Výroba monoclonálnych antitela v E. coli: Postupy a perspektívy

Monoklonálne antitela (mAbs), ktoré sú rozpúšťaveľné glykoproteiny o veľkosti približne 150 kDa, ktoré sa skladajú z ťažkých a ľahkých reťazcov, sa široko používajú v liečbe rakovín a autoimunných ochorení. V posledných rokoch sa metódy produkcie mAbs a ich derivátov stali rôznorodé, pričom Escherichia coli ( E. coli ) vystupuje ako dôležitý nositeľ pre produkciu zlomkov antitela.

V produkcii mAbs vyčníva spoločnosť Yaohai Bio-Pharma svojím bohatým skúsenosťami v oblasti výskumu a vývoja. S dospelou platformou, pokročilým vybavením a inovačnou úplne ekologickou technológiou vyjadrovania ponúka Yaohai kompletné služby od zostavenia bunkového banku po vyplnenie a dokončenie, úplne prispôsobené mAbs pre klientov.

Metódy produkcie mAbs v E. coli

E. coli ponúka rýchly rast, nízke náklady, jednoduchosť v prevádzke a flexibility pri expresii v cytoplazme, periplazme alebo kultúrnom prostredí. V E. coli je produkcia antibodií hlavne rozdelená na periplazmatickú, cytoplazmatickú a poloxidovačnú cytoplazmatickú produkcii, ako aj bez bunkové systémy syntézy bílkovín (CFPS). Periplazmatická produkcia dosiahla vysoké výnosy funkčného plného imunoglobulinu G (FL-IgG) pomocou optimalizácie rovnováhy medzi expresiou a sekreciou. Cytoplazmatická produkcia čelí výzvam kvôli redukujúcemu prostrediu, ale funkčný FL-IgG bol úspešne vyjadrený inžinierovaním štammov s cieľom vytvoriť oxidujúce prostredie. Systém CFPS dosiahol efektívnu produkciu antibodií prispôsobením regiónov iniciácie prekladu a pridávaním chaperónových bílkovín.

Charakterizácia antibodií a kontrola ich kvality

Kontrola kvality antitela zahŕňa biochemické, biofyzikálne a biologické charakterizácie. Biochemická charakterizácia analyzuje štruktúru, postupnosť a glykosyláciu antitela, medzi inými. Biofyzikálna charakterizácia hodnotí homogenitu, rozpustnosť a stabilitu. Biologická charakterizácia overuje bioaktivity antitela, vrátane ADCC a CDC, medzi inými. Hoci deglykosylovaté antitelia vyprodukované v E. coli chýbajú niektorým Fc efektorovým funkciám, štúdie ukázali, že ich stabilita je podobná ako u glykosylovaných antitiel a preukázali podobnú terapeutickú účinnosť za testovaných podmienok.

Aby sa obnovili alebo posilnili imunitné efekty deglykosylovaných antitiel, môžu byť inžinierované domény Fc. Napríklad, mutanty, ktoré sa vážu na FcɣRI, môžu byť vyfiltrované na posilnenie efektorovej funkcie ADCC. Tieto inžinierované antitela demonštrujú významné biologické efekty a terapeutický potenciál oboch in vitro aj in vivo.

Záver

Stručne povedané, produkcia deglykosylovantných antibiód v E. coli dosiahla dôležitý pokrok v oblasti produkcie antibiód, čo snížilo náklady a zlepšilo ich kvalitu. Hoci chýbajú niektoré funkcie Fc efektorov, pomocou inžinierskeho dizajnu ukazujú zvýšené efektorské funkcie a terapeutický potenciál. Očakáva sa, že viac deglykosylovantných antibiód vyprodukovaných v E. coli vstúpi do klinických štúdií v budúcnosti.

Hľadáme tiež aktívne globálnych partnerov, či už institucionálnych alebo jednotlivcov. Ponúkame najkonkurентnejšie odmeny v odvetví. Ak máte akékoľvek otázky, neváhajte nás kontaktovať na [email protected]