Sintesis saRNA Kustom
Self-amplifying mRNA (saRNA), juga dikenal sebagai replicon RNA, mengkodekan urutan mRNA transkripsi in vitro (IVT) dan gen replikase virus yang berasal dari alphavirus atau flavivirus. Gen replikase virus memungkinkan self-amplifikasi mRNA, yang menghasilkan peningkatan ekspresi protein dan dosis RNA minimum yang dibutuhkan dibandingkan dengan mRNA non-amplifikasi. Aspek lainnya adalah bahwa saRNA adalah molekul yang relatif besar (lebih dari 14 kb).
Yaohai Bio-Pharma telah membangun serangkaian teknologi sintesis mRNA untuk menyediakan mRNA non-mengamplifikasi dan mRNA mengamplifikasi sendiri (1000 nt~14000 nt), seperti desain dan optimasi urutan, IVT, pemurnian, liofilisasi, dan enkapsulasi nanopartikel lemak (LNP). Semua produk dirilis berdasarkan standar pengendalian kualitas yang ketat.
Gambar 1. Fitur Struktural dari mRNA IVT: Konvensional, Lingkaran, dan mRNA Mengamplifikasi Sendiri.
Fitur Urutan dari mRNA Mengamplifikasi Sendiri
RNA self-amplifikasi terdiri dari empat protein non-struktural (didesignasi sebagai nsP1, nsP2, nsP3, dan nsP4), yang berasal dari alphavirus, virus encephalitis kuda Venezuela (VEEV). Di antara ini, nsP1 menunjukkan dua aktivitas enzimatik, yaitu GTase dan N7MTase, sedangkan nsP2 memiliki aktivitas RTPase, yang sangat penting untuk menutup IVT mRNA guna menghasilkan struktur Cap 0. Selain itu, nsP2 berfungsi sebagai protease dan helikase, memfasilitasi pemrosesan kompleks seluruh nsP. Fungsi tepat dari nsP3 masih belum jelas, tetapi ia terlibat dalam interaksi dengan berbagai protein sel inang, sehingga berkontribusi pada pengurangan respons antivirus yang diinduksi oleh inang.
Sebuah daerah promotor subgenomik alphavirus (SGP) terletak sebelum gen yang diinginkan (GOI). Elemen SGP memfasilitasi inisiasi transkripsi GOI dengan melewati pembacaan urutan yang mengkodekan protein nsP virus.
Gambar 2. Sintesis dan uji sel eGFP saRNA dari Platform RNASci Yaohai Bio-Pharma.
Solusi Kustom untuk saRNA
Protokol sintesis saRNA serupa dengan mRNA: Sintesis mRNA Kustom
- Desain Sequensi
- Persiapan Template Plasmid
- transkripsi in vitro (IVT)
- penutupan Enzimatik mRNA
- penutupan Ko-transkripsi mRNA
- pemurnian mRNA
- liofilisasi mRNA
- Enkapsulasi LNP
- Analisis dan Pengujian
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
