Onthulling van die optimale dosis van eGFP Reporter RNA

In molekulêre biologie en biotegnologie het verbeterde groen fluoresserende proteïen (eGFP) na vore gekom as 'n deurslaggewende verslaggewergeen as gevolg van sy vermoë om heldergroen fluoressensie by 509 nm te produseer. Hierdie proteïen, oorspronklik geïsoleer van die jellievis Aequorea victoria, is 'n direkte opsporingsmerker in soogdierselkulture, wat die monitering en optimalisering van transfeksiedoeltreffendheid vergemaklik. Die vraag ontstaan ​​egter: wat is die optimale dosis van eGFP-verslaggewer-RNA om die verlangde uitdrukkingsvlakke te bereik?

Navorsing het getoon dat die doeltreffendheid van eGFP-verslaggewer-RNA baie afhang van die dosis daarvan, veral in die konteks van sirkelvormige RNA (sirkulêre RNA) en selfversterkende mRNA (saRNA) stelsels. Studies wat deur die Katrien Remaut-span by die Universiteit Gent se Nanogeneeskunde Navorsingsgroep uitgevoer is, het die ingewikkelde verband tussen saRNA-dosering en die translasiedoeltreffendheid daarvan in retinale selle uitgelig. Hulle het ontdek dat lae dosisse saRNA, onder die drempel vir aangebore immuunaktivering, doeltreffende proteïenuitdrukking fasiliteer. Dit beklemtoon die belangrikheid van presiese dosisbeheer om die volle potensiaal van eGFP-verslaggewer-RNA te benut.

In praktiese toepassings kan die algemeen gebruikte konsentrasies van eGFP mRNA wissel van mikrogram (μg) tot nanogram per mikroliter (ng/μL). Byvoorbeeld, in transfeksie-eksperimente is getoon dat dosisse wat wissel van 0.05 μg tot 0.5 μg eGFP-mRNA beduidende uitdrukkingsvlakke in verskeie seltipes lewer, met positiewe selpersentasies wat in sekere gevalle so hoog as 99-100% bereik. Veral, by dosisse onder 0.1 μg, toon saRNA superieure uitdrukkingsvlakke in vergelyking met lineêre mRNA, wat sy selfversterkende voordeel demonstreer.

Die veelsydigheid van eGFP verslaggewer RNA lê nie net in sy helder en stabiele fluoressensie nie, maar ook in sy aanpasbaarheid by verskillende eksperimentele opstellings. Navorsers kan die dosis fyn instel om by hul spesifieke behoeftes te pas, om presiese beheer oor geenuitdrukkingsvlakke te verseker. Hierdie kenmerk maak eGFP 'n waardevolle hulpmiddel vir die bestudering van geenfunksie, die monitering van sellelot en die optimalisering van transfeksieprotokolle.

Ten slotte, die optimale dosis van eGFP verslaggewer RNA is hoogs afhanklik van die eksperimentele konteks en gewenste uitkomste. Deur die toepaslike dosis noukeurig te kies, kan navorsers die volle potensiaal van hierdie veelsydige verslaggewergeen benut, wat ons begrip van molekulêre meganismes bevorder en innovasie in biotegnologie aandryf.

Yaohai Bio-Pharma is die eerste en grootste biologiese middels wat toegewy is aan mikrobiese uitdrukkingstelsel CRDMO in Groter China. Ons is daartoe verbind om te voldoen aan die kliniese en kommersiële behoeftes van ons globale kliënte vir biologiese medisyne, entstowwe en diagnostiek vir menslike en veeartsenykundige gebruik.

Ons is ook aktief op soek na institusionele of individuele globale vennote. Ons bied die mees mededingende vergoeding in die bedryf. As jy enige vrae het, voel asseblief vry om ons te kontak: [email protected]