Bakteerien IB-käyttö rekombinantiproteiinien tuotannossa

Bakteeristen inklusiokappaleiden (IBs) käyttö rekombinanttien proteiinien tuotannossa tarjoaa helpoja erottamismenetelmiä, vakautta, korkean ilmaisun ja hajoamiskapasiteetin sekä mahdollistaa myrkyllisten proteiinien ilmaisemisen biologisella aktiivisuudella. IB-deyhmien ymmärtämisen edistys askeltoi uusia tavoituksia prosessoinnissa, ja haasteet ja ratkaisut on tunnistettu tulevan tutkimuksen kannalta.

Yaohai Bio-Pharmailla on yli 10 vuoden kokemus rekombinanttien proteiinien tuotannossa käyttäen mikrobilastausjärjestelmiä. Vahva ja ammattimainen asiantuntijajoukko takaa, että puhdistettu ja takaisinkäännety proteiini voi saavuttaa 1,5 g/L.

IBs-prosessointistrategioita ja haasteita

IBsien erotus IB:n erottamiseen käytettävät menetelmät riippuvat proteiinin rakenne-toiminto-suhteesta ja sovellustarpeista. Fyysiset menetelmät hajottavat soluja, mutta ne voivat vahingoittaa proteiinien laadua. Enzymaattiset menetelmät parantavat puistetta, mutta ne ovat kallisia. Hellät deetergentit toimivat klassisten IB-ryhmien kanssa, ei kuitenkaan ei-klassisten. pH:n valvonta on ratkaisevaan tärkeää dissoluubilisoinnissa. Elektroforeettinen沉积 on yksinkertainen, ei kuitenkaan skaalautuva biologisesti aktiivisten proteiinien kannalta.

IB:n dissoluubilisointi IB:n dissoluubilisoiminen on keskeistä aktiivisten proteiinien talteenottoon. Voimakkaita denaturanteja vahingoittavat proteiinin alkuperäistä rakennetta, kun taas ei-denaturanteja eivät ole soveltuvia klassisten IB-ryhmien kanssa. Hellät dissoluubilisointiaineet voivat hajoittaa IB:itä samalla suojaten proteiinin rakennetta, mutta ei kaikille proteiineille. Tulevaisuuden tutkimuksen tulisi kehittää parempia algoritmeja dissoluubilisointiaineiden valitsemiseksi.

Renatuuraatiomenetelmät Proteiinirenatuaatio on elintärkeää toiminnalle. In vitro -renatuaation haasteita ovat solubilisaattorin valinta, proteiinin konsentraatio, ehdot ja menetelmät, jotka vaikuttavat tulosiin. Helläät solubilisaattorit suojavat alkuperäistä rakenetta ja parantavat laatua. Moderaattiset konsentraatiot ja optimoidut ehdot vähentävät agglomerointia. Sarakeperustaiset menetelmät monolitisten matriisien kanssa tarjoavat korkeampaa puhdistusta ja tuottoa.

Renaturoiden proteiinien puhdistus Lisäpuhdistus erottaa vääränlaisesti kietoutuneet proteiinit oikein kietoutuneista proteiineista. Perinteinen kromatografia kamppailee samankaltaisten proteiinien kanssa. Vaihtoehtoiset menetelmät tarjoavat etuja, mutta niiden käyttö edellyttää kohdeproteiinikohtaisia valintoja. Yleismaisen puhdistusmenetelmän kehittäminen jää haasteeksi.

Johtopäätös

IB:t tarjoavat etuja rekombinantiproteiinin tuotannossa, mutta aiheuttavat käsittelyyn liittyviä haasteita. Syvällisemmän ymmärryksen avulla proteiinien rakenne-toiminto -suhteen sisällä IB:issä sekä edistyneempien erottelumenetelmien, dissoluabiloinnin, renaturoiden ja puhdistuksen ansiosta aktiivisten proteiinien korkean läpivonnan toipuminen saattaa pian onnistua. Tämä alhaisuttaa kustannuksia ja nopeuttaa biofarmaseutisen tutkimuksen ja kehityksen, mikä edistää alan kasvua.

Yaohai Bio-Pharma etsii myös aktiivisesti maailmanlaajuja instituutionaalisia tai yksilöllisiä kumppaneita ja tarjoaa kilpailukykyimpien palkkioita teollisuudessa. Jos sinulla on kysymyksiä, ota meihin iloisin yhteyttä: [email protected]

Lisätietoja Yaohai Bio-Pharmasta löydät verkkosivuilta: www.yaohaibio-pharma.com