Persiapan CircRNA memerlukan RNA linear sebagai bahan prekursor (prekursor RNA) untuk siklisasi, di mana prekursor RNA biasanya dipersiapkan menggunakan plasmid DNA yang telah dilinierkan sebagai template transkripsi dan ditranskripsikan secara in vitro dengan bantuan polimerase RNA T7.
Plasmid DNA berkualitas tinggi sangat penting untuk transkripsi in vitro (IVT). Berdasarkan platform layanan persiapan plasmid yang matang, Yaohai Bio-Pharma dapat menyediakan layanan persiapan plasmid DNA (pDNA) dengan kepuretan tinggi dan standar untuk memastikan integritas produk IVT.
Detail Layanan
| Proses |
Layanan Opsional |
Detail Layanan |
Periode Pengiriman (hari kerja) |
| Persiapan Plasmid Lingkaran |
Sintesis gen |
Sintesis Gen (Pihak Ketiga) |
7-10 |
| Amplifikasi Plasmid |
Amplifikasi Plasmid |
2 |
| Ekstraksi Plasmid |
| Persiapan Plasmid Linear |
Linearisasi dan purifikasi plasmid |
Linearisasi plasmid |
1 |
| Purifikasi DNA Linear |
| Kontrol kualitas DNA plasmid |
Konsentrasi keaslian |
Spektrofotometri Ultraviolet (UV) |
1-2 |
| Konformasi Plasmid |
Elektroforesis Gel Agarosa (AGE) |
| Elektroforesis Kapiler (CE)-Opsional |
| Identifikasi Plasmid |
Identifikasi enzim pembatas/ AGE |
Fitur Kami
Pemilihan fleksibel metode linearisasi
Optimisasi metode ekstraksi dan pemurnian DNA untuk mencapai tingkat pemulihan yang tinggi.
- Kontrol Kualitas yang ketat
Standar kontrol proses yang ketat, dengan tingkat konformasi superhelikal sampel plasmid untuk penelitian lebih dari 80%.
Layanan persiapan dan pengendalian kualitas plasmid dengan standar tinggi dan efisiensi tinggi untuk memenuhi kebutuhan eksperimen.
Studi Kasus
Mengambil produk Yaohai Bio-Pharma mCherry circRNA sebagai contoh, rasio superkoil sampel plasmid template transkripsi (kualitas penelitian) lebih dari 70%, dengan tingkat linearisasi hampir 100%.
mCherry circRNA dipersiapkan dengan plasmid yang telah dilinierkan sebagai template dan ditransfeksi ke dalam sel 293T. Tingkat ekspresi fluoresen (fluoresensi merah) terdeteksi setelah 24 jam transfeksi, akan ditingkatkan setelah 48 jam, dan masih dapat terdeteksi pada hari ke-7 dan hari ke-14 setelah transfeksi.
protein mCherry diekspresikan secara stabil dan efisien, dan kemurnian template transkripsi dapat memenuhi persyaratan produk obat circRNA (DP) dengan kualitas tinggi.
Validasi ekspresi in vitro dari mCherry circRNA
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
