Денес Јаохаи е толку возбудливо да го сподели својот протокол за транскрипт ин витро за долга РНК. Тоа е ефикасна стратегија што научниците често ја користат за производство на РНК во лабораторија. На овој начин истражувачите можат да произведат значително голем број долга РНК - нешто од суштинско значење за студијата во различни биолошки полиња. Овде нудиме чекор-по-чекор водич за подготовка на долги РНК преку ин витро транскрипција. Исто така, ќе зборуваме за тоа како би можеле да го подобриме процесот и да се обидеме да одговориме на некои од проблемите со кои се соочувате при синтезата на долга РНК.
Неколку есенцијални компоненти се потребни за ин витро транскрипција, особено долга РНК. Ќе треба да обезбедите ензим наречен РНК полимераза, материјал за пишување во форма на нуклеотидни трифосфати (NTPs), пуфер за да помогне во реакцијата и некој образец на ДНК. Како да го направите тоа чекор по чекор, можете да најдете детален водич овде:
Неколку фактори се многу важни за добро функционирање на синтезата на РНК. Најзначајно, важно е количеството на јони на магнезиум во самиот пуфер. РНК полимеразата бара значителна количина на магнезиум за да се поддржи правилната интеракција со шаблонот на ДНК и последователното превиткување на РНК. Втор важен аспект што треба да се земе предвид е концентрацијата на шаблонот на ДНК. Поточно, мора да имате доволно шаблонска реакција на ДНК за да добиете добри приноси на РНК.
Долгата РНК, се разбира, ќе дојде со свој сет на прашања. Дека овие проблеми може да се однесуваат на распаѓањето на РНК, влијае на тоа како РНК се преклопува и се градат структури кои потенцијално се мешаат во синтетизирањето на РНК. Еден начин да се одговори на овие предизвици е со дотерување на баферот што го земате. За посеопфатна структура на РНК, истражувачите можат да додадат различни специјални хемикалии како што се ДТТ и п-меркаптоетанол за да и помогнат на РНК правилно да се преклопи и да спречи нејзино лепење или згрутчување.
Дополнително, не сите долги типови на РНК се исти, а некои може да бараат алтернативни методи на синтеза. Постојат посебни карактеристики што истражувачите можеби ќе треба да ги додадат во РНК, како што е додавање капа од 5 или опашка Поли-А. Ако тоа е потребно (како што е објаснето подоцна), тогаш истражувачите треба да вклучат и други ензими како што се гуанилилтрансфераза и поли(А)полимераза. Исто така, треба да се избере соодветен ензим на РНК полимераза кој природно им овозможува да произведат повеќе РНК. Штом долго РНК треба да се синтетизира, ќе треба да ја идентификуваме најдобрата состојба.
Долги РНК ин витро транскрипти Постојат голем број клучни намени за долгиот протокол за транскрипт ин витро РНК во неколку истражувања, анализи и терапевтски напори. Тоа им помага на научниците да ја разберат структурата на РНК, начинот на кој таа функционира и како можат да ги модифицираат гените со современи технологии. Уште пред некој ден - откривањето на разни болести и нивните терапевтски средства како многу актуелни терапии со РНК - да веруваме колку ова читање во технологијата може да биде корисно за медицината.
Има многу предности за користење на овој протокол. Методот базиран на електрофореза е генерално најефективниот и најисплатлив начин за производство на големи количини долга РНК. Настрана од квалитетот на РНК, добриот принос е исто така важен фактор за истражувачите да им помогнат во нивното истражување, особено ако им требаат големи количини на РНК за експерименти поради високиот влезен материјал за почеток. Дополнително, ин витро транскрипцијата за долга РНК е типично попрецизна и повторлива од хемиската синтеза или клеточната синтеза на РНК.
Yaohai BioPharma е Топ 10 микробиолошки CDMO кој вклучува ин витро транскриптен протокол за долга РНК, како и регулаторни работи. Имаме систем за управување со квалитет кој е во согласност со тековните GMP стандарди, како и со глобалните регулативи. Нашиот тим од регулаторни експерти е умешен во глобалните регулаторни рамки за да се забрзаат биолошкото лансирање. Ние обезбедуваме следливи производствени процеси со квалитетни производи, како и усогласеност со правилата на американската ФДА и ЕУ ЕМА. Задоволни се и Австралија TGA и China NMPA. Yaohai BioPharma успешно ја помина ревизијата на лице место на квалификувано лице (QP) на Европската унија за нашиот систем за квалитет на GMP, како и за нашиот производствен капацитет. Понатаму, ги расчистивме првите ревизии за сертификација на системот за управување со квалитет ISO9001, системот за управување со животната средина ISO14001 и системот за управување со здравјето и безбедноста при работа ISO45001.
Јаохаи Био-Фарма, топ 10 производител на биолошки производи, е специјалист за микробна ферментација. Воспоставивме напреден објект кој е опремен со современи капацитети и силни капацитети за производство на РД. Имаме пет линии за производство на лекови кои се во согласност со барањата на GMP за микробна ферментација и прочистување, како и две линии за завршна обработка кои се автоматизирани за касети, вијали, како и претходно наполнети шприцеви. Достапните скали за ферментација варираат од 100L до 500L, 1000L и 2000L. Протоколот за транскрипт ин витро за долга РНК за виа се од 1 ml до 25 ml, додека спецификациите за наполнети шприцови и полнење кертриџ опфаќаат 1-3 ml. Нашата производствена работилница е усогласена со cGMP и гарантира стабилно снабдување со клинички примероци, како и комерцијални предмети. Нашата фабрика произведува големи молекули кои се испраќаат до земјината топка.
Јаохаи Био-Фарма има искуство во производство на биолошки препарати кои се создаваат од микроорганизми. Ние нудиме нарачани решенија за RD, како и производствени услуги додека ги минимизираме потенцијалните ризици. Работевме со различни техники, како што се рекомбинантни клеточни подединици, вакцини (вклучувајќи пептиди), фактори на раст, хормони и Ин витро транскрипт протокол за долга РНК. Ние сме специјалисти за многу микроорганизми како што се екстрацелуларната и интрацелуларната секреција на квасец (приноси до 15 g/L) и бактериите интрацелуларно растворливи и инклузивно тело (приносите до 10 g/L). Развивме и платформа за ферментација BSL-2 за да создадеме бактериски вакцини. Имаме досие за подобрување на производните процеси, а со тоа ги зголемуваме приносите и ги намалуваме трошоците. Имаме високо ефикасен технолошки тим за да обезбедиме навремена и квалитетна испорака на проекти. Ова ни помага да ги донесеме вашите производи кои се уникатни побрзо на пазарот.
Yaohai Bio-Pharma е водечки во In vitro транскриптниот протокол за долга RNA CDMO. Нашиот главен фокус беше производството на микробиолошки вакцини и терапевтски средства за лекување на домашни миленици, здравјето на луѓето и ветеринарното. Поседуваме врвни платформи за RD и производствена технологија кои го покриваат целиот производствен процес од инженерство на микробиолошки соеви, до обработка на клеточно банкарство и дизајн на методи до клиничко и комерцијално производство, осигурувајќи се дека можеме да обезбедиме успешна испорака на најнапредните решенија . Имаме акумулирано огромно количество знаење во полето на микробиолошката обработка на био. Повеќе од 200 проекти се успешно завршени и им помагаме на нашите клиенти да се усогласат со прописите како оние на FDA на САД, како и на ЕУ EMA. Ние, исто така, им помагаме да се движат во Австралија TGA и China NMPA. Ние сме во состојба брзо да одговориме на барањата на пазарот и да понудиме приспособени CDMO услуги поради нашето искуство и експертиза.