Utnyttelse av bakterielle IBer for rekombinant proteinproduksjon

Bakterielle inklusjonslegemer (IB) i rekombinant proteinproduksjon tilbyr enkel separasjon, stabilitet, høy ekspresjon og nedbrytningsresistens, og kan uttrykke giftige proteiner med biologisk aktivitet. Fremskritt i IB-forståelse åpner nye veier for prosessering, med utfordringer og løsninger identifisert for fremtidig forskning.

Yaohai Bio-Pharma har mer enn 10 års erfaring i produksjon av rekombinante proteiner ved bruk av mikrobielle fermenteringssystemer. Vårt sterke og profesjonelle team av eksperter garanterer at det rensede refoldede proteinet kan nå 1.5 g/L.

Behandlingsstrategier og utfordringer til IB-er

Separasjon av IBer Metoder for IB-separasjon avhenger av proteinstruktur-funksjon og bruksbehov. Fysiske metoder forstyrrer cellene, men kan skade proteinkvaliteten. Enzymatiske metoder forbedrer renheten, men er kostbare. Skånsomme vaskemidler fungerer for klassiske IB-er, ikke ikke-klassiske. pH-kontroll er avgjørende for løselighet. Elektroforeseavsetning er enkel, men ikke skalerbar for biologisk aktive proteiner.

Solubilisering av IBer Solubilisering av IB-er er avgjørende for å gjenvinne aktive proteiner. Sterke denatureringsmidler skader naturlig struktur, mens ikke-denatureringsmidler ikke er egnet for klassiske IB-er. Milde solubiliseringsmidler kan løse opp IB-er mens de beskytter proteinstrukturen, men ikke alle proteiner. Fremtidig arbeid trenger bedre algoritmer for å velge solubiliseringsmidler.

Renatureringsstrategier Proteinrenaturering er avgjørende for funksjonalitet. In vitro-renaturering står overfor utfordringer. Valg av løsemiddel, proteinkonsentrasjon, forhold og metoder påvirker resultatet. Milde solubiliseringsmidler beskytter den opprinnelige strukturen og forbedrer kvaliteten. Moderate konsentrasjoner og optimaliserte forhold reduserer aggregering. Kolonnebaserte metoder med monolitiske matriser gir høyere renhet og utbytte.

Rensing av renaturerte proteiner Ytterligere rensing skiller feilfoldede fra riktig foldede proteiner. Tradisjonell kromatografi sliter med lignende proteiner. Alternative metoder gir fordeler, men krever målproteinspesifikk seleksjon. Å utvikle en universell rensemetode er fortsatt en utfordring.

Konklusjon

IB-er tilbyr fordeler i rekombinant proteinproduksjon, men utgjør prosesseringsutfordringer. Med en dypere forståelse av proteinstruktur-funksjon innen IB-er og fremskritt innen separasjon, solubilisering, renaturering og rensing, kan det snart oppnås høy gjennomstrømningsgjenvinning av aktive proteiner. Dette vil senke kostnadene og akselerere biofarmasøytisk FoU, og drive industrivekst.

Yaohai Bio-Pharma søker også aktivt etter institusjonelle eller individuelle globale partnere og tilbyr den mest konkurransedyktige kompensasjonen i bransjen. Hvis du har spørsmål, kan du gjerne kontakte oss: [email protected]

For mer informasjon om Yaohai Bio-Pharma, vennligst se nettstedet: www.yaohaibio-pharma.com