Explore o fascinante mundo da precipitação de cloreto de lítio

A precipitação com cloreto de lítio é amplamente utilizada para separar RNA da solução.

Aqui está o detalhamento do processo:

1. Preparação da amostra: Comece com uma amostra contendo RNA, como in vitro mistura de transcrição.

2. Adição de cloreto de lítio: Adicione um volume apropriado de solução concentrada de cloreto de lítio à solução de RNA.

3. Incubação: Após adicionar cloreto de lítio, a solução é incubada a uma temperatura baixa, geralmente em torno de -20°C. Isso faz com que as moléculas de RNA precipitem para fora da solução.

4. Centrifugação: Após a incubação, a solução é centrifugada em alta velocidade. Isso separa o RNA precipitado do restante da solução, que contém impurezas.

5. Lavagem: Uma vez que a centrifugação esteja completa, remova cuidadosamente o sobrenadante, mas sem interferir na precipitação do RNA. Lave as partículas de RNA com etanol frio ou álcool isopropílico para remover quaisquer impurezas restantes.

6. Ressuspensão de RNA: Após a lavagem, o precipitado de RNA é brevemente seco ao ar e então ressuspenso em um tampão apropriado, como tampão TE (tampão Tris-EDTA) ou água destilada. Pipetagem suave ou correntes parasitas podem ser necessárias para ressuspender adequadamente o RNA.

7. Quantificação e análise: Finalmente, o RNA isolado é quantificado por espectroscopia ultravioleta ou método de fluorescência. Isso determina a concentração e a pureza da amostra de RNA, o que é importante para aplicações posteriores, como encapsulamento de LNP e transfecção de células.

A Yaohai Bio-Pharma é especializada no uso do método de precipitação de cloreto de lítio no processo de produção porque é simples, de baixo custo e produz RNA de alta qualidade adequado para uma variedade de aplicações de biologia molecular. No entanto, é importante otimizar as condições (por exemplo, concentração de cloreto de lítio, tempo de incubação, velocidade de centrifugação) para atingir os melhores resultados para uma amostra específica.

Confiando em nossa poderosa e proprietária plataforma RNASci, também fornecemos serviços de síntese de RNA sob medida, bem como produtos de catálogo de mRNA (até 10 kb), circRNA (até 4 kb) e LNP. Estabelecemos um conjunto completo de tecnologias de síntese de mRNA/circRNA para fornecer RNA de alta qualidade, como design e otimização de sequência, IVT, circularização, purificação e encapsulamento de LNP. Todos os produtos são lançados sob os rigorosos padrões de controle de qualidade.

A Yaohai Bio-Pharma é a primeira e maior CRDMO de produtos biológicos dedicada a sistemas de expressão microbiana na Grande China. Oferecemos soluções personalizadas completas ou serviços autônomos que vão desde síntese de RNA, engenharia de cepas e construção, desenvolvimento de processos upstream e downstream, até fabricação de substâncias medicamentosas de nível GMP ou não GMP e serviços de preenchimento e acabamento para diversas modalidades, como mRNA, circRNA, RNA plasmídeo, proteínas recombinantes, peptídeos, enzimas, anticorpos de domínio único (sdAbs) e VLPs. Estamos comprometidos em atender às necessidades clínicas e comerciais de clientes globais em medicamentos biológicos, vacinas e diagnósticos para uso humano e veterinário.

A Yaohai Bio-Pharma também está buscando ativamente parceiros globais institucionais ou individuais e oferece a remuneração mais competitiva do setor. Se você tiver alguma dúvida, sinta-se à vontade para entrar em contato conosco: [email protected]