Asas pembungkusan adalah rekabentuk dan pembangunan sistem penghantaran. Sistem penghantaran yang direka dengan baik membolehkan molekul circRNA memasuki badan tanpa terurai oleh enzim RNA dan kemudian dihantar secara berkesan ke tapak sasaran, menyeberangi membran sel, dan dilepaskan dalam sel.
Ketika nano (LNPs) merupakan sistem penghantaran terbaik yang tersedia, dengan kelebihan dalam pembungkusan, ungkapan dalam badan, dan keselamatan dalam badan berbanding sistem penghantaran lain. LNPs dengan pecahan asid nukleik mudah ditelan masuk ke dalam sel dan membentuk badan intrasel. Setelah memasuki sel, persekitaran asid badan intrasel memprotonakan dan memberi cas positif kepada kepala lipid ionized, dengan itu menyatukan dengan membran dalaman badan intrasel dan melepaskan asid nukleik sasaran ke dalam sel untuk bertindak.
Perkhidmatan circRNA Yaohai Bio-Pharma terus meningkat dan boleh memberi perkhidmatan penyampulan circRNA-LNP untuk mengoptimumkan parameter proses kritikal berkaitan serta meningkatkan kestabilan dan kebolehpulihbalikan pengeluaran ubat circRNA.
Proses | Butiran Perkhidmatan | Tempoh Penghantaran (hari) | Hasil Kerja |
pengekapan circRNA-LNP | Pra-pengolahan Bahan dan Cecair | 2 | produk ubat circRNA-LNP (DP) |
Campuran Peranti Mikrofluidik | |||
Penapisan aliran tangensial | 1 | ||
Penapisan pembersihan | |||
kawalan kualiti circRNA-LNP | Ketepatan Pensampulan | 1 | Laporan ujian |
Saiz zarah dan indeks polidispersiti | |||
Keupayaan Zeta |
Sintesis pantas, kecekapan R&D tinggi dan penyelesaian pra- optimum;
Nisbah pensampulan boleh mencapai lebih daripada 90%;
Saiz nano zarah lemak boleh dikawal dengan mengubah kadar dan nisbah penyuntikan cecair;
produk circRNA-LNP telah disahkan melalui pengungkapan sel in vitro dan boleh mengungkapkan protein sasaran dengan cekap.
Contoh LNP-eGFP circRNA disediakan dan dos yang berbeza daripadanya (1ug, 2ug, dan 4ug) ditransfeksikan secara langsung ke dalam sel 293T untuk memastikan sama ada ia boleh mengungkapkan protein sasaran. Selepas 48 jam transfeksan, isyarat fluoresen jelas dapat diperhatikan, dan terdapat kesan eskalasi dos bagi intensiti fluoresen.
Lipo-circ_eGFP, yang terdiri daripada liposom dan circRNA eGFP yang tidak dibungkus diambil sebagai kawalan.