플라스미드 정제 기술의 힘

오늘 야오하이 바이오파마에서는 이온교환 크로마토그래피를 이용해 플라스미드 DNA를 정제하는 방법을 소개합니다.
 
이온 교환 크로마토그래피는 주로 용질 분자를 사용하여 반대 전하를 띠는 고체상 이온 교환기와 결합합니다. 용출액의 pH를 변경하거나 이온 강도를 높이는 경우 이온 교환기와 결합된 용질 분자는 용출액의 이온과 교환하여 용출됩니다. 다른 용질 분자는 다른 전하를 띠고 고정에 결합하는 능력이 강하며 용액으로 다른 순서로 용출되어 다양한 성분을 분리합니다. pDNA 골격의 음전하 인산기가 컬럼의 양전하 이온 교환기와 상호 작용할 수 있으므로 음이온 교환(AEC)을 사용하여 pDNA를 정제하고 분리할 수 있습니다.
 
정제된 mRNA 외에도 Yaohai Bio-Pharma는 "RNASci" RNA 맞춤형 연구 샘플 합성 서비스 플랫폼을 보유하고 있으며, 이는 RNADes(mRNA 구조 설계 및 최적화), RNASyn(mRNA 합성 및 수정), RNAPur(mRNA 정제), RNAQua(mRNA 품질 분석 및 제어)의 네 가지 기술 모듈로 구성되어 있습니다. RNA 합성, 균주 엔지니어링 및 구축, 상류 및 하류 공정 개발에서 GMP 또는 비 GMP 등급 API 생산에 이르기까지 종단 간, 원스톱, 맞춤형 솔루션 또는 독립형 서비스를 제공합니다. 다양한 모드의 mRNA, circRNA, 플라스미드 RNA, 재조합 단백질, 펩타이드, 효소, 단일 도메인 항체(sab) 및 VLP에 대한 충전 및 완료 서비스도 제공합니다.
 
다른 토폴로지를 가진 플라스미드 DNA는 동일한 총 전하 수와 분자량을 갖지만, 다른 구조를 가진 플라스미드 DNA는 다른 국소 전하 밀도를 갖는다. 크로마토그래피 환경에서 플라스미드 DNA와 크로마토그래피 고정 리간드 간의 전반적인 상호 작용은 국소 전하 인력에 따라 달라진다. SC pDNA의 전하 밀도는 이완된 오픈 루프 DNA보다 훨씬 높으므로 용출액 염의 농도가 증가함에 따라 양전하 컬럼 리간드와 더 강한 전하 인력을 갖는 SC pDNA는 OC pDNA보다 늦게 용출된다. 그러나 음이온 교환 크로마토그래피에서는 수소 결합, 분산력, AT 함량과 같은 다른 매개변수가 전하 밀도에 영향을 미치고 비특이적 흡착이 발생한다. 따라서 플라스미드 정제 과정에서 음이온 교차 크로마토그래피의 분리 선택성은 그다지 높지 않으며 다른 크로마토그래피 방법과 종종 결합해야 한다.

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