কোষ-ভিত্তিক ক্ষমতার পরীক্ষা
এমআরএনএ পোটেন্সি অ্যাসের তাৎপর্য
এমআরএনএ ভ্যাকসিন এবং থেরাপিউটিকসের দ্রুত বিকাশের সাথে, এমআরএনএর অনুবাদমূলক দক্ষতার সাথে জড়িত ক্ষমতা (তাদের জৈবিক কার্যকলাপ সংজ্ঞায়িত) পরীক্ষা করার জন্য বিশ্লেষণ পদ্ধতির একটি নির্দিষ্ট প্যানেল প্রয়োজন। এই পদ্ধতিগুলি সাধারণত সেল ট্রান্সফেকশন এবং লক্ষ্য প্রোটিনের কার্যকরী অ্যাসেসের উপর ভিত্তি করে।
ইয়াওহাই বায়ো-ফার্মা এমআরএনএ ওষুধের পদার্থ বা এলএনপি পণ্যগুলির জন্য সেল-ভিত্তিক ক্ষমতার অ্যাসেস অফার করে, যার মধ্যে সেল ট্রান্সফেকশন (293T, HepG2, HeLa, K562, U937, Raw264.7 সেল, ইত্যাদি) এবং ELISA বা ওয়েস্টার্ন ব্লটিং (WB) অ্যাসেস রয়েছে।
পোটেনেন্সি অ্যাসেসের জন্য নিয়ন্ত্রক প্রয়োজনীয়তা
ডব্লিউএইচও-র নিয়ন্ত্রক বিবেচনা অনুসারে, “প্রতিটি চূড়ান্ত ভ্যাকসিনের ক্ষমতা একটি উপযুক্ত পরিমাণগত এবং বৈধ কার্যকরী পদ্ধতি(গুলি) ব্যবহার করে নির্ধারণ করা উচিত। সম্ভাব্য ইন ভিট্রো পোটেনসি অ্যাসেসের মধ্যে সেল-ভিত্তিক ট্রান্সফেকশন সিস্টেম বা সেল-ফ্রি অ্যাসেস অন্তর্ভুক্ত থাকতে পারে।" এবং ইউএসপি এমআরএনএর ক্ষমতা পরীক্ষা করার জন্য একটি "সেল-ভিত্তিক অ্যাস" সুপারিশ করেছে, অর্থাৎ, লক্ষ্য প্রোটিনের প্রকাশ।
বিশ্লেষণী পদ্ধতি
|
বিশ্লেষণ
|
পদ্ধতি
|
|
শক্তি পরীক্ষা
|
কোষ-ভিত্তিক স্থানান্তর এবং লক্ষ্য প্রোটিন সনাক্ত করে:
293T, HepG2, HeLa, K562, U937, Raw264.7 কোষ, ইত্যাদি।
|
কার্যপ্রণালী
ধাপ 1. mRNA বা mRNA-LNP দিয়ে কোষ-ভিত্তিক স্থানান্তর
কোষগুলি mRNA বা mRNA-LNP দিয়ে সংস্কৃত এবং স্থানান্তরিত হয়। বিস্তারিতভাবে, mRNA একটি ট্রান্সফেকশন রিএজেন্টের সাথে মিশ্রিত হওয়ার পরে স্থানান্তরিত হয়, যখন mRNA-LNP সরাসরি কোষে স্থানান্তরিত হয়। 24-48 ঘন্টা পরে, সেন্ট্রিফিউগেশন দ্বারা প্রকাশিত প্রোটিন ধারণকারী সুপারনাট্যান্টকে স্পষ্ট করুন।
ধাপ 2. লক্ষ্য প্রোটিনের কার্যকরী পরীক্ষা
লক্ষ্য প্রোটিনের কার্যকরী বাঁধাই মূল্যায়ন করতে ELISA বা WB assays সম্পাদন করুন।
কেস স্টাডি
এমআরএনএ নমুনাগুলির কোষ-ভিত্তিক শক্তি পরীক্ষা
ইয়াওহাই-বায়োফার্মা এমআরএনএর জন্য কোষ-ভিত্তিক ক্ষমতা পরীক্ষা পদ্ধতি তৈরি করেছে, যার মধ্যে কোষ সংস্কৃতি, কোষ স্থানান্তর এবং প্রোটিন কার্যকরী পরীক্ষা জড়িত। আমরা eGFP mRNA, mCherry mRNA, luciferase mRNA, 293T কোষে স্পাইক প্রোটিন mRNA স্থানান্তর করেছি এবং ফ্লুরোসেন্স, লুমিনেসেন্ট বা রঙিন সংকেত, WB, ELISA এর মাধ্যমে লক্ষ্য প্রোটিন সনাক্ত করেছি।
ইয়াওহাই বায়ো-ফার্মা দ্বারা এমআরএনএ পণ্যের সেল-ভিত্তিক ক্ষমতার পরীক্ষা
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
কোন
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
