mRNA sa syntetizuje in vitro transkripciou (IVT) z lineárneho plazmidového DNA (pDNA). Počas postupu IVT sa tiež vytvárajú niektoré vedľajšie produkty, vrátane dvojvlákňovej RNA (dsRNA), ktorá bola identifikovaná ako hlavné spustitele innate imunitného pathway. Je kritické odstrániť nečistoty a získať vysoké výnosy čistej mRNA pre výskum mRNA in vitro/vivo a terapeutické aplikácie.
Yaohai Bio-Pharma vyvinula súbor technológií pre syntézu mRNA, ktoré ponúkajú veľmi čistú mRNA , ako napríklad dizajn a optimalizácia sekvencie, IVT, čistenie, lyofilizácia a encapsulácia lipidovými nanocasticami (LNP). Všetky produkty sa uvoľňujú pod prísne kontrolovanými štandardmi kvality. Afinítne chromatografie (AC), založené na silnom a vybranom interakcii medzi 3′ polyA chvostom mRNA a stacionárnym fázovým oligo dT, je efektívna a škálovateľná strategia na čistenie mRNA.
Výstupy
| Produkt |
Prispôsobená Veľmi Čistá mRNA
|
| Dĺžka |
100~10,000 nukleotidov |
| Obsah RNA |
100 µg~10 mg (OD260) |
| Čistota |
A260/A280 |
| Identifikácia a čistota |
Elektroforeza v Agarózovom Gele (AGE)
Kapilárna Elektroforeza (CE)
|
| Amortizátor |
Voda voľná od RNase (kapalina) |
| Preprava |
Prepravovať s suchým ledom; alebo pri miestnosti teplote |
| Úložisko |
● Tečná, na alebo pod -20°C
● Lyofilizovaný prášok, pri 4°C
|
| APLIKÁCIA |
Vývoj formulácie LNP,
Bunkové asetáty, Zvierateľské experimenty
|
Ďalšie prispôsobiteľné možnosti
| 5' Zakončenie |
● Bez zakončenia
● Cap0, spoločne zakončené
● Cap1, spoločne zakončené
● Cap1, enzymatické zakončenie
|
| 5’ UTR/3’ UTR |
● Prírodná UTR sekvenčná
● Mutantná/Stavbená UTR sekvenčná
|
| 3' PolyA chvost |
● 100A ~120A Chvost (doporučený)
● Segmentovaný polyA chvost
● Iný vlastný chvost
|
| Upravené nukleozydy |
● Nepremenné bazy,
● Pseudouridín (Ψ),
● N1-Methylpseudouridín (N1Ψ),
● 5-methylcytosín (m5C),
● 5-methyluridín (m5U),
● 5-methoxyuridín (5moU),
● 2-tióuridín (s2U),
● 2′-O-methyl-U
● Iné
|
Prípadová štúdia<br>
Vytvorili sme viacstupňový chromatografický proces čistenia a pripravili mRNA s vysokou čistotou a integritou (>95%).
Obr. Analýza mRNA s vysokou čistotou (＞98%)
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
