Semua Kategori
ENEN
reka Bentuk Urutan circRNA

reka Bentuk Urutan circRNA

Laman Utama >  IVT RNA  >  Sintesis RNA Suai  >  Sintesis circRNA Kustom  >  reka Bentuk Urutan circRNA

IVT RNA

reka Bentuk Urutan circRNA

Yaohai Bio-Pharma menyediakan circRNA berdasarkan sistem PIE (penjajaran ekson dan intron), yang bergantung kepada fungsi self-splicing intron jenis I untuk mencapai siklikan RNA. Struktur PIE direka menggunakan gen T4 td atau gen prekursor tRNA ikan, dan susunan adalah seperti berikut:

Intron RNA dan fragmen ekson sokongan dibahagikan kepada dua bahagian (hujung 5' dan hujung 3'), di mana urutan hujung 5' dipindahkan ke hujung belakang urutan sasaran, urutan hujung 3' disisipkan ke hadapan urutan sasaran, dan urutan gen sasaran disisipkan di tengah.

undefined

Di bawah katalisis GTP, struktur PIE membawa kepada siklikan urutan selain intron. Bergabung dengan strategi peningkatan kadar siklikan yang munasabah, Yaohai Bio-Pharma boleh mencapai siklikan urutan sehingga 4 kb dengan kadar siklikan lebih daripada 80%.

undefined

Rajah 1. Sirkulasi in vitro bagi circRNA berdasarkan pada sistem PIE

Butiran Perkhidmatan
Proses Perkhidmatan Pilihan Butiran Perkhidmatan Tempoh Penghantaran (hari kerja)
reka bentuk dan optimasi urutan circRNA Reka bentuk dan optimumkan urutan kod

Penjajaran urutan CDS

Pengoptimuman Kodon CDS

1
Reka bentuk dan optimasi urutan tak bertindak

Reka bentuk dan optimasi urutan intron dan ekson

Reka bentuk dan optimasi urutan lengan homolog

Reka bentuk dan optimasi urutan spacer

1-2
Strategi Lazim untuk Reka Bentuk Urutan mRNA
Komponen CircRNA Fungsi Biologi Strategi pengoptimuman
Urutan intron dan ekson dua hujung Pemautan diri intron yang dikedalikan GTP untuk pengikaran urutan di luar intron. Direka mengikut gen T4 td atau gen precursor tRNA minyak ikan.
Pengekodan IRES Tapak pengenalan ribosom dalaman yang mengawal terjemahan circRNA. Penapisan siri kawasan masuk ribosom dalaman (IRES) daripada sumber virus yang berbeza, contohnya EMCV, CVB3.
CDS Kawasan penyusunan protein, siri penyusun antigen, antibodi atau protein fungsional lain. Pembaikan kodon meningkatkan tahap translasi; beberapa kodon bukan optimum mungkin memainkan peranan dalam pelipatan protein.
Tidak dikodkan Siri tidak dikodkan Menargetkan miRNA atau protein untuk melaksanakan pengaturan gen atau protein. Menargetkan tapak ikatan spesifik untuk miRNA atau protein boleh mengulangi siri tapak ikatan tersebut.
Ciri-ciri Kami
  • Sistem Pengikatan PIE Dilebihbaiki dengan strategi pengoptimuman yang logik untuk mencapai kadar pengikatan lebih daripada 80%;
  • Kerjasama Pasukan Pengoptimuman CDS Terkini dengan pasukan algoritma AI profesional untuk menyelesaikan pembaikan kodon kawasan CDS;
  • Proses circRNA yang Dewasa dan Sempurna boleh dicapai dengan kecekapan siklikan yang tinggi, kestabilan yang tinggi dan kecekapan terjemahan yang tinggi.
Kajian Kes

Yaohai Bio-Pharma melancarkan produk kawalan protein fluoresen hijau diperkuat (eGFP) circRNA, yang berdasarkan pada sistem PIE untuk mencapai siklikan RNA.

Dengan menggunakan bahan transfeksi konvensional, eGFP circRNA ditransfek ke dalam sel 293T, dan isyarat fluoresen eGFP (hijau) boleh dikesan selepas 24 jam, yang akan diperkuat selepas 48 jam. Isyarat fluoresen masih boleh dikesan pada hari ketujuh dan hari keempat belas selepas transfeksi.

图片

Penilaian ungkapan in vitro bagi eGFP circRNA

Dapatkan Penawaran Percuma

Get in touch