Dalam proses penyediaan mRNA IVT (transkripsi in vitro), DNA plasmid yang telah dilinierkan diperlukan sebagai templat transkripsi IVT dengan bantuan polimerase RNA T7. DNA plasmid berkualitas tinggi adalah faktor utama untuk transkripsi in vitro.
Berdasarkan platform perkhidmatan penyediaan plasmid yang matang, Yaohai Bio-Pharma boleh menawarkan perkhidmatan penyediaan DNA plasmid dilinierkan dengan kepekatan dan piawaian tinggi untuk mencapai transkripsi IVT yang cekap.
Butiran Perkhidmatan
| Proses |
Perkhidmatan Pilihan |
Butiran Perkhidmatan |
Tempoh Penghantaran (hari kerja) |
| Penyediaan Plasmid Bulat |
Sintesis gen |
Pembentukan Gen (Pihak Ketiga) |
7-10 |
| Peningkatan Plasmid |
Peningkatan Plasmid |
2 |
| Penstrakan Plasmid |
| Persediaan Plasmid Linear |
Linearisasi plasmid dan pemurnian |
Linearisasi plasmid |
1 |
| Pemurnian DNA Linear |
| Kawalan kualiti DNA plasmid |
Ketumpatan kepurelan |
Spektrofotometri Ultraviolet (UV) |
1-2 |
| Konformasi Plasmid |
Elektroforesis Gel Agarosa (AGE) |
| Elektroforesis Kapiler (CE)-Pilihan |
| Kenalpasti Plasmid |
Pengecaman enzim pembatasan / UMB |
Ciri-ciri Kami
Pemilihan fleksibel kaedah linearisasi
Penyempurnaan kaedah pengecaman dan penyucian DNA untuk mencapai kadar pemulihan yang tinggi.
Piawaian kawalan proses yang ketat, dengan kadar konformasi superhelikal sampel plasmid untuk penyelidikan lebih daripada 80%.
Perkhidmatan persiapan dan kawalan kualiti plasmid piawai tinggi dan cekap untuk memenuhi keperluan eksperimen.
Kajian Kes
Mengambil produk mRNA_luciferase Yaohai Bio-Pharma sebagai contoh, sampel templat plasmid transkripsi (gred penyelidikan) mempunyai nisbah superhelikal lebih daripada 90%, nisbah linearisasi hampir 100%, dan nisbah transkripsi seterusnya sehingga 1:200 (DNA plasmid dilinierkan:mRNA).
MRNA_luciferase yang diperoleh melalui penyiapan plasmid linear sebagai templat ditransfeksi ke dalam sel 293T, dan aktiviti tindak balas enzim-substrat dinilai 24 jam selepas transfeksi.
Isyarat aktiviti luciferase yang kuat dapat dikesan, iaitu protein luciferase diekspresikan dengan cekap, menunjukkan bahawa kepekatannya templat transkripsi boleh sepenuhnya memuaskan keperluan penyediaan mRNA kualiti tinggi.
Ujian Nisbah Plasmid Supercoil
Penilaian Ekspresi mRNA Luciferase In Vitro
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
