Кільцеві РНК (circRNA) є класом одноланцюгових ковалентно замкнутих РНК без 5' або 3' кінців. Ця унікальна функція може запобігти деградації circRNA екзонуклеазами та надати circRNA високу стабільність і ефективність трансляції порівняно з лінійною мРНК.
circRNA синтезується шляхом циркуляції in vitro з лінійного попередника РНК. Домішки, пов’язані з процесом або продуктом, можуть призвести до вродженої імунної відповіді, особливо лінійні РНК (попередники РНК, розрізана РНК, вирізані інтрони). Дуже важливо видалити домішки лінійної РНК і отримати високий вихід чистої circRNA для досліджень in vitro/vivo та терапевтичних застосувань.
Компанія Yaohai Bio-Pharma розробила набір технологій синтезу circRNA для забезпечення високої чистоти circRNA, що включає дизайн та оптимізацію послідовності, транскрипцію in vitro (IVT), циркуляризацію/циклізацію, препаративну високоефективну рідинну хроматографію (HPLC) для очищення та ліпідні наночастинки ( LNP) інкапсуляція. Вся продукція випускається відповідно до суворих стандартів контролю якості (QC).
Очікувані результати
| Продукт |
Індивідуальна високочиста circRNA |
| Метод синтезу |
Самосплайсинг інтронів I групи |
| Вміст РНК |
100 мкг ~ 10 мг (OD260) |
| довжина |
50~8,000 нуклеотидів |
| Чистота |
A260 / A280 |
| Ідентифікація та чистота |
Електрофорез у агарозному гелі (AGE), високоефективна ліпідна хроматографія (HPLC) |
| Buffer
|
Вода без РНКаз (рідина) |
| Доставка |
Судно з сухим льодом; або при температурі навколишнього середовища |
| зберігання |
Рідина, при -20°C або нижче; Ліофілізований порошок, при 4°C |
| додаток |
Розробка рецептур LNP, клітинні аналізи, експерименти на тваринах |
Приклади з практики
Ми розробили масштабований процес очищення, в основному використовуючи препаративну ВЕРХ, і підготували circRNA з високою чистотою (>95%).
Рис. Очищення та аналіз circRNA з високою чистотою (98%)
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
НЕМАЄ
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
