ইন ভিট্রো ট্রান্সক্রিপশন (IVT) mRNA-এর প্রস্তুতি প্রক্রিয়ায়, T7 RNA পলিমারেজের সাহায্যে IVT-এর ট্রান্সক্রিপশন টেমপ্লেট হিসাবে লিনিয়ারাইজড প্লাজমিড ডিএনএ প্রয়োজন। ইন ভিট্রো ট্রান্সক্রিপশনের জন্য উচ্চ-মানের প্লাজমিড ডিএনএ অত্যন্ত গুরুত্বপূর্ণ।
পরিপক্ক প্লাজমিড প্রস্তুতি পরিষেবা প্ল্যাটফর্মের উপর ভিত্তি করে, ইয়াওহাই বায়ো-ফার্মা দক্ষ IVT ট্রান্সক্রিপশন অর্জনের জন্য উচ্চ বিশুদ্ধতা এবং উচ্চ মানের একটি লিনিয়ারাইজড প্লাজমিড ডিএনএ প্রস্তুতি পরিষেবা অফার করতে পারে।
প্রক্রিয়া | ঐচ্ছিক পরিষেবা | পরিষেবা বিশদ | প্রসবের সময়কাল (কাজের দিন) |
বৃত্তাকার প্লাজমিড প্রস্তুতি | জিন সংশ্লেষণ | জিন সংশ্লেষণ (তৃতীয় পক্ষ) | 7-10 |
প্লাজমিড পরিবর্ধন | প্লাজমিড পরিবর্ধন | 2 | |
প্লাজমিড নিষ্কাশন | |||
লিনিয়ারাইজড প্লাজমিড প্রস্তুতি | প্লাজমিড লিনিয়ারাইজেশন এবং পরিশোধন | প্লাজমিড লিনিয়ারাইজেশন | 1 |
লিনিয়ারাইজেশন ডিএনএ পরিশোধন | |||
প্লাজমিড ডিএনএ মান নিয়ন্ত্রণ | ঘনত্ব বিশুদ্ধতা | আল্ট্রাভায়োলেট (ইউভি) স্পেকট্রোফটোমেট্রি | 1-2 |
প্লাজমিড গঠন | অ্যাগারোজ জেল ইলেক্ট্রোফোরেসিস (AGE) | ||
কৈশিক ইলেক্ট্রোফোরেসিস (CE)-ঐচ্ছিক | |||
প্লাজমিড শনাক্ত করুন | সীমাবদ্ধতা এনজাইম সনাক্তকরণ/ AGE |
লিনিয়ারাইজেশন পদ্ধতির নমনীয় নির্বাচন
উচ্চ পুনরুদ্ধারের হার অর্জনের জন্য ডিএনএ নিষ্কাশন এবং পরিশোধন পদ্ধতির অপ্টিমাইজেশন।
80% এর বেশি গবেষণার জন্য প্লাজমিড নমুনার একটি সুপারহেলিকাল কনফর্মেশন রেট সহ কঠোর প্রক্রিয়া নিয়ন্ত্রণের মান।
পরীক্ষামূলক প্রয়োজন মেটাতে উচ্চ মান এবং উচ্চ দক্ষতা প্লাজমিড প্রস্তুতি এবং মান নিয়ন্ত্রণ পরিষেবা।
ইয়াওহাই বায়ো-ফার্মা ক্যাটালগ mRNA_luciferase পণ্যটিকে উদাহরণ হিসাবে নিলে, ট্রান্সক্রিপশন টেমপ্লেট প্লাজমিড নমুনা (গবেষণা গ্রেড) এর একটি সুপারহেলিকাল অনুপাত 90% এর বেশি, একটি লিনিয়ারাইজেশন অনুপাত 100% এর কাছাকাছি এবং পরবর্তী ট্রান্সক্রিপশন অনুপাত 1:200 পর্যন্ত ( লিনিয়ারাইজড প্লাজমিড DNA:mRNA)।
একটি টেমপ্লেট হিসাবে লিনিয়ারাইজড প্লাজমিড তৈরির মাধ্যমে প্রাপ্ত mRNA_luciferase 293T কোষে স্থানান্তরিত হয় এবং এনজাইম-সাবস্ট্রেট প্রতিক্রিয়া কার্যকলাপ 24 ঘন্টা পরে মূল্যায়ন করা হয়।
একটি সুস্পষ্ট শক্তিশালী luciferase কার্যকলাপ সংকেত সনাক্ত করা যেতে পারে, অর্থাৎ, luciferase প্রোটিন দক্ষতার সাথে প্রকাশ করা হয়, ট্রান্সক্রিপশন টেমপ্লেটের বিশুদ্ধতা উচ্চ-মানের mRNA প্রস্তুতির প্রয়োজনীয়তা সম্পূর্ণরূপে পূরণ করতে পারে।
সুপারকোয়েলড প্লাজমিড রেশিও অ্যাস
ভিট্রোতে লুসিফেরেজ এমআরএনএ এক্সপ্রেশনের বৈধতা