Vandag is Yaohai so opwindend om sy in vitro-transkripsieprotokol vir lang RNA te deel. Dit is 'n doeltreffende strategie wat wetenskaplikes dikwels gebruik om RNA in die laboratorium te produseer. Op hierdie manier kan navorsers 'n aansienlike groot aantal lang RNA produseer - iets wat noodsaaklik is vir die studie in verskillende biologiese velde. Hier verskaf ons 'n stap-vir-stap gids vir die voorbereiding van lang RNA's via in vitro transkripsie. Ons sal ook praat oor hoe ons die proses beter kan maak en probeer om sommige van die probleme wat jy in die gesig staar met die sintetisering van lang RNA aan te spreek.
Verskeie noodsaaklike komponente word benodig vir In vitro transkripsie, veral lang RNA. Jy sal 'n ensiem genaamd RNA-polimerase, skryfmateriaal in die vorm van nukleotiedtrifosfate (NTP's), 'n buffer moet voorsien om die reaksie te help, en 'n DNS-sjabloon. Hoe om dit stap vir stap te doen, jy kan 'n gedetailleerde gids hier vind:
Verskeie faktore is baie belangrik vir die goeie werking van die sintese van RNA. Die belangrikste is dat die hoeveelheid magnesiumione in die buffer self belangrik is. RNA-polimerase benodig 'n aansienlike hoeveelheid magnesium om behoorlike interaksie met die DNA-sjabloon en die daaropvolgende vou van die RNA te ondersteun. 'n Tweede belangrike aspek om te oorweeg is die konsentrasie van DNA-sjabloon. Spesifiek, jy moet genoeg sjabloon DNA-reaksie hê om goeie RNA-opbrengste te kry.
Lang RNA sal natuurlik met sy eie stel probleme kom. Dat hierdie probleme verband hou met die afbreek van die RNA, beïnvloed hoe die RNA vou, en strukture opbou wat moontlik inmeng met die sintetisering van die RNA. Een manier om hierdie uitdagings aan te spreek, is deur die buffer wat jy neem, aan te pas. Vir 'n meer omvattende struktuur van RNA, kan navorsers verskillende spesiale chemikalieë soos DTT en p-merkapto-etanol byvoeg om die RNA te help om reg te vou en te voorkom dat dit aan mekaar vassit, of klont.
Daarbenewens is nie alle lang RNA-tipes dieselfde nie en sommige mag alternatiewe sintesemetodes benodig. Daar is spesiale kenmerke wat navorsers dalk in die RNA moet byvoeg, soos om 'n 5-dop of Poly-A-stert by te voeg. As dit nodig is (soos later verduidelik), moet navorsers ander ensieme soos Guanylyltransferase en Poly(A)Polymerase insluit. 'n Mens moet ook 'n geskikte RNA-polimerase-ensiem kies wat hulle natuurlik in staat stel om meer RNA te produseer. Sodra lang RNA gesintetiseer moet word, sal ons die beste toestand moet identifiseer.
Lang RNA's in vitro-transkripsieDaar is 'n aantal sleutelgebruike vir die lang RNA in vitro-transkripsieprotokol oor verskeie navorsings-, toets- en terapeutiese pogings. Dit help wetenskaplikes om die struktuur van RNA te verstaan, hoe dit funksioneer en hoe hulle gene kan verander met kontemporêre tegnologieë. Meer ander dag - die ontdekking van verskeie siektes en hul terapieë soos baie huidige RNA-terapieë - laat ons glo hoe nuttig hierdie inlees-tegnologie vir medisyne kan wees.
Daar is baie voordele verbonde aan die gebruik van hierdie protokol. 'n Elektroforese-gebaseerde metode is oor die algemeen die mees doeltreffende en koste-effektiewe manier om groot hoeveelhede lang RNA te produseer. Afgesien van die kwaliteit van RNA, is 'n goeie opbrengs ook 'n belangrike faktor vir navorsers om hulle te help met hul navorsing, veral as hulle 'n groot hoeveelhede RNA benodig vir eksperimente as gevolg van hoë insetmateriaal om mee te begin. Daarbenewens is in vitro transkripsie vir lang RNA tipies meer akkuraat en reproduseerbaar as chemiese sintese of sellulêre sintese van RNA.
Yaohai BioPharma is 'n Top 10 Mikrobiese CDMO wat In vitro Transkripsie Protokol vir Lang RNA sowel as regulatoriese aangeleenthede insluit. Ons het 'n kwaliteitbestuurstelsel wat in lyn is met huidige GMP-standaarde sowel as globale regulasies. Ons span regulatoriese kundiges is vaardig in globale regulatoriese raamwerke om biologiese bekendstellings te versnel. Ons verseker naspeurbare produksieprosesse kwaliteit produkte, sowel as voldoening aan die reëls van die Amerikaanse FDA en EU EMA. Australië TGA en China NMPA is ook tevrede. Yaohai BioPharma het die oudit op die terrein van die Europese Unie se Gekwalifiseerde Persoon (QP) suksesvol geslaag vir ons GMP-gehaltestelsel sowel as ons produksiefasiliteit. Verder het ons die eerste sertifiseringsoudits van die ISO9001 Kwaliteitbestuurstelsel, ISO14001 Omgewingsbestuurstelsel en ISO45001 Beroepsgesondheid- en Veiligheidsbestuurstelsel skoongemaak.
Yaohai Bio-Pharma, 'n top 10-produsent van biologiese produkte, is 'n spesialis in mikrobiese fermentasie. Ons het 'n gevorderde fasiliteit gevestig wat toegerus is met moderne fasiliteite en sterk RD-vervaardigingsvermoëns. Ons het vyf medisyne-vervaardigingslyne wat voldoen aan GMP-vereistes vir mikrobiese fermentasie en suiwering, sowel as twee vul-afwerkinglyne wat outomaties is vir patrone, flessies, sowel as voorafgevulde spuite. Die beskikbare fermentasieskale wissel van 100L tot 500L, 1000L en 2000L. In vitro-transkripsieprotokol vir lang RNA vir vias is 1ml tot 25ml, terwyl die voorafgevulde spuite en patroonvulspesifikasies 1-3ml dek. Ons produksiewerkswinkel voldoen aan cGMP en waarborg bestendige voorsiening van kliniese monsters sowel as kommersiële items. Ons aanleg produseer groot molekules wat na die wêreld gestuur word.
Yaohai Bio-Pharma het ondervinding in die vervaardiging van biologiese middels wat uit mikroörganismes geskep word. Ons bied pasgemaakte RD-oplossings sowel as vervaardigingsdienste terwyl potensiële risiko's tot die minimum beperk word. Ons het met uiteenlopende tegnieke gewerk, soos rekombinante sellulêre subeenhede, entstowwe (insluitend peptiede), groeifaktore, hormone en die In vitro-transkripsieprotokol vir lang RNA. Ons is 'n spesialis in baie mikroörganismes soos gis ekstrasellulêre en intrasellulêre afskeiding (lewer tot 15g/L) en intrasellulêre oplosbare bakterieë, en insluitingsliggaam (lewer tot 10g/L). Ons het ook 'n BSL-2-fermentasieplatform ontwikkel om bakteriese entstowwe te skep. Ons het 'n rekord van die verbetering van produksieprosesse, waardeur opbrengste verhoog en koste verlaag word. Ons het 'n hoogs doeltreffende tegnologiespan om tydige en hoë gehalte lewering van projekte te verseker. Dit help ons om jou produkte wat uniek is vinniger na die mark te bring.
Yaohai Bio-Pharma is 'n toonaangewende in vitro-transkripsieprotokol vir lang RNA CDMO. Ons hooffokus was die vervaardiging van mikrobiese inentings en terapeutiese middels om troeteldiere, menslike en veeartsenykundige gesondheid te behandel. Ons beskik oor die nuutste RD- en vervaardigingstegnologie-platforms wat die hele vervaardigingsproses dek van die ingenieurswese van mikrobiese stamme, tot selbankverwerking en metode-ontwerp tot kliniese en kommersiële vervaardiging, om seker te maak dat ons die suksesvolle lewering van die mees gevorderde oplossings kan verseker. . Ons het 'n groot hoeveelheid kennis opgebou in die bioprosesseringsmikrobiese veld. Meer as 200 projekte is suksesvol voltooi en ons help ons kliënte om te voldoen aan regulasies soos dié van die Amerikaanse FDA sowel as EU EMA. Ons help hulle ook om Australië TGA en China NMPA te navigeer. Ons is in staat om vinnig te reageer op markvereistes en bied pasgemaakte CDMO-dienste aan as gevolg van ons ervaring en kundigheid.