Плазмидна ДНК, ас ин витро шаблон за транскрипцију (ИВТ), је важна сировина за производњу мРНК. Висок принос, високо пречишћавање и висок опоравак плазмидне ДНК је главни објективан током развоја плазмидног процеса.
Иаохаи Био-Пхарма обезбеђује решење на једном месту за развој плазмида, укључујући развој процеса узводно (ферментација), низводно (пречишћавање), карактеризацију процеса и валидацију процеса. Имамо велико искуство у побољшању приноса плазмида и његовом изоловању из сложених матрица развојем и оптимизацијом процеса ферментације, пречишћавања и уклањања нечистоћа.
Основни биопроцес за производњу плазмида укључује: Есцхерицхиа цоли (Е. цоли) ферментација, сакупљање ћелија и алкална лиза, бистрење, концентрација, процес хроматографије у три корака (хватање, међупречишћавање и полирање) и концентрација.
Детаљи услуге | Операције јединица | parametri |
Е. цоли Ферментација |
Схаке Фласк | Састав медијума, антибиотик, запремина инокулума, температура раста итд. |
Ферментор (7 Л) |
Антибиотик, запремина инокулума, температура раста, пХ, растворени кисеоник (ДО), начин храњења (нпр. храњење), медијум за храњење, време ферментације итд. |
|
Жетва ћелија | Микрофилтрација | стандард Е. цоли процес жетве |
Лиза ћелија | Ресуспендовање ћелија, алкална лиза, неутрализација | Алкални однос, време лизе |
Разјашњење | Филтрација | Сирова филтрација, 20 µм и 5 µм филтерски низ (пожељно) |
Концентрација | Ултрафилтрација, филтрација тангенцијалног тока | Величина пора (или НМВЦ), трансмембрански притисак (ТМП), флукс, однос запремине филтрата и површине мембране |
Тростепена хроматографија | Хроматографија искључења величине (СЕЦ) или гел филтрациона хроматографија (ГФЦ) | Дужина и пречник колоне, састав пуфера, запремина убризгавања, састав мобилне фазе (адсорпција и десорпција), пХ, брзина протока, еквилибрација, везивање, испирање и услови елуирања. |
Афинитетна хроматографија (АФ) | ||
Ањонска измењивачка хроматографија (АЕКС) | ||
Концентрација | Ултрафилтрација, филтрација тангенцијалног тока | Величина пора (или НМВЦ), трансмембрански притисак (ТМП), флукс, однос запремине филтрата и површине мембране |
Више биолошких решења за процес пречишћавања |