Chủ Đạo Các Phương Pháp Chỉnh Sửa RNA Báo Cáo

Khi chọn phương pháp sửa đổi mRNA nào là phù hợp hơn, không có câu trả lời chắc chắn vì mỗi phương pháp và gen báo cáo đều có những ưu điểm và tình huống áp dụng riêng. Dưới đây là một số phương pháp sửa đổi mRNA và gen báo cáo phổ biến, cùng với đặc điểm và tính phù hợp của chúng.

các Phương Pháp Sửa Đổi mRNA

Metyl hóa:

1. m6A : Liên quan đến sự ổn định của mRNA, cắt nối, phiên dịch và xử lý miRNA. Thách thức trong việc phát hiện bao gồm lựa chọn kháng thể và xác định vị trí.
2. nắp 5' Nm : Tăng cường sự ổn định, cắt nối, polyadenylation và xuất khẩu nhân. Giúp phân biệt RNA tự thân với RNA ngoại lai.
3. Pseudouridylation : Thay đổi codon, tăng cường sự ổn định và phản ứng với stress. Được xúc tác bởi pseudouridine synthases.

Giới Thiệu Các Nucléotide Không Thiên Nhiên:

1. Được giới thiệu trong quá trình phiên mã với chiến lược sửa đổi hóa học kép. Nó tăng cường sự ổn định, hiệu quả và biểu hiện protein.

Gen Báo Đạo

1. Gen Protein Phát Sáng Xanh (GFP) : Ưu điểm: Dễ phát hiện, tính chất phát sáng ổn định, không độc hại cho tế bào, phù hợp để chụp ảnh tế bào sống. Nhược điểm: Độ mạnh của ánh sáng có hạn.
2. Protein Phát Sáng Xanh Tăng Cường (eGFP) : Ưu điểm: Sáng hơn gấp 6 lần so với GFP hoang dã, làm cho nó phù hợp hơn như một gen báo đạo để nghiên cứu biểu hiện gen, điều tiết, phân hóa tế bào và định vị cũng như vận chuyển protein trong cơ thể.
3. Protein Phát Sáng Đỏ (chẳng hạn mCherry) : Ưu điểm: Chiều dài sóng kích thích và phát xạ dài hơn, dẫn đến mức nền thấp hơn trong quá trình chụp ảnh bên trong tế bào, độ sáng phát quang tuyệt vời và khả năng chống lại ánh sáng tốt, cùng với độ độc hại thấp hơn đối với tế bào. Nhược điểm: Có thể không được sử dụng phổ biến như GFP trong một số điều kiện thí nghiệm.
4. Luciferase Của Bắt Buồn : Ưu điểm: Trong sự hiện diện của ATP, ion magie và oxy, nó có thể xúc tác quá trình oxi hóa luciferin thành oxyluciferin, phát ra ánh sáng sinh học. Nó phù hợp để sử dụng làm đối chứng để nghiên cứu hiệu suất dịch mã của gen mục tiêu trong tế bào động vật có vú, khả năng sống còn của tế bào và các bài kiểm tra hình ảnh in vivo.

Phần kết luận

Khi chọn phương pháp sửa đổi mRNA nào là phù hợp hơn, điều này phụ thuộc vào mục tiêu thí nghiệm cụ thể, bối cảnh nghiên cứu và điều kiện thí nghiệm. Ví dụ, nếu cần độ nhạy cao, eGFP có thể là lựa chọn tốt hơn. Nếu cần chụp hình ở bước sóng dài hơn để giảm nhiễu nền, protein phát quang màu đỏ như mCherry có thể phù hợp hơn. Ngoài ra, dựa trên nhu cầu sửa đổi cụ thể của mRNA (chẳng hạn như tăng cường độ ổn định, cải thiện hiệu suất dịch mã), phương pháp sửa đổi tương ứng có thể được chọn.

Là công ty CRDMO sinh học vi sinh đầu tiên và lớn nhất tại Đại Trung Hoa, Yaohai Bio-Pharma cung cấp các giải pháp tùy chỉnh toàn diện từ đầu đến cuối hoặc các dịch vụ độc lập, bao gồm tổng hợp RNA, thiết kế và xây dựng chủng, phát triển quy trình thượng nguồn và hạ nguồn, cho đến sản xuất chất dược liệu theo tiêu chuẩn GMP hoặc không GMP, và dịch vụ đóng chai cho nhiều loại hình thức như mRNA, circRNA, plasmid RNA, protein tái tổ hợp, peptit, enzym, kháng thể đơn miền và VLPs dùng cho con người và thú y.

Yaohai Bio-Pharma cũng đang tích cực tìm kiếm đối tác toàn cầu là tổ chức hoặc cá nhân và cung cấp mức bồi thường cạnh tranh nhất trong ngành. Nếu bạn có bất kỳ câu hỏi nào, xin vui lòng liên hệ với chúng tôi: [email protected]