Ủng hộ các phương pháp sửa đổi RNA của phóng viên

Khi lựa chọn phương pháp sửa đổi mRNA của phóng viên nào là thích hợp hơn, không có câu trả lời chắc chắn vì mỗi phương pháp và gen phóng viên đều có những ưu điểm và tình huống áp dụng riêng. Sau đây là một số phương pháp sửa đổi mRNA và gen phóng viên phổ biến, cùng với các đặc điểm và tính phù hợp của chúng.

Phương pháp sửa đổi mRNA

Metyl hóa:

1. m6A: Liên quan đến sự ổn định của mRNA, quá trình ghép nối, dịch mã và xử lý miRNA. Những thách thức phát hiện bao gồm lựa chọn và định vị kháng thể.
2. Nắp 5' Nm: Tăng cường sự ổn định, ghép nối, polyadenylation và xuất khẩu hạt nhân. Giúp phân biệt RNA tự thân với RNA ngoại lai.
3. Giả urê hóa: Thay đổi codon, tăng cường sự ổn định và phản ứng với căng thẳng. Được xúc tác bởi pseudouridine synthase.

Giới thiệu về Nucleotide không tự nhiên:

1. Được giới thiệu trong quá trình phiên mã với chiến lược sửa đổi hóa học kép. Nó tăng cường sự ổn định, hiệu quả và biểu hiện protein.

Gen phóng viên

1. Gen protein huỳnh quang xanh (GFP): Ưu điểm: Dễ phát hiện, tính chất huỳnh quang ổn định, không độc hại với tế bào, thích hợp để chụp ảnh tế bào sống. Nhược điểm: Cường độ huỳnh quang hạn chế.
2. Protein huỳnh quang xanh tăng cường (eGFP):Ưu điểm: Sáng hơn 6 lần so với GFP loại hoang dã, khiến nó phù hợp hơn để làm gen báo cáo trong nghiên cứu biểu hiện gen, điều hòa, biệt hóa tế bào, định vị và vận chuyển protein bên trong cơ thể.
3. Protein huỳnh quang đỏ (ví dụ, mCherry): Ưu điểm: Bước sóng kích thích và phát xạ dài hơn, tạo ra nền thấp hơn trong quá trình chụp ảnh nội bào, độ sáng huỳnh quang và độ ổn định quang tuyệt vời, và độc tính tế bào thấp hơn. Nhược điểm: Có thể không được sử dụng phổ biến như GFP trong một số điều kiện thử nghiệm.
4. Đom Đóm Luciferase: Ưu điểm: Với sự có mặt của ATP, ion magiê và oxy, nó có thể xúc tác quá trình oxy hóa luciferin thành oxyluciferin, phát ra hiện tượng phát quang sinh học. Nó phù hợp để sử dụng làm đối chứng để nghiên cứu hiệu quả dịch mã của gen mục tiêu trong tế bào động vật có vú, khả năng sống của tế bào và xét nghiệm hình ảnh trong cơ thể sống.

Kết luận

Khi lựa chọn phương pháp sửa đổi mRNA của phóng viên nào là thích hợp hơn, điều đó phụ thuộc vào các mục tiêu thử nghiệm cụ thể, bối cảnh nghiên cứu và điều kiện thử nghiệm. Ví dụ, nếu cần độ nhạy cao, eGFP có thể là lựa chọn tốt hơn. Nếu cần chụp ảnh ở bước sóng dài hơn để giảm nhiễu nền, các protein huỳnh quang đỏ như mCherry có thể phù hợp hơn. Ngoài ra, dựa trên nhu cầu sửa đổi cụ thể của mRNA (ví dụ: tăng cường độ ổn định, cải thiện hiệu quả dịch mã), có thể chọn phương pháp sửa đổi tương ứng.

Là CRDMO về sinh học vi sinh đầu tiên và lớn nhất tại Trung Quốc, Yaohai Bio-Pharma cung cấp các giải pháp trọn gói hoặc dịch vụ độc lập từ tổng hợp RNA, kỹ thuật và xây dựng chủng, phát triển quy trình đầu nguồn và cuối nguồn, đến sản xuất dược chất đạt chuẩn GMP hoặc không đạt chuẩn GMP, cũng như dịch vụ chiết rót & hoàn thiện cho nhiều phương thức khác nhau, chẳng hạn như mRNA, circRNA, RNA plasmid, protein tái tổ hợp, peptide, enzyme, kháng thể miền đơn và VLP để sử dụng cho người và thú y.

Yaohai Bio-Pharma cũng đang tích cực tìm kiếm các đối tác toàn cầu là tổ chức hoặc cá nhân và cung cấp mức lương cạnh tranh nhất trong ngành. Nếu bạn có bất kỳ câu hỏi nào, vui lòng liên hệ với chúng tôi: [email protected]