Skúmanie čistoty RNA: Iónová výmenná chromatografia

Chromatografia ionového výmeny účinne čistí RNA oddelovaním molekúl s rôznymi nábojmi. Podľa ich protonačného stavu na rôznych úrovniach pH môžu molekuly RNA niesť pozitívne alebo negatívne náboje. Táto vlastnosť sa využíva v chromatografii ionového výmeny na ovládanie interakcií medzi RNA a pevnou fázou prispôsobením iontového sila a pH roztoku, čo umožňuje dosiahnuť separáciu.

Jako prvé a najväčšie mikrobiálne biologické CRDMO v Veľkej Číne ponúka Yaohai Bio-Pharma kompletné štandardizované riešenia alebo samostatné služby, ktoré sa rozsiahnu od syntézy RNA, inžinierskeho dizajnu a konštrukcie štamu, vyvíjanie horného a dolného toku procesu, po výrobu aktívnej látky na úrovni GMP alebo ne-GMP, až po doplnkové služby pre rôzne formy, ako sú mRNA, circRNA, plazmidová RNA, rekombinantné proteiny, peptidy, enzymy, jednodoménové antitela a VLP pre ľudskú a veterinársku úlohu.

Podivme sa na aplikácie, ktoré ionová výmena chromatografia ponúka pre špecifické procesy čistenia.

1. Príprava vzorky: Dissolve komplexnú zmes obsahujúcu cieľové biomolekuly v príslušnom tamponovom riešidle. Voľba pH môže ovplyvniť nabitost biomolekúl, čím sa ovplyvní účinnosť separácie.

2. Výber sloupca: Vyberte vhodný typ sloupca s ionovou výmenou na základe nabitých charakteristik cieľových molekúl. Bežné materiály slúpcov zahŕňajú resíny na kationovú výmenu a resíny na anionovú výmenu, podľa nabitosti cieľových molekúl.

3. Nahratie vzorky: Preveďte pripravené riešidlo vzorky cez chromatografický slúpec. Funkčné skupiny na resine pre ionovú výmenu reagujú s nabitými ionmi vo vzorke, čo spôsobí rôzne časy zadržania pre molekuly s rôznymi vlastnosťami náboja.

4. Proces elúcie: Použite elučné roztoky s postupne narastajúcou iontovou súčasnou alebo zmeneným pH na eluovanie cieľových biomolekúl z kolónky. Tieto podmienky elúcie postupne menia interakciu medzi biomolekülami a iontovými výmennými rezyňami, čím sa dosahuje očistenie cieľových molekúl.

5. Kolekcia očištenej cieľovej molekuly: Zbierzte a analyzujte očištěné frakcie cieľových biomolekúl na základe ich adsorpčných charakteristík a poradia elúcie.

6. Poštochové úpravy: Vykonajte potrebné poštochové kroky na zbieraných cieľových molekülách, ako je koncentrácia, rozpúšťanie, znovu krystalizácia atď., aby ste získali konečný produkt s vysokou čistotou a aktivitou.

Iontová chromatografia je dôležitá v biopharmaceutických a biochemických priemysloch kvôli svojej schopnosti efektívne očisťovať biomolekuly, ako sú proteiny, nukleové kyseliny a peptidy, poskytujúc vysokočisté produkty, ktoré sú nevyhnutné pre výskum, diagnostiku a liečebné aplikácie.

Yaohai Bio-Pharma aktivne hľadá globálnych partnerov, ktorí sú inštitúciami alebo jednotlivcami, a ponúka najkonkurenceschopnejšie odmeny v odvetví. Ak máte akékoľvek otázky, neváhajte nás kontaktovať: [email protected]