재조합 단백질 생산: 엔지니어링된 E. coli 균주

대장균(E. coli)은 생물제약 산업에서 재조합 단백질을 생산하는 데 중요한 역할을 했으며, 생물학적 의약품을 제조하는 최초의 발현 벡터 역할을 했습니다. 대장균은 빠른 성장, 편리한 유전자 조작, 재조합 단백질의 신속한 합성 등의 장점을 자랑합니다. 광범위한 수정을 통해 대장균은 단백질 발현을 위한 최적의 선택이 되었고, 다양한 대장균 균주의 설계로 이어졌습니다.

Yaohai Bio-Pharma는 E. coli 발현 시스템을 사용하여 일련의 생물약품의 발효, 정제, 제형 공정 개발 및 생산을 위한 원스톱 아웃소싱 서비스를 제공하는 데 특화되어 있습니다. Yaohai의 광범위한 경험과 관련하여, 우리는 재조합 단백질 생산에 사용되는 네 가지 일반적인 E. coli 균주와 그 특징을 요약했습니다.

BL 21 균주

E. coli B 계통에서 유래된 BL21 균주는 Lon 프로테아제와 외막 프로테아제 OmpT가 없습니다. Lon 프로테아제는 주로 외인성 단백질을 분해하는 반면, OmpT는 주로 세포외 기질 단백질을 분해합니다. 이 두 가지 핵심 프로테아제가 없으면 재조합 단백질의 분해를 효과적으로 방지할 수 있습니다.

오리지미 스트레인

E. coli K-12의 파생물인 Origami 균주는 티오레독신 환원효소와 글루타티온 환원효소에 돌연변이가 있어 이황화물 결합을 포함하는 올바르게 접힌 단백질의 형성을 용이하게 하고 단백질 용해도를 향상시킵니다. Origami, Origami 2, Origami B를 포함한 Origami 균주는 이황화물 결합을 포함하는 활성 단백질의 발현에 적합합니다.

셔플 스트레인

SHuffle 균주는 세포질에서 이황화물 결합 이성화효소 DsbC를 구성적으로 발현하여 산화된 단백질에서 올바른 이황화물 결합의 형성을 촉진합니다. 또한 단백질 접힘을 위한 분자 샤페론 역할을 하여 올바른 형태 형성을 돕습니다.

로제타 균주

Rosetta 균주는 E. coli에 희귀 코돈에 해당하는 tRNA를 보충하여 원핵생물 시스템에서 외인성 유전자, 특히 진핵생물 유전자의 발현 수준을 개선하는 것을 목표로 합니다. BL21에서 유래하고 클로람페니콜 내성 pRARE 플라스미드를 운반하며, E. coli에 원래 없었던 희귀 코돈(AUA, AGG, AGA, CUA, CCC 및 GGA)에 해당하는 XNUMX개의 tRNA를 보충하여 보다 "보편적인" 단백질 발현을 제공합니다.

결론

재조합 단백질의 성공적인 생산을 위한 세 가지 주요 요인은 숙주, 벡터, 배양 조건입니다. 재조합 단백질의 물리화학적 특성, 각 균주의 고유한 장점, 실험의 특정 요구 사항에 대한 이해를 바탕으로 가장 적합한 숙주를 선택해야 합니다. 또한 플라스미드 벡터, 온도, 유도제와 같은 요인을 최적화하여 단백질 발현을 향상시켜야 합니다.

Yaohai Bio-Pharma는 또한 기관 또는 개인 글로벌 파트너를 적극적으로 찾고 있으며 업계에서 가장 경쟁력 있는 보상을 제공합니다. 궁금한 사항이 있으면 언제든지 문의하세요. [email protected]