Plasmid: Et lite sirkulært DNA-molekyl med stort potensial

Plasmider, små sirkulære DNA-molekyler, tjener som essensielle vektorer for DNA-rekombinasjon i molekylærbiologisk forskning og genterapi. Utbyttet og kvaliteten til plasmider er avgjørende, med supercoiled andel og endotoksininnhold er to viktige faktorer som påvirker plasmidkvaliteten.

Plasmidundertyper

Plasmider ekstrahert fra Escherichia coli (E. coli) finnes i forskjellige undertyper: supercoiled (SC), åpne sirkulære (OC) og lineære (L) former (figur 1). Blant dem viser supercoil-plasmider utmerket stabilitet, antigenisitet og høy transfeksjons- og ekspresjonseffektivitet.

Figur 1. Skjematisk diagram av vanlige plasmidundertyper

I agarosegelelektroforese av plasmid-DNA er rekkefølgen på migrasjonshastigheten supercoiled DNA, lineært DNA og åpent sirkulært DNA (Figur 2).

Figur 2. Agarosegelelektroforesemigrasjonsmønster for forskjellige plasmidundertyper

Yaohai Bio-Pharma har kontinuerlig forbedret sine prosesser og teknikker for å sikre at den supercoilede andelen av plasmider av transfeksjonsgrad er ≥85 % og andelen av plasmider av forskningskvalitet er ≥50 %. Følgende er en kasusdemonstrasjon (figur 3), der agarosegelelektroforese kombineres med Gel-Pro Analyzer-programvare for å oppdage supercoil-andelen.

Figur 3. Kvalitetsinspeksjonsresultater av plasmid supercoiled proporsjon

Endotoksin

Endotoksin, en komponent i celleveggen til gramnegative bakterier, består hovedsakelig av lipopolysakkarid A (LPS-A) som sin toksiske komponent. Under plasmidekstraksjon frigjøres endotoksin i lyseringsløsningen, noe som påvirker effektiviteten av plasmidtransfeksjon inn i celler alvorlig. I tillegg kan det aktivere ikke-spesifikke immunresponser i celler, noe som fører til falske positiver i eksperimenter.

Yaohai Bio-Pharma bruker en "ikke-introduksjon" og "høy fjerning" tilnærming, og kontrollerer strengt bruken av reagenser og materialer som inneholder endotoksin gjennom hele renseprosessen. Selskapet har også utviklet en effektiv metode for fjerning av endotoksin, som tilbyr tre nivåer av endotoksininnhold: ≤0.1 EU/µg, ≤0.01 EU/µg og ≤0.005 EU/µg.

Yaohai Bio-Pharma har en servicelinje for plasmidekstraksjon med høy gjennomstrømning, som kan levere 1 mg ekstraherte plasmider på så raskt som en uke. Som standard gir den mer enn syv kvalitetskontrolltester (QC) for å sikre levering av høykvalitets, høystandard plasmider fra flere perspektiver.

Vi søker også aktivt etter institusjonelle eller individuelle globale partnere. Vi tilbyr den mest konkurransedyktige kompensasjonen i bransjen. Hvis du har spørsmål, kan du gjerne kontakte oss: [email protected]