Kvalitetskontroll og anvendelser av rekombinante proteiner

Kvalitetskontroll av rekombinante proteiner er avgjørende for påliteligheten og gjentagbarheten av eksperimentelle data. Hver eneste trinn, fra prosjektutforming til produksjonsprosessen, krever strikte kvalitetskontrollstrategier.

Kvalitetskontrollstrategier

Den industrielle sektoren følger strenge standardarbeidsprosedyrer, mens akademisk felleskap trenger å forbedre faglig kunnskap for å forbedre dataens gjentagbarhet. Proteiner med spesifikke biologiske anvendelser eller biokjemiske egenskaper krever tilpassede kvalitetskontroll (QC) strategier.

Utfordrende eksempler og løsninger

Yaohai Bio-Pharma har omfattende erfaring innen produksjon og renasjon av rekombinante proteiner, sammen med et team av eksperter, som sikrer at din proteinkontorblir fullført med høy renhet. Ved å bruke vår erfaring fra hundrevis av prosjekter, oppsumerer Yaohai hvordan man kan optimere proteinformasjon.

Nukleinsyrebinderende proteiner: Fjerningssteg for nukleinsyrer, som nukleaser eller PEI-nedbøyning, er nødvendige. Forholdet A260nm/A280nm overvåkes for å oppdage nukleinsyreforurensning.

Mus Ferritin Tung Kjede 1 for kryo-EM: Rensningsstegene må optimaliseres, og nukleaser må legges til for å redusere forholdet A260nm/A280nm og sikre proteinepurret.

Kimerisk Protein Menneskelig dsRBEC: Cellelyse bruker en buffert som inneholder urea, etterfulgt av kolonne-refolding for å oppnå funksjonelt aktive proteiner.

Proteiner som Binder Divalente Kationer: Spesifikke divalente kationer må legges til under uttrykk og renset, og kjelater bør unngås.

Jern-Sulfur Proteiner: Imidazol bør unngås for å forhindre ødelegging av [2Fe ± 2S]-klusteret, og sikre korrekt proteinfolding og funksjon.

Oppløselig Fragment av LLT1: Mutantdesignet optimiserer formering av disulfidbindinger og proteinfolding, noe som fører til stabile og høyoppgittende proteiner.

CLK1 Kinasekristalliserings: Ko-ekspresjon med λ-fosfatase fjerner fosfater fra fosforyrasjonssteder, og størrelseseksklusjonkromatografi (SEC) og anionsvekselkromatografi brukes for å oppnå homogen CLK1 uten heterogent fosforyrt materiale.

Proteiner for antigenbruk: Renhetsevaluering er nødvendig for å unngå kontaminasjon med høygradsimmunogeneriske proteiner. For strukturelle epitopantistoffer må den tredimensjonale konformasjonen av antigenen beholdes.

Aggregeringsoppfatte proteiner: Strategier som screening av forskjellige strekker og å senke odlingstemperaturen brukes for å begrense aggregeringsproblemer, og rask renningsstrategier designes.

Endotoksinfjerning: Metoder som positivt ladet kromatografi og polycationligandaffinitetskromatografi fjerner endotokser, og sørger for at LPS-nivåene er under anvendelsesgrenser.

Proteinkomplekser: Underenheter uttrykkes hver for seg og monteres in vitro eller co-uttrykkes for å danne funksjonelle komplekser. Kompleksintegritet vurderes av homogenitet og molarmasse.

Konklusjon

Proteinfremstilling begynner med strategisk design, der man tar hensyn til biokjemiske egenskaper og anvendelser. Under uttrykk, renasjon og kvalitetskontroll, optimiseres betingelsene og metodene for stabilitet, ikke-aggregering og nativt tilstand. Renede proteiner brukes for ulike etterfølgende formål, som biofysisk karakterisering.

Yaohai Bio-Pharma søker også aktivt globale partnere, både institusjonelle og enkeltpersoner, og tilbyr den mest konkurransedyktige kompensasjonen i bransjen. Hvis du har noen spørsmål, hesitate ikke å kontakte oss: [email protected]