিসেবে ব্যবহৃত হতে পারে।

CircRNA in CAR / TCR-T Therapy

বৃত্তাকার RNA ক্ষেত্রের একজন পথিক, ORNA ইনসিটু কাইমেরিক অ্যান্টিজেন রিসেপ্টর (CAR) চিকিৎসা বিকাশ করছে যা ইনসিটু চিকিৎসা ব্যবহার করে যা ORN-101 দ্বারা পরিচালিত হয়, একটি LNP-এনক্যাপসুলেটেড বৃত্তাকার RNA, যা রোগীদের অভিমুখীকরণ সেল নিয়ন্ত্রণ করতে হবে। ORN-101 উচ্চ প্রকাশনা করে CAR ড্রাইভেন একটি অপটিমাইজড IRES উপাদান দ্বারা। প্রাণী মডেলে, ORN-101 দেখা গেছে যে এটি টিউমার চাপ ও ধ্বংস ঘটায়, যা দেখায় যে ORN-101-ভিত্তিক এন্টিক্যান্সার চিকিৎসা সাধারণ CAR-T সেল চিকিৎসা সঙ্গে মিশে যেতে পারে।

এছাড়াও, ঝাং এবং তাঁর দল প্রতিনিধিত্বমূলক এন্টিজেন-স্পষ্ট T-সেল রিসেপ্টর (TCR)-T চিকিৎসায় circRNA-এর জীবনধারণ এবং চিকিৎসাগত কার্যকারিতা মূল্যায়ন করেছেন। তারা একটি circRNA ডিজাইন করেছেন যা pp65-TCR-T এনকোড করে যা সাইটোমেগালোভাইরাস (CMV) এর pp65 এপিটোপ লক্ষ্য করে। এছাড়াও, pp65-TCR প্রাথমিক T সেলে 7 দিনের বেশি সময় জন্য প্রকাশিত হয়। এছাড়াও, circRNA-pp65-TCR-T সেল pp65-এবং HLA-প্রকাশক টিউমার সেলকে বিশেষ এবং স্থায়ীভাবে হত্যা করে এবং মাউসের বেঁচে থাকার সময় সামান্যভাবে বাড়িয়েছে।

এটি আরো দেখানো হয়েছে যে pp65 circRNA দ্বারা ট্রান্সফেক্টেড কোষগুলি লিনিয়ার mRNA-এর তুলনায় আরো ভালো অভিমান প্রতিক্রিয়া প্রদর্শন করে।

যাওহাইয়ের বায়ো-ফার্মা লম্বা-কোডিং RNA-এর জন্য এক-স্টপ CRDMO সমাধান

ক্যাটালগ আরএনএ পণ্য

ক্যাটালগ এমআরএনএ পণ্য
ক্যাটালগ সাRNA পণ্য
ক্যাটালগ সার্কুলার RNA পণ্য

맞춤 RNA সংশ্লেষণ

맞춤 mRNA সংশ্লেষণ
কัส্টম এসএআরএনএ সিনথেসিস
কস্টম সার্কুলার আরএনএ সিনথেসিস

mRNA CDMO সেবা

প্রক্রিয়া উন্নয়ন
GMP উৎপাদন
অস্ত্রধারী ফিল এবং ফিনিশ
বিশ্লেষণ এবং পরীক্ষা

সব ক্যাটাগরি

চক্রাকার RNA (circRNA)

পদ্ধতি