Bugün Yaohai, uzun RNA için in vitro transkript protokolünü paylaşmaktan büyük heyecan duyuyor. Bilim insanlarının laboratuvarda RNA üretmek için sıklıkla kullandığı etkili bir stratejidir. Bu şekilde araştırmacılar, farklı biyolojik alanlardaki çalışmalar için önemli olan önemli miktarda uzun RNA üretebilirler. Burada, in vitro transkripsiyon yoluyla uzun RNA'ların hazırlanması için adım adım bir kılavuz sunuyoruz. Ayrıca, süreci nasıl daha iyi hale getirebileceğimizden bahsedeceğiz ve uzun RNA sentezlerken karşılaştığınız bazı sorunları ele almaya çalışacağız.
İn vitro transkripsiyon için birkaç temel bileşen, özellikle uzun RNA gereklidir. RNA polimeraz adı verilen bir enzim, nükleotid trifosfatlar (NTP'ler) biçiminde yazma materyali, reaksiyona yardımcı olacak bir tampon ve biraz DNA şablonu sağlamanız gerekecektir. Bunu adım adım nasıl yapacağınızı öğrenmek için ayrıntılı bir kılavuzu burada bulabilirsiniz:
RNA sentezinin iyi çalışması için birkaç faktör çok önemlidir. En önemlisi, tamponun kendisindeki magnezyum iyonlarının miktarı önemlidir. RNA polimerazı, DNA şablonuyla uygun etkileşimi ve ardından RNA'nın katlanmasını desteklemek için önemli miktarda Magnezyum gerektirir. Dikkate alınması gereken ikinci önemli husus, DNA şablonunun konsantrasyonudur. Özellikle, iyi RNA verimleri elde etmek için yeterli şablon DNA reaksiyonuna sahip olmalısınız.
Uzun RNA, elbette, kendi sorunlarıyla birlikte gelecektir. Bu sorunlar RNA'nın parçalanmasıyla ilgili olabilir, RNA'nın nasıl katlandığını etkileyebilir ve RNA'nın sentezlenmesine potansiyel olarak müdahale eden yapılar oluşturabilir. Bu zorlukları ele almanın bir yolu, aldığınız tamponu ayarlamaktır. Daha kapsamlı bir RNA yapısı için araştırmacılar, RNA'nın doğru şekilde katlanmasına yardımcı olmak ve birbirine yapışmasını veya kümelenmesini önlemek için DTT ve p-merkaptoetanol gibi farklı özel kimyasallar ekleyebilirler.
Ek olarak, tüm uzun RNA tipleri birbirine benzemez ve bazıları alternatif sentez yöntemleri gerektirebilir. Araştırmacıların RNA'ya eklemesi gereken özel özellikler vardır, örneğin 5 başlık veya Poly-A kuyruğu eklemek gibi. Eğer bu gerekiyorsa (daha sonra açıklanacağı gibi), araştırmacılar Guanylyltransferase ve Poly(A)Polymerase gibi diğer enzimleri de dahil etmelidir. Ayrıca, doğal olarak daha fazla RNA üretmelerini sağlayan uygun bir RNA polimeraz enzimi seçilmelidir. Uzun RNA sentezlenmek zorunda kalır kalmaz en iyi koşulu belirlememiz gerekecektir.
Uzun RNA'lar in vitro transkriptUzun RNA in vitro transkript protokolünün çeşitli araştırma, deney ve terapötik çabalarda bir dizi önemli kullanımı vardır. Bilim insanlarının RNA'nın yapısını, çalışma şeklini ve genleri çağdaş teknolojilerle nasıl değiştirebileceklerini anlamalarına yardımcı olur. Diğer günlerde -çok güncel RNA terapileri gibi çeşitli hastalıkların ve bunların terapötiklerinin keşfi- bu okuma teknolojisinin tıp için ne kadar yararlı olabileceğine inanmamızı sağlar.
Bu protokolü kullanmanın birçok avantajı vardır. Elektroforez tabanlı bir yöntem genellikle büyük miktarlarda uzun RNA üretmenin en verimli ve uygun maliyetli yoludur. RNA kalitesinin yanı sıra, araştırmacılar için iyi bir verim de araştırmalarında yardımcı olmak için önemli bir faktördür, özellikle de başlangıçta yüksek girdi materyali nedeniyle deneyler için büyük miktarda RNA'ya ihtiyaç duyuyorlarsa. Ek olarak, uzun RNA için in vitro transkripsiyon genellikle kimyasal sentezden veya RNA'nın hücresel sentezinden daha doğru ve tekrarlanabilirdir.
Yaohai BioPharma, Uzun RNA için İn vitro Transkript Protokolü'nü ve düzenleyici işleri bünyesinde barındıran En İyi 10 Mikrobiyal CDMO'dur. Güncel GMP standartlarının yanı sıra küresel düzenlemelerle uyumlu bir kalite yönetim sistemimiz var. Düzenleyici uzmanlardan oluşan ekibimiz, biyolojik lansmanları hızlandırmak için küresel düzenleyici çerçevelerde uzmandır. İzlenebilir üretim süreçleri kaliteli ürünler sağlamanın yanı sıra ABD FDA ve AB EMA kurallarına da uyuyoruz. Avustralya TGA ve Çin NMPA da memnun. Yaohai BioPharma, GMP kalite sistemimiz ve üretim tesisimiz için Avrupa Birliği'nin Nitelikli Kişisi (QP) tarafından yapılan yerinde denetimi başarıyla geçti. Ayrıca, ISO9001 Kalite Yönetim Sistemi, ISO14001 Çevre Yönetim Sistemi ve ISO45001 İş Sağlığı ve Güvenliği Yönetim Sistemi'nin ilk sertifikasyon denetimlerini geçtik.
Biyolojik ürünlerin ilk 10 üreticisinden biri olan Yaohai Bio-Pharma, mikrobiyal fermantasyon konusunda uzmandır. Modern tesisler ve güçlü AR-GE üretim kapasiteleriyle donatılmış gelişmiş bir tesis kurduk. Mikrobiyal fermantasyon ve saflaştırma için GMP gerekliliklerine uygun beş ilaç maddesi üretim hattımız ve kartuşlar, flakonlar ve önceden doldurulmuş şırıngalar için otomatikleştirilmiş iki dolum-bitiş hattımız bulunmaktadır. Mevcut fermantasyon ölçekleri 100L ila 500L, 1000L ve 2000L arasında değişmektedir. Vias için Uzun RNA için In vitro Transkript Protokolü 1ml ila 25ml iken, önceden doldurulmuş şırıngalar ve kartuş dolum özellikleri 1-3ml'yi kapsamaktadır. Üretim atölyemiz cGMP uyumludur ve klinik numunelerin yanı sıra ticari ürünlerin de istikrarlı bir şekilde tedarik edilmesini garanti eder. Tesisimiz dünyaya gönderilen büyük moleküller üretmektedir.
Yaohai Bio-Pharma, mikroorganizmalardan oluşturulan biyolojiklerin üretiminde deneyime sahiptir. Potansiyel riskleri en aza indirirken özel RD çözümleri ve üretim hizmetleri sunuyoruz. Rekombinant hücresel alt birimler, aşılar (peptitler dahil), büyüme faktörleri, hormonlar ve Uzun RNA için İn vitro Transkript Protokolü gibi çeşitli tekniklerle çalıştık. Maya hücre dışı ve hücre içi salgısı (15 g/L'ye kadar verim) ve bakteri hücre içi çözünür ve inklüzyon gövdesi (10 g/L'ye kadar verim) gibi birçok mikroorganizma konusunda uzmanız. Ayrıca, bakteriyel aşılar oluşturmak için bir BSL-2 fermantasyon platformu geliştirdik. Üretim süreçlerini iyileştirme, böylece verimi artırma ve maliyetleri düşürme konusunda bir geçmişe sahibiz. Projelerin zamanında ve yüksek kalitede teslim edilmesini sağlamak için son derece verimli bir teknoloji ekibimiz var. Bu, benzersiz ürünlerinizi pazara daha hızlı getirmemize yardımcı olur.
Yaohai Bio-Pharma, Uzun RNA CDMO için In vitro Transkript Protokolünde liderdir. Ana odak noktamız, evcil hayvanları, insan ve veteriner sağlığını tedavi etmek için mikrobiyal aşılar ve terapötikler üretmek olmuştur. Mikrobiyal suşların mühendisliğinden hücre bankacılığı işleme ve yöntem tasarımına, klinik ve ticari üretime kadar tüm üretim sürecini kapsayan son teknoloji AR-GE ve üretim teknolojisi platformlarına sahibiz ve en gelişmiş çözümlerin başarılı bir şekilde teslim edilmesini sağlayabiliyoruz. Biyoişleme mikrobiyal alanında çok miktarda bilgi biriktirdik. 200'den fazla proje başarıyla tamamlandı ve müşterilerimizin ABD FDA ve AB EMA gibi düzenlemelere uymalarına yardımcı oluyoruz. Ayrıca Avustralya TGA ve Çin NMPA'da gezinmelerine yardımcı oluyoruz. Deneyimimiz ve uzmanlığımız sayesinde pazar gereksinimlerine hızla yanıt verebiliyor ve özelleştirilmiş CDMO hizmetleri sunabiliyoruz.