Rekombinante Proteïeenproduksie: Gegenereerde E. coli-streine

Escherichia coli (E. coli) het 'n beduidende rol gespeel in die vervaardiging van rekombinante proteïene in die biotegnologiebedryf, deur as die eerste uitdruksvektor vir die vervaardiging van biologiese medisyne te dien. E. coli het die voordele van vinnige groei, maklike genetiese manipulasie en vinnige sintese van rekombinante proteïene. Uitgebreide wysigings het E. coli tot 'n ideale keuse vir proteïenuitdruk gemaak, wat gelei het tot die ontwerp van verskeie ingenieer-strains van E. coli.

Yaohai Bio-Pharma spesialiseer in die verskaffing van een-stop outbesteding dienste vir die fermantasie, verrening, formuleringsprosesontwikkeling en produksie van 'n reeks biotegnologiese produkte deur gebruik te maak van E. coli-uitdruksstelsels. Gelet op die wydverspreide ervaring van Yaohai, het ons saamgestel dat vier algemene E. coli-streine gebruik word vir rekombinante proteïenproduksie en hul kenmerke.

BL 21 strain

Afgeleid van die E. coli B-lyne, ontbreek die BL21-streep Lon-protease en buite membraan protease OmpT. Lon-protease breek hoofsaaklik eksogene proteïene af, terwyl OmpT hoofsaaklik extracellulêre matriksproteïene degradeer. Die afwesigheid van hierdie twee sleutelproteasies kan effektief die degradasie van rekombinante proteïene voorkom.

Origami streep

Origami streep, 'n afleiding van E. coli K-12, het mutasies in tioriedoksin-reduktase en glutasione-reduktase, wat die vorming van korrek gevoude proteïene met dissulfiedbindinge ondersteun en proteïeenoplosbaarheid verhoog. Die Origami strepe, insluitend Origami, Origami 2, en Origami B, is geskik vir die uitdrukking van aktiewe proteïene wat dissulfiedbindinge bevat.

SHuffle streep

SHuffle-strein druk die disulfiedbinding-isomeraas DsbC konstitutief in die sielplasma uit, wat die vorming van korrekte disulfiedbindings in oksideerde proteïne bevorder. Dit dien ook as 'n molekulêre chaperone vir proteïenvou, wat help om die korrekte konformasie te vorm.

Rosetta-strein

Die Rosetta-strein aanvul E. coli met tRNAs wat ooreenstem met seldsame kodons, wat strewe om die uitdrukkingsvlak van eksogene gene, veral eukaryotiese gene, in prokaryotiese sisteme te verbeter. Afgelei van BL21 en dra die chloramfenikol-resistente pRARE-plasmid, wat ses tRNAs aanvul wat ooreenstem met seldsame kodons (AUA, AGG, AGA, CUA, CCC, en GGA) wat oorspronklik afwesig was in E. coli, dit verskaf 'n meer "universele" proteïenuitdruk.

Gevolgtrekking

Die drie hooffaktore vir suksesvolle produksie van rekombinante proteïene is die gasheer, vektor en kultuurvoorwaardes. Gebaseer op 'n begrip van die fisiek-kemiese eienskappe van die rekombinante proteïen, die unieke voordele van elke stres en die spesifieke behoeftes van die eksperiment, moet die mees geskikte gasheer gekies word. Daarby moet faktore soos plasmidvektore, temperatuur en induseerders geoptimeer word om die proteïen-ekspressie te verbeter.

Yaohai Bio-Pharma soek ook aktief globale instellings- of individuele partners en bied die mees mededingende vergoeding in die bedryf. As jy enige vrae het, aarzel asb nie om met ons in kontak te kom: [email protected]