Dasar dari proses encapsulasi adalah desain dan pengembangan sistem pengiriman. Sistem pengiriman yang dirancang dengan baik memungkinkan molekul circRNA masuk ke dalam tubuh tanpa terdegradasi oleh enzim RNA dan kemudian secara efektif dikirim ke situs target, menyeberangi membran sel, dan dilepaskan di dalam sel.
Partikel lipid nano (LNPs) merupakan sistem pengiriman terbaik yang tersedia, dengan keunggulan dalam encapsulasi, ekspresi in vivo, dan keamanan in vivo dibandingkan sistem pengiriman lainnya. LNPs dengan fragmen asam nukleat mudah ditelan oleh sel dan membentuk badan intraseluler. Setelah memasuki sel, lingkungan asam badan intraseluler memprotonasi dan memberi muatan positif pada kepala lipid ionisasi, sehingga bergabung dengan membran dalam badan intraseluler dan melepaskan asam nukleat target ke dalam sel untuk bertindak.
Yaohai Bio-Pharma layanan circRNA terus ditingkatkan dan dapat menyediakan layanan pengikapan circRNA-LNP untuk mengoptimalkan parameter proses kritis terkait serta meningkatkan konsistensi dan reproduktibilitas produksi obat circRNA.
Proses | Detail Layanan | Periode Pengiriman (hari) | Hasil Pekerjaan |
penyampulan circRNA-LNP | Pra-pengolahan Bahan dan Cairan | 2 | produk obat circRNA-LNP (DP) |
Pencampuran Perangkat Mikrofluidik | |||
Filtrasi Aliran Tangensial | 1 | ||
Filtrasi sterilisasi | |||
pengendalian kualitas circRNA-LNP | Efisiensi encapsulasi | 1 | Laporan uji |
Ukuran partikel dan indeks polidispersitas | |||
Potensial Zeta |
Sintesis cepat, efisiensi R&D tinggi dan solusi yang telah dioptimalkan sebelumnya;
Rasio encapsulasi dapat mencapai lebih dari 90%;
Ukuran nanopartikel lemak dapat dikontrol dengan mengubah laju dan rasio injeksi cairan;
produk circRNA-LNP divalidasi melalui ekspresi sel in vitro dan dapat mengekspresikan protein target dengan efisien.
Contoh LNP-eGFP circRNA disiapkan dan dosis yang berbeda dari mereka (1ug, 2ug, dan 4ug) ditransfeksi langsung ke sel 293T untuk memverifikasi apakah mereka dapat mengekspresikan protein target. Setelah 48 jam transfeksi, sinyal fluoresen jelas dapat diamati, dan terdapat efek eskalasi dosis pada intensitas fluoresensi.
Lipo-circ_eGFP, yang terdiri dari liposom dan eGFP circRNA yang tidak dibungkus diambil sebagai kontrol.