LNP lipidni sastav Identificirajte i kvantificirajte
Značaj analize sastava lipida LNP
Lipidne nanočestice (LNP), koje se sastoje od kationskih lipida, kolesterola, fosfolipida i PEG-konjugiranog lipida, služe kao istaknuti sustavi isporuke za mRNA lijekove. Stabilnost i dvoslojna fluidnost LNP-a ovise o svojstvima i sadržaju različitih lipida koji se koriste u formulacijskom sustavu. Sastav lipida vrlo je važan za to koliko dobro LNPs isporučuju lijekove.
Yaohai-BioPharma nudi rješenja za identifikaciju i kvantificiranje sastava lipida mRNA-LNP pomoću metode tekućinske kromatografije visoke učinkovitosti s detekcijom nabijenog aerosola (HPLC-CAD).
Regulatorni zahtjevi za sastav lipida
Prema regulatornim razmatranjima WHO-a, "konačni sastav cjepiva, uključujući lipide, treba biti opisan zajedno s količinom komponenti u svakoj prezentaciji."
Analitička metoda
Analiza |
Metode |
Sastav lipida |
HPLC u kombinaciji s Corona Charged Aerosol Detector (CAD) |
Postupak
Korak 1. Priprema lipidnog uzorka
Izbor razrjeđivača je od najveće važnosti za analizu lipidnih komponenti u mRNA-LNP ljekovitim proizvodima. Razrjeđivač bi trebao učinkovito otopiti svaku komponentu lipida i poremetiti sve interakcije između lipida i inkapsulirane mRNA. Potencijalni razrjeđivači uključuju etanol, etanol/dimetil sulfoksid (DMSO), etanol/formamid, etanol/trietilamin acetat i druge.
Korak 2. HPLC-CAD
Tekućinska kromatografija reverzne faze (RP-HPLC) uparena s detektorom nabijenog aerosola (CAD) uključena je u ispitivanje sastava lipida LNP-a. S obzirom na to da lipidi nemaju kromofore i ne apsorbiraju ultraljubičasto (UV) zračenje bez derivatizacije, isparavanje je obično izazovno. CAD, budući da je osjetljiviji, može razaznati širi spektar sadržaja lipida. Prije toga, tekućinska kromatografija ultravisoke učinkovitosti (UHPLC) u kombinaciji s metodom detektora nabijenog aerosola (CAD) formulirana je i primijenjena u analizi lipida za male interferirajuće RNA (siRNA) LNP studije.
Korak 3. Analiza podataka
Količina svakog lipida unutar uzorka uključivala je izračune izvedene iz standardne krivulje pomnožene s faktorom razrjeđenja. Ovaj proces je dao sadržaj lipida za svaki sastojak unutar mRNA-LNP uzorka.
Slučaj LNP analize sastava lipida s HPLC-CAD
Na temelju HPLC-CAD, Yaohai-BioPharma je razvila robusnu metodu za analizu lipidnih komponenti mRNA-LNP. Ova je metoda potvrđena kao linearna, ponovljiva, precizna, točna i specifična za LNP formulacije, koje mogu podržati razvoj procesa, razvoj formulacije, testiranje stabilnosti i oslobađanje mRNA-LNP.
Kromatografski profil 4 lipida Yaohai-BioPharma HPLC-CAD metodom
Linearnost Yaohai-BioPharma HPLC-CAD metode (R2>0.99)
EN
