Ujian Keupayaan Berasaskan Sel
Kepentingan Ujian Keupayaan mRNA
Dengan pembangunan pantas vaksin mRNA dan terapi, satu panel kaedah analisis tertentu diperlukan untuk menguji keupayaan (menakrifkan aktiviti biologi mereka), yang melibatkan kecekapan penterjemahan mRNA. Kaedah-kaedah ini biasanya berasaskan transfeksi sel dan ujian fungsi protein sasaran.
Yaohai Bio-Pharma menawarkan ujian keupayaan berasaskan sel untuk bahan ubat mRNA atau produk LNP, termasuk transfeksi sel (293T, HepG2, HeLa, K562, U937, Raw264.7 sel, dll.) dan ujian ELISA atau Western Blotting (WB).
Kebutuhan Peraturan untuk Ujian Keupayaan
Berdasarkan pertimbangan pengawasan WHO, "Kekuatan setiap lot vaksin akhir harus ditentukan menggunakan kaedah fungsional yang kuantitatif dan divalidasi dengan sesuai. Ujian kekuatan in vitro mungkin termasuk sistem transaksi berdasarkan sel atau ujian tanpa sel." Dan USP mencadangkan 'ujian berdasarkan sel' untuk menguji kekuatan mRNA, iaitu, ungkapan protein sasaran.
Kaedah Analisis
|
Analisis
|
Kaedah
|
|
Ujian Kekuatan
|
Transaksi berdasarkan sel dan pengenalan protein sasaran:
sel 293T, HepG2, HeLa, K562, U937, Raw264.7, dll.
|
Prosedur
Langkah 1. Transaksi Berdasarkan Sel dengan mRNA atau mRNA-LNP
Sel dipelihara dan diberi transaksi dengan mRNA atau mRNA-LNP. Dalam perincian, mRNA diberi transaksi selepas dicampurkan dengan bahan penyelia transaksi, manakala mRNA-LNP diberi transaksi secara langsung ke dalam sel. Selepas 24-48 jam, hirisan supernatant yang mengandungi protein yang diungkapkan dengan sentrifugasi.
Langkah 2. Ujian Fungsional Protein Sasaran
Laksanakan ujian ELISA atau WB untuk menilai ikatan berfungsi bagi protein sasaran.
Kajian Kes
Ujian Keupayaan Berasaskan Sel bagi Sampel mRNA
Yaohai-BioPharma telah membangunkan kaedah ujian keupayaan berasaskan sel untuk mRNA, melibatkan budaya sel, transfeksi sel dan ujian fungsi protein. Kami mentransfeksi eGFP mRNA, mCherry mRNA, luciferase mRNA, spike protein mRNA ke dalam sel 293T, dan mengesan protein sasaran melalui isyarat fluoresen, cahaya atau warna, WB, ELISA.
Ujian Keupayaan Berasaskan Sel bagi Produk mRNA oleh Yaohai Bio-Pharma
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
