Å bruke bakterielle IBs for produksjon av rekombinante proteiner

Bakterielle inklusjonslegemer (IBs) i produksjon av rekombinante proteiner tilbyr enkel adskiling, stabilitet, høy uttrykk og motstandsdyktighet mot nedbrytning, og kan uttrykke toksine proteiner med biologisk aktivitet. Fremgang i forståelsen av IBs åpner nye veier for behandling, med utfordringer og løsninger som er identifisert for fremtidig forskning.

Yaohai Bio-Pharma har mer enn 10 år erfaring i produksjon av rekombinante proteiner ved bruk av mikrobielle fermertasjonsystemer. Vår sterke og profesjonelle ekspertgruppe garanterer at den renede og refoldede proteinet kan oppnå 1,5 g/L.

Behandlingsstrategier og utfordringer for IBs

Adskiling av IBs Metoder for IB-separasjon avhenger av proteinstruktur-funksjon og anvendelsesbehov. Fysiske metoder ødelegger celler, men kan skade proteinkvalitet. Enzymer baserte metoder forbedrer renhet, men er dyre. Mildere emulgeringsmidler fungerer for klassiske IB-er, ikke for ikke-klassiske. pH-styring er avgjørende for oppløselighet. Elektroforeseavsetning er enkel, men ikke skalbar for biologisk aktive proteiner.

Oppløsning av IB-er Å oppløse IB-er er avgjørende for å gjenopptage aktive proteiner. Sterke denaturanter skader den naturlige strukturen, mens ikke-denaturanter ikke er egnet for klassiske IB-er. Milde oppløsere kan dissolvere IB-er samtidig som de beskytter proteinstrukturen, men ikke alle proteiner. Fremtidig arbeid trenger bedre algoritmer for å velge oppløsere.

Renatureringstrategier Proteinrenaturering er avgjørende for funksjonalitet. In vitro renaturering møter utfordringer. Valg av solubilisator, protein-konsentrasjon, betingelser og metoder påvirker resultatet. Mildre solubilisatorer beskytter den opprinnelige strukturen og forbedrer kvaliteten. Moderat konsentrasjon og optimaliserte betingelser reduserer aggregering. Kolonnebaserte metoder med monolitiske matriser gir høyere rensningsgrad og utbytte.

Rensning av renaturerte proteiner Videre rensetting skiller mellom feilfoldede og riktig foldede proteiner. Tradisjonell kromatografi klager med liknende proteiner. Alternative metoder tilbyr fordeler, men krever valg spesifikt for målproteinet. Å utvikle en universell rensetechnikk forblir en utfordring.

Konklusjon

IBs gir fordeler i produksjon av rekombinante proteiner, men stiller prosessering utfordringer. Med en dypere forståelse av struktur-funksjon hos proteiner innen IBs og fremgang i separasjon, solubilisering, renaturering og renning, kan høy gjennomføringskapasitet for återvinne aktive proteiner snart bli oppnådd. Dette vil senke kostnadene og akselerere biofarmaceutisk R&D, noe som driver bransjen framover.

Yaohai Bio-Pharma søker også aktivt globale partnere, både institusjonelle og enkeltpersoner, og tilbyr den mest konkurransedyktige kompensasjonen i bransjen. Hvis du har noen spørsmål, hesitate ikke å kontakte oss: [email protected]

For mer informasjon om Yaohai Bio-Pharma, vennligst se på nettstedet: www.yaohaibio-pharma.com