Các ARN tròn (circRNA) là một lớp ARN đơn xích, đóng kín bằng cộng hóa trị mà không có đầu 5' hoặc 3'. Đặc điểm độc đáo này có thể ngăn chặn sự phân hủy của circRNA bởi exonuclease và trao cho circRNA độ ổn định cao và hiệu suất dịch tương đối so với mRNA tuyến tính.
circRNA được tổng hợp thông qua quá trình vòng hóa in vitro từ tiền chất RNA tuyến tính. Các tạp chất liên quan đến quy trình hoặc sản phẩm có thể gây ra phản ứng miễn dịch bẩm sinh, đặc biệt là các RNA tuyến tính (tiền chất RNA, RNA bị đứt đoạn, intron bị cắt ra). Việc loại bỏ các tạp chất RNA tuyến tính và thu được năng suất cao của circRNA tinh khiết là rất quan trọng cho nghiên cứu in vitro/vivo và ứng dụng điều trị.
Yaohai Bio-Pharma đã thiết lập một bộ công nghệ tổng hợp circRNA để cung cấp circRNA có độ tinh khiết cao, bao gồm thiết kế và tối ưu hóa chuỗi, phiên mã in vitro (IVT), vòng hóa/cyclization, làm sạch bằng sắc ký lỏng hiệu năng cao chuẩn bị (HPLC) và bao bọc bằng hạt nano lipid (LNP). Tất cả sản phẩm đều được phát hành theo tiêu chuẩn kiểm soát chất lượng (QC) nghiêm ngặt.
Các kết quả đạt được
| Sản phẩm |
CircRNA có độ tinh khiết cao theo yêu cầu |
| Phương pháp Tổng hợp |
Tự cắt của intron nhóm I |
| Nội dung RNA |
100 µg~10 mg (OD260) |
| Chiều dài |
50~8,000 nucleotides |
| Tính tinh khiết |
A260/A280 |
| Xác định và Độ tinh khiết |
Chạy điện泳 trên gel agarose (AGE), Sắc ký lipid hiệu năng cao (HPLC) |
| Bộ đệm |
Nước không chứa RNase (dạng lỏng) |
| Vận chuyển |
Vận chuyển với đá khô; hoặc ở nhiệt độ môi trường |
| Lưu trữ |
Dạng lỏng, ở hoặc dưới -20°C; Bột lyophilized, ở 4°C |
| Ứng dụng |
Phát triển công thức LNP, xét nghiệm dựa trên tế bào, thí nghiệm động vật |
Các Trường Hợp Thực Tế
Chúng tôi đã phát triển quy trình tinh chế có thể mở rộng chủ yếu sử dụng HPLC chuẩn bị, và chuẩn bị circRNA với độ tinh khiết cao (＞95%).
Hình. Tinh chế và Phân tích circRNA với Độ tinh khiết Cao (98%)
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
