Plasmidi: Pieni pyöreä DNA-molekyyli, jolla on suuri potentiaali

Plasmidit, pienet pyöreät DNA-molekyylit, toimivat keskeisinä vektoreina DNA-rekombinaatiossa molekyylibiologian tutkimuksessa ja geeniterapiassa. Plasmidien saanto ja laatu ovat ratkaisevia, sillä superkierteinen osuus ja endotoksiinipitoisuus ovat kaksi merkittävää plasmidin laatuun vaikuttavaa tekijää.

Plasmidialatyypit

Escherichia colista (E. coli) uutettuja plasmideja on eri alatyypeissä: superkierteinen (SC), avoin ympyrä (OC) ja lineaarinen (L) muoto (kuvio 1). Niiden joukossa superkierteiset plasmidit osoittavat erinomaista stabiilisuutta, antigeenisyyttä ja korkeaa transfektio- ja ekspressiotehokkuutta.

Kuva 1. Kaavio yleisistä plasmidialatyypeistä

Plasmidi-DNA:n agaroosigeelielektroforeesissa migraationopeuden järjestys on superkierteinen DNA, lineaarinen DNA ja avoin pyöreä DNA (kuvio 2).

Kuva 2. Eri plasmidialatyyppien agaroosigeelielektroforeesimigraatiomalli

Yaohai Bio-Pharma on jatkuvasti parantanut prosessejaan ja tekniikoitaan varmistaakseen, että transfektiolaatuisten plasmidien superkierteinen osuus on ≥ 85 % ja tutkimuslaatuisten plasmidien osuus ≥ 50 %. Seuraavassa on tapausesittely (kuva 3), jossa agaroosigeelielektroforeesi yhdistetään Gel-Pro Analyzer -ohjelmistoon superkierteisen osuuden havaitsemiseksi.

Kuva 3. Plasmidin superkierteisen osuuden laaduntarkastustulokset

endotoksiini

Endotoksiini, gramnegatiivisten bakteerien soluseinän komponentti, koostuu pääasiassa lipopolysakkaridista A (LPS-A) myrkyllisenä komponenttinaan. Plasmidiuuton aikana endotoksiinia vapautuu lyysiliuokseen, mikä vaikuttaa vakavasti plasmiditransfektion tehokkuuteen soluihin. Lisäksi se voi aktivoida epäspesifisiä immuunivasteita soluissa, mikä johtaa vääriin positiivisiin kokeissa.

Yaohai Bio-Pharma noudattaa "ei-introduction"- ja "high-poisto"-lähestymistapaa ja valvoo tiukasti endotoksiinia sisältävien reagenssien ja materiaalien käyttöä koko puhdistusprosessin ajan. Yhtiö on myös kehittänyt tehokkaan endotoksiinien poistomenetelmän, joka tarjoaa kolme endotoksiinipitoisuuden tasoa: ≤0.1 EU/µg, ≤0.01 EU/µg ja ≤0.005 EU/µg.

Yaohai Bio-Pharmalla on korkean suorituskyvyn plasmidien uuttopalvelulinja, joka pystyy toimittamaan 1 mg uutettuja plasmideja jopa viikossa. Oletuksena se tarjoaa yli seitsemän laadunvalvontatestiä (QC) varmistaakseen korkealaatuisten, korkeatasoisten plasmidien toimituksen useista näkökulmista.

Etsimme myös aktiivisesti institutionaalisia tai yksittäisiä globaaleja kumppaneita. Tarjoamme alan kilpailukykyisimmän palkkauksen. Jos sinulla on kysyttävää, ota rohkeasti yhteyttä: [email protected]