LNP lipidų sudėties nustatymas ir kiekis
LNP lipidų sudėties analizės reikšmė
Lipidų nanodalelės (LNP), apimančios katijoninį lipidą, cholesterolį, fosfolipidą ir PEG konjuguotą lipidą, yra svarbios mRNR vaistų tiekimo sistemos. LNP stabilumas ir dvisluoksnis skystumas priklauso nuo įvairių lipidų, naudojamų formulavimo sistemoje, savybių ir kiekio. Lipidų sudėtis yra labai svarbi nustatant, kaip gerai LNP tiekia vaistus.
„Yaohai-BioPharma“ teikia sprendimus, skirtus mRNR-LNP lipidų kompozicijai nustatyti ir kiekybiškai įvertinti naudojant aukštos kokybės skysčių chromatografiją su įkrauto aerozolio aptikimo (HPLC-CAD) metodu.
Lipidų sudėties reguliavimo reikalavimai
Remiantis PSO reglamentais, „galutinė vakcinos sudėtis, įskaitant lipidus, turi būti aprašyta kartu su komponentų kiekiu kiekvienoje pakuotėje“.
Analitinis metodas
Analizė |
Metodai |
Lipidų sudėtis |
HPLC kartu su Corona Charged Aerosol Detector (CAD) |
Procedūra
1 žingsnis. Lipidų mėginio paruošimas
Skiediklio pasirinkimas yra itin svarbus analizuojant lipidų komponentus mRNR-LNP vaistų produktuose. Skiediklis turi veiksmingai ištirpinti kiekvieną lipidų komponentą ir sutrikdyti bet kokią lipidų ir kapsuliuotos mRNR sąveiką. Galimi skiedikliai yra etanolis, etanolis/dimetilsulfoksidas (DMSO), etanolis/formamidas, etanolis/trietilamino acetatas ir kt.
2 veiksmas. HPLC-CAD
Atvirkštinės fazės skysčių chromatografija (RP-HPLC), suporuota su įkrautu aerozolio detektoriumi (CAD), buvo įtraukta į LNP lipidų sudėties testavimą. Atsižvelgiant į tai, kad lipidams trūksta chromoforų ir jie nesugeria ultravioletinės (UV) spinduliuotės be derivatizacijos, išgarinimas paprastai yra sudėtingas. CAD, būdamas jautresnis, gali atskirti platesnį lipidų kiekio spektrą. Anksčiau buvo sukurta itin didelio efektyvumo skysčių chromatografija (UHPLC), sujungta su įkrauto aerozolio detektoriaus (CAD) metodu, ir taikyta lipidų analizei mažų trukdančių RNR (siRNR) LNP tyrimams.
3 žingsnis. Duomenų analizė
Kiekvieno lipido kiekis mėginyje buvo apskaičiuojamas pagal standartinę kreivę, padaugintą iš praskiedimo koeficiento. Šis procesas davė lipidų kiekį kiekvienai mRNR-LNP mėginio sudedamajai daliai.
LNP lipidų sudėties analizės su HPLC-CAD atvejis
Remdamasi HPLC-CAD, Yaohai-BioPharma sukūrė patikimą mRNR-LNP lipidų komponentų analizės metodą. Šis metodas buvo patvirtintas kaip linijinis, pakartojamas, tikslus, tikslus ir specifinis LNP formulėms, kuris galėtų palaikyti proceso kūrimą, formulės kūrimą, stabilumo testavimą ir mRNR-LNP išsiskyrimą.
4 lipidų chromatografinis profilis Yaohai-BioPharma HPLC-CAD metodu
Yaohai-BioPharma HPLC-CAD metodo tiesiškumas (R2＞0.99)
EN
