Kruhové RNA (circRNA) sú triedou jednovláknových, kovalentne uzavretých RNA bez 5' alebo 3' koncov. Táto jedinečná vlastnosť môže zabrániť degradácii circRNA exonukleázami a posilniť circRNA s vysokou stabilitou a účinnosťou translácie v porovnaní s lineárnou mRNA.
circRNA sa syntetizuje in vitro cirkuláciou z lineárneho prekurzora RNA. Nečistoty súvisiace s procesom alebo produktom môžu viesť k vrodenej imunitnej odpovedi, najmä lineárne RNA (prekurzory RNA, RNA, vyrezané intróny). Je dôležité odstrániť nečistoty lineárnej RNA a získať vysoké výťažky čistej circRNA pre výskum in vitro/vivo a terapeutické aplikácie.
Spoločnosť Yaohai Bio-Pharma vytvorila súbor technológií syntézy circRNA na poskytovanie vysoko čistej circRNA, vrátane sekvenčného návrhu a optimalizácie, in vitro transkripcie (IVT), cirkularizácie/cyklizácie, purifikačnej preparatívnej vysokoúčinnej kvapalinovej chromatografie (HPLC) a lipidových nanočastíc ( LNP) zapuzdrenie. Všetky produkty podliehajú prísnym normám kontroly kvality (QC).
dodávky
Produkt | Prispôsobená vysoko čistá circRNA |
Metóda syntézy | Samospájanie intrónu skupiny I |
Obsah RNA | 100 ug~10 mg (OD260) |
Dĺžka | 50 až 8,000 XNUMX nukleotidov |
Čistota | A260 / A280 |
Identifikácia a čistota | Elektroforéza na agarózovom géli (AGE), vysokoúčinná lipidová chromatografia (HPLC) |
Bufferu | Voda bez RNázy (kvapalina) |
Doprava | Loď so suchým ľadom; alebo pri teplote okolia |
Uskladnenie | Kvapalina, pri alebo pod -20 °C; Lyofilizovaný prášok pri 4 °C |
Využitie | Vývoj formulácie LNP, bunkové testy, experiment na zvieratách |
Prípadové štúdie
Vyvinuli sme škálovateľný purifikačný proces hlavne pomocou preparatívnej HPLC a pripravili sme circRNA s vysokou čistotou (>95%).
Obr. Purifikácia a analýza circRNA s vysokou čistotou (98 %)