LNP lipiidide koostise määramine ja kogus
LNP lipiidide koostise analüüsi olulisus
Lipiidide nanoosakesed (LNP-d), mis sisaldavad katioonset lipiidi, kolesterooli, fosfolipiidi ja PEG-konjugaadi lipiidi, toimivad mRNA ravimitoodete silmapaistvate kohaletoimetamissüsteemidena. LNP-de stabiilsus ja kahekihiline voolavus sõltuvad formuleerimissüsteemis kasutatavate erinevate lipiidide omadustest ja sisaldusest. Lipiidide koostis on väga oluline selle jaoks, kui hästi LNP-d ravimeid tarnivad.
Yaohai-BioPharma pakub lahendusi mRNA-LNP lipiidide koostise tuvastamiseks ja kvantifitseerimiseks, kasutades kõrgjõudlusega vedelikkromatograafiat koos laetud aerosooli tuvastamise (HPLC-CAD) meetodiga.
Lipiidide koostise reguleerivad nõuded
Vastavalt WHO regulatiivsetele kaalutlustele "tuleks kirjeldada vaktsiini lõplikku koostist, sealhulgas lipiide, koos komponentide kogusega igas esitluses."
Analüütiline meetod
Analüüs |
Meetodid |
Lipiidide koostis |
HPLC kombineeritud Corona Charged Aerosol Detectoriga (CAD) |
Menetlus
1. etapp. Lipiidide proovi ettevalmistamine
Lahjendusvedeliku valik on mRNA-LNP ravimtoodete lipiidikomponentide analüüsimisel ülimalt oluline. Lahjendi peaks tõhusalt lahustama iga lipiidkomponendi ja katkestama kõik interaktsioonid lipiidide ja kapseldatud mRNA vahel. Võimalikud lahjendid hõlmavad etanooli, etanooli/dimetüülsulfoksiidi (DMSO), etanooli/formamiidi, etanooli/trietüülamiinatsetaadi ja teisi.
Etapp 2. HPLC-CAD
LNP lipiidide koostise testimisse on kaasatud pöördfaasivedelikkromatograafia (RP-HPLC), mis on ühendatud laetud aerosoolidetektoriga (CAD). Arvestades, et lipiididel puuduvad kromofoorid ja nad ei neela ultraviolettkiirgust (UV) ilma derivatiseerimiseta, on lendumine tavaliselt keeruline. Kuna CAD on tundlikum, suudab see eristada laiemat lipiidisisalduse spektrit. Varem koostati ülikõrge jõudlusega vedelikkromatograafia (UHPLC) koos laetud aerosoolidetektori (CAD) meetodiga ja seda kasutati lipiidide analüüsis väikeste segavate RNA (siRNA) LNP uuringute jaoks.
Samm 3. Andmete analüüs
Iga lipiidi kogus proovis hõlmas arvutusi, mis saadi standardkõvera põhjal, mis on korrutatud lahjendusteguriga. See protsess andis mRNA-LNP proovi iga komponendi lipiidide sisalduse.
LNP lipiidide koostise analüüsi juhtum HPLC-CAD abil
Yaohai-BioPharma on HPLC-CAD põhjal välja töötanud tugeva meetodi mRNA-LNP lipiidkomponentide analüüsimiseks. See meetod valideeriti lineaarseks, korratavaks, täpseks, täpseks ja spetsiifiliseks LNP-preparaatide jaoks, mis võib toetada protsesside väljatöötamist, koostise väljatöötamist, stabiilsuse testimist ja mRNA-LNP vabanemist.
4 lipiidi kromatograafiline profiil Yaohai-BioPharma HPLC-CAD meetodil
Yaohai-BioPharma HPLC-CAD meetodi lineaarsus (R2＞0.99)
EN
