mRNA sa syntetizuje in vitro transkripciou (IVT) z linearizovanej plazmidovej DNA (pDNA). Niektoré vedľajšie produkty sa tvoria aj počas postupu IVT, vrátane dvojvláknovej RNA (dsRNA), ktorá je identifikovaná ako hlavné spúšťače vrodenej imunitnej dráhy. Je dôležité odstrániť nečistoty a získať vysoké výťažky čistá mRNA pre in vitro/vivo výskum mRNA a terapeutické aplikácie.
Spoločnosť Yaohai Bio-Pharma vytvorila súbor technológií syntézy mRNA, ktoré poskytuje vysoko čistá mRNAako je návrh a optimalizácia sekvencie, IVT, purifikácia, lyofilizácia a enkapsulácia lipidových nanočastíc (LNP). Všetky produkty podliehajú prísnym štandardom kontroly kvality. Afinitná chromatografia (AC), založená na silnej a selektívnej interakcii medzi 3' polyA chvostom mRNA so stacionárnou fázou oligo dT, je účinnou a škálovateľnou purifikačnou stratégiou pre mRNA.
dodávky
Produkt |
Prispôsobená vysoko čistá mRNA |
Dĺžka | 100 až 10,000 XNUMX nukleotidov |
Obsah RNA | 100 ug~10 mg (OD260) |
Čistota | A260 / A280 |
Identifikácia a čistota |
Elektroforéza na agarózovom géli (AGE) Kapilárna elektroforéza (CE) |
Bufferu | Voda bez RNázy (kvapalina) |
Doprava | Loď so suchým ľadom; alebo pri teplote okolia |
Uskladnenie |
● Kvapalina, pri alebo pod -20 °C ● Lyofilizovaný prášok pri 4 °C |
Využitie |
vývoj formulácie LNP, Bunkové testy, pokus na zvieratách |
Ďalšie prispôsobiteľné možnosti
5' Čiapka |
● Bez uzáveru ● Cap0, co-capated ● Cap1, co-capated ● Cap1, enzymatický uzáver |
5' UTR/3' UTR |
● Prírodná sekvencia UTR ● Mutantná/upravená sekvencia UTR |
3' PolyA chvost |
● 100A ~ 120A chvost (odporúčané) ● Segmentovaný polyA chvost ● Iný vlastný chvost |
Modifikované nukleozidy |
● Neupravené základy, ● Pseudouridín (Ψ), ● N1-metylpseudouridín (N1Ψ), ● 5-metylcytozín (m5C), ● 5-metyluridín (m5U), ● 5-metoxyuridín (5mU), ● 2-tiouridín (s2U), ● 2'-XNUMX-metyl-U ● iní |
Prípadová štúdia
Vyvinuli sme viacstupňový chromatografický purifikačný proces a pripravili sme mRNA s vysokou čistotou a integritou (> 95 %).
Obr. Analýza mRNA s vysokou čistotou (>98 %)