Производство на рекомбинантен протеин: Инженерски соеви на E. coli

Ешерихија коли (E. coli) одигра значајна улога во производството на рекомбинантни протеини во биофармацевтската индустрија, служејќи како прв експресивен вектор за производство на биолошка медицина. E. coli може да се пофали со брз раст, удобна генетска манипулација и брза синтеза на рекомбинантни протеини, меѓу другите предности. Големите модификации го направија E. coli оптимален избор за изразување на протеини, што доведе до дизајнирање на различни инженерски видови на E. coli.

Јаохаи Био-Фарма е специјализирана за обезбедување на едношалтерски аутсорсинг услуги за ферментација, прочистување, развој на процесот на формулација и производство на серија биофармацевтски препарати користејќи системи за изразување на E. coli. Во врска со големото искуство на Јаохаи, резимиравме дека четири вообичаени соеви на E. coli се користат за производство на рекомбинантен протеин и нивните карактеристики.

BL 21 вирус

Добиено од лозата на E. coli B, на сојот BL21 му недостасува Lon протеаза и протеаза на надворешната мембрана OmpT. Лон протеазата примарно ги разградува егзогените протеини, додека OmpT главно ги разградува протеините од екстрацелуларната матрикс. Отсуството на овие две клучни протеази може ефикасно да ја спречи деградацијата на рекомбинантните протеини.

Вид на оригами

Видот на оригами, дериват на E. coli K-12, има мутации во тиоредоксин редуктаза и глутатион редуктаза, кои го олеснуваат формирањето на правилно преклопени протеини кои содржат дисулфидни врски и ја подобруваат растворливоста на протеините. Видот Оригами, вклучувајќи ги Оригами, Оригами 2 и Оригами Б, се погодни за изразување на активни протеини кои содржат дисулфидни врски.

SHIFLE вирус

SHuffle вирус конститутивно ја изразува дисулфидната врска изомераза DsbC во цитоплазмата, промовирајќи го формирањето на правилни дисулфидни врски во оксидираните протеини. Исто така, служи како молекуларен придружник за преклопување на протеините, помагајќи во формирањето на правилната конформација.

Вирус розета

Видот Rosetta го надополнува E. coli со tRNA кои одговараат на ретки кодони, со цел да се подобри нивото на изразување на егзогените гени, особено еукариотските гени, во прокариотските системи. Добиен од BL21 и носител на плазмидот pRARE отпорен на хлорамфеникол, тој дополнува шест tRNA кои одговараат на ретките кодони (AUA, AGG, AGA, CUA, CCC и GGA) првично отсутни во E. coli, обезбедувајќи повеќе „универзална“ протеинска експресија.

Заклучок

Трите главни фактори за успешно производство на рекомбинантни протеини се условите на домаќинот, векторот и културата. Врз основа на разбирањето на физичко-хемиските својства на рекомбинантниот протеин, уникатните предности на секој сој и специфичните потреби на експериментот, треба да се избере најсоодветен домаќин. Дополнително, факторите како што се плазмидните вектори, температурата и индукторите треба да се оптимизираат за да се подобри протеинската експресија.

Јаохаи Био-Фарма исто така активно бара институционални или индивидуални глобални партнери и нуди најконкурентна компензација во индустријата. Ако имате какви било прашања, ве молиме слободно контактирајте не: [email protected]