Objavenie optimálnej dávky eGFP reportérnej RNA
V molekulárnej biológií a biotechnológii sa uskutočnila zvýšená zelená fluorescenčná bielec (eGFP) ako klúčový reportérny gen kvôli svojej schopnosti vyrábati jasnú zelenú fluorescenciu na 509 nm. Táto bielec, pôvodne izolovaná z medúzy Aequorea victoria, je markerom priamoj detekcie v kultúrach mäsiacích buniek, čo umožňuje monitorovanie a optimalizáciu účinnosti transfekcie. Vzniká otázka: aká je optimálna dávka RNA reportérskeho genu eGFP potrebná na dosiahnutie požadovaných úrovni exprésie?
Výskum ukázal, že účinnosť eGFP reportérneho RNA značne závisí od jeho dávky, predovšetkým v kontexte cirkulárneho RNA (circRNA) a samozvyšujúceho sa mRNA (saRNA) systémov. Štúdie vypracované tímom Katrien Remaut na Univerzite v Ghentu v skupine pre výskum nanomedicíny zdôraznili zložitý vzťah medzi dávkou saRNA a jej efektívnosťou prekladu v retinálnych bunkách. Objavili, že nízke dávky saRNA, pod práhovou hodnotou pre aktívnu innate imunitu, umožňujú efektívne výrobu bél. To potvrdzuje dôležitosť presnej kontroly dávky pri využívaní plného potenciálu eGFP reportérneho RNA.
V praktických aplikáciách môžu bežne používané koncentrácie mRNA eGFP sa pohybovať od mikrogramov (μg) po nanogramy na mikroliter (ng/μL). Napríklad, v experimentoch s transfekciou boli dávky od 0,05 μg po 0,5 μg mRNA eGFP ukázané ako produkujú významné úrovne expresie v rôznych typoch buniek, pričom percento pozitívnych buniek môže dosiahnuť až 99-100% v niektorých prípadoch. Zvlášť v dávkach pod 0,1 μg demonstruje saRNA lepšie úrovne expresie v porovnaní s lineárnym mRNA, čo preukazuje svoju samoopakujúcu výhodu.
Univerzalita RNA reportéra eGFP spočíva nie len v jej jasnej a stabilnej fluorescencii, ale aj v prispôsobiteľnosti rôznym experimentálnym nastaveniam. Vyskumcovia môžu precízne prispôsobiť dávku podľa svojich špecifických potrieb, čím zabezpečia presnú kontrolu nad úrovňami génovej expresie. Táto vlastnosť robí z eGFP neoceniteľný nástroj na študium funkcie génu, sledovanie osudu bunky a optimalizáciu protokолов transfekcie.
V závere, optimálna dávka eGFP reportérneho RNA je veľmi závislá na experimentálnom kontexte a požadovaných výsledkoch. Dôkladným vybratím vhodnej dávky môžu výskumníci využiť celú potenciu tohto univerzálneho reportérneho genu, čo nám pomáha lepšie pochopiť molekulárne mechanizmy a podporovať inovácie v biotechnológii.
Yaohai Bio-Pharma je prvá a najväčšia spoločnosť CRDMO zameraná na mikrobiálny výrazový systém biologickej liečivovej výroby v Veľkom Číne. Zaoberáme sa splnením klinických a komerčných požiadaviek našich globálnych zákazníkov na biologické lieky, vakcíny a diagnostiku pre ľudskú a veterinársku úpravu.
Hľadáme tiež aktívne globálnych partnerov, či už institucionálnych alebo jednotlivcov. Ponúkame najkonkurenceschopnejšie odškodnenie v odvetví. Ak máte akékoľvek otázky, neváhejte nás kontaktovať: [email protected]
Horúce novinky
-
Yaohai Bio-Pharma prešla europskou kontrolou kvalifikované osoby (QP) a získala trojnásobnú certifikáciu ISO
2024-05-08
-
BiotechGate, Online
2024-05-13
-
sVETOVÝ KONGRES VAKÍN 2024 Washington
2024-04-01
-
CPHI North America 2024
2024-05-07
-
BIO International Convention 2024
2024-06-03
-
FCE COSMETIQUE
2024-06-04
-
CPHI Miláno 2024
2024-10-08