Plasmidi: Pieni pyörremuotoinen DNA-molekyyli suurella potentiaalilla

Plasmidit, pienet ympyrämuotoiset DNA-molekyylit, toimivat tärkeinä vektoreina DNA-uudelleensidosessa molekulaaribiologian tutkimuksessa ja geeniterapiassa. Plasmidien tuotanto ja laatu ovat ratkaisevia tekijöitä, joista superpyörretty osuus ja endotoxini sisältö ovat kaksi merkittävää tekijää, jotka vaikuttavat plasmidien laatuun.

Plasmidi alityypit

Escherichia coli (E. coli) -bakteereistä eristetyt plasmidit esiintyvät useissa alityypeissä: superpyörretyissä (SC), avoimissa ympyröissä (OC) ja lineaarisissa (L) muodoissa (Kuva 1). Niistä superpyörretyt plasmidit näyttävät erinomaista vakautta, antigenisuutta sekä korkeaa transfektiota- ja ilmausta-tehokkuutta.

Kuva 1. Yleisten plasmidi alityyppien kaaviokuva

Plasmidi-DNA:n agarosigeliektroforeesissä siirtymisnopeuden järjestys on seuraava: superpyörretty DNA, lineaarinen DNA ja auki oleva ympyrämuotoinen DNA (Kuva 2).

Kuva 2. Erilaisten plasmidi alityyppien agarosigeliektroforeesin siirtymismalli

Yaohai Bio-Pharma on jatkuvasti parantanut prosessejaan ja tekniikoitaan varmistaakseen, että siirtotason plasmideilla on ≥85% superkierretty osuus ja tutkimustason plasmideilla ≥50%. Seuraava on tapausesitys (kuva 3), jossa agarosigelieletroforeesia yhdistetään Gel-Pro Analyzer -ohjelmistoon havaitakseen superkierretyn osuuden.

Kuva 3. Plasmidin superkierretyn osuuden laadun tarkastustulokset

Endotoxini

Endotoxiini, Gram-negatiivisten bakteerien soluseinän komponentti, koostuu pääasiassa lipopolysakkaridiesta A (LPS-A) myrkyllisestä osastaan. Plasmidien erityksessä endotoksiini vapautuu liuottimelle, mikä vaikuttaa huomattavasti plasmidien siirtämisen tehokkuuteen soluihin. Lisäksi se voi aktivoitaa epäspesifisiä immuunivasteita soluissa, johtamalla kokeissa virhepositiiveihin.

Yaohai Bio-Pharma noudattaa "ei tuonti" - ja "korkea poistaminen" -lähestymistapaa, hallitsee tiukasti reageeriteiden ja materiaalien käyttöä, jotka sisältävät endotoxineita koko puhdistusprosessin ajan. Yritys on myös kehittänyt tehokkaan endotoxini-poisto menetelmän, tarjoamalla kolmea tasoa endotoxini-sisällöstä: ≤0.1 EU/µg, ≤0.01 EU/µg ja ≤0.005 EU/µg.

Yaohai Bio-Pharmalla on korkean läpimääräisen plasmidi-esityspalveluviiva, joka pystyy toimittamaan 1 mg purettuja plasmideja jo viikossa. Oletuksena se tarjoaa yli seitsemän laadunhallintatestiä (QC) varmistaakseen korkealaatuiset ja korkeakkumerkitteiset plasmidit useista näkökulmista.

Hakemme myös aktiivisesti globaaleja kumppaneita instituutioilta tai yksilöiltä. Tarjoamme alan kilpailukykyisimmät palkkiot. Jos sinulla on kysymyksiä, ota meihin yhteyttä ilman epäröintiä: CRO@yaohaibio.cn