Rekombinante Proteïenproduksie: Gemanipuleerde E. coli-stamme

Escherichia coli (E. coli) het 'n beduidende rol gespeel in die vervaardiging van rekombinante proteïene in die biofarmaseutiese industrie, wat dien as die eerste uitdrukkingsvektor vir die vervaardiging van biologiese medisyne. E. coli spog onder andere met vinnige groei, gerieflike genetiese manipulasie en vinnige sintese van rekombinante proteïene. Uitgebreide modifikasies het E. coli 'n optimale keuse vir proteïenuitdrukking gemaak, wat gelei het tot die ontwerp van verskeie gemanipuleerde stamme van E. coli.

Yaohai Bio-Pharma spesialiseer in die verskaffing van eenstop-uitkontrakteringsdienste vir die fermentasie, suiwering, formuleringsprosesontwikkeling en produksie van 'n reeks biofarmaseutiese middels deur gebruik te maak van E. coli-uitdrukkingstelsels. Wat die uitgebreide ervaring van Yaohai betref, het ons opgesom dat vier algemene E. coli-stamme vir rekombinante proteïenproduksie en hul kenmerke gebruik word.

BL 21-stam

Afgelei van die E. coli B-lyn, het die BL21-stam nie Lon-protease en buitemembraanprotease OmpT nie. Lon-protease breek hoofsaaklik eksogene proteïene af, terwyl OmpT hoofsaaklik ekstrasellulêre matriksproteïene afbreek. Die afwesigheid van hierdie twee sleutelproteases kan die afbraak van rekombinante proteïene effektief voorkom.

Origami-stam

Origami-stam, 'n afgeleide van E. coli K-12, het mutasies in tioredoksienreduktase en glutathionreduktase, wat die vorming van korrek gevoude proteïene wat disulfiedbindings bevat fasiliteer en proteïenoplosbaarheid verbeter. Die Origami-stam, insluitend Origami, Origami 2 en Origami B, is geskik vir die uitdrukking van aktiewe proteïene wat disulfiedbindings bevat.

Skommel spanning

SHuffle-stam druk die disulfiedbinding-isomerase DsbC in die sitoplasma konstitutief uit, wat die vorming van korrekte disulfiedbindings in geoksideerde proteïene bevorder. Dit dien ook as 'n molekulêre chaperone vir proteïenvou, wat help met die vorming van die korrekte bouvorm.

Rosetta-stam

Die Rosetta-stam vul E. coli aan met tRNA's wat ooreenstem met seldsame kodons, met die doel om die uitdrukkingsvlak van eksogene gene, veral eukariotiese gene, in prokariotiese sisteme te verbeter. Afgelei van BL21 en wat die chlooramfenikol-weerstandige pRARE-plasmied dra, vul dit ses tRNA's aan wat ooreenstem met seldsame kodons (AUA, AGG, AGA, CUA, CCC en GGA) wat oorspronklik afwesig was in E. coli, wat 'n meer "universele" proteïenuitdrukking verskaf.

Gevolgtrekking

Die drie hooffaktore vir suksesvolle produksie van rekombinante proteïene is die gasheer-, vektor- en kultuurtoestande. Gebaseer op 'n begrip van die fisies-chemiese eienskappe van die rekombinante proteïen, die unieke voordele van elke stam, en die spesifieke behoeftes van die eksperiment, moet die mees geskikte gasheer gekies word. Daarbenewens moet faktore soos plasmiedvektore, temperatuur en induseerders geoptimaliseer word om die proteïenuitdrukking te verbeter.

Yaohai Bio-Pharma is ook aktief op soek na institusionele of individuele globale vennote en bied die mees mededingende vergoeding in die bedryf. As jy enige vrae het, voel asseblief vry om ons te kontak: [email protected]