Championing Reporter RNA Modifikasie Metodes

By die keuse van watter metode van verslaggewer-mRNA-modifikasies verkieslik is, is daar geen definitiewe antwoord nie, aangesien elke metode en verslaggewergeen sy eie voordele en toepaslike scenario's het. Hier is 'n paar algemene mRNA-modifikasiemetodes en verslaggewergene, tesame met hul eienskappe en geskiktheid.

mRNA Modifikasie Metodes

Metilering:

1. m6A: Geassosieer met mRNA stabiliteit, splitsing, translasie en miRNA verwerking. Opsporingsuitdagings sluit teenliggaampeleksie en lokalisering in.
2. 5' Cap Nm: Verbeter stabiliteit, splitsing, poliadenilering en kernuitvoer. Help om self-RNA van vreemde RNA te onderskei.
3. Pseudouridilering: Verander kodons, verhoog stabiliteit en reageer op stres. Gekataliseer deur pseudouridien sintases.

Bekendstellings van nie-natuurlike nukleotiede:

1. Ingestel tydens transkripsie met 'n dubbele chemiese modifikasiestrategie. Dit verbeter stabiliteit, doeltreffendheid en proteïenuitdrukking.

Verslaggewer Gene

1. Groen Fluorescent Protein Gene (GFP): Voordele: Maklik om op te spoor, stabiele fluoressensie-eienskappe, nie-giftig vir selle, geskik vir lewendige selbeelding. Nadele: Beperkte fluoressensie-intensiteit.
2. Verbeterde groen fluoresserende proteïen (eGFP): Voordele: Meer as 6 keer helderder as wilde-tipe GFP, wat dit meer geskik maak as 'n verslaggewergeen vir die bestudering van geenuitdrukking, regulering, seldifferensiasie en proteïenlokalisering en vervoer binne organismes.
3. Rooi fluoresserende proteïene (bv. mCherry): Voordele: Langer opwekking en emissie golflengtes, wat lei tot laer agtergrond tydens intrasellulêre beelding, uitstekende fluoressensie helderheid en fotostabiliteit, en laer sellulêre toksisiteit. Nadele: Word dalk nie so algemeen soos GFP in sekere eksperimentele toestande gebruik nie.
4. Vuurvliegie Luciferase: Voordele: In die teenwoordigheid van ATP, magnesiumione en suurstof, kan dit die oksidasie van luciferien in oksilusiferien kataliseer, wat bioluminessensie uitstraal. Dit is geskik vir gebruik as 'n kontrole om die translasiedoeltreffendheid van teikengene in soogdierselle, sellewensvatbaarheid en in vivo beeldtoetse te bestudeer.

Gevolgtrekking

By die keuse van watter metode van verslaggewer-mRNA-modifikasies verkieslik is, hang dit af van spesifieke eksperimentele doelwitte, navorsingsagtergronde en eksperimentele toestande. Byvoorbeeld, as hoë sensitiwiteit vereis word, kan eGFP 'n beter keuse wees. As beeldvorming by langer golflengtes nodig is om agtergrondinterferensie te verminder, kan rooi fluoresserende proteïene soos mCherry meer geskik wees. Daarbenewens, gebaseer op die spesifieke modifikasiebehoeftes van mRNA (bv. die verbetering van stabiliteit, die verbetering van translasiedoeltreffendheid), kan die ooreenstemmende modifikasiemetode gekies word.

As die eerste en grootste mikrobiese biologiese CRDMO in Groter China, bied Yaohai Bio-Pharma end-tot-end eenstop-pasgemaakte oplossings of selfstandige dienste wat wissel van RNA-sintese, stam-ingenieurswese en konstruksie, stroomop en stroomaf prosesontwikkeling, tot GMP of nie -GMP-vlak dwelmstof vervaardiging, en vul en voltooi dienste vir diverse modaliteite, soos mRNA, circRNA, plasmied RNA, rekombinante proteïene, peptiede, ensieme, enkel-domein teenliggaampies en VLP's vir menslike en veeartsenykundige gebruik.

Yaohai Bio-Pharma is ook aktief op soek na institusionele of individuele globale vennote en bied die mees mededingende vergoeding in die bedryf. As jy enige vrae het, voel asseblief vry om ons te kontak: [email protected]