재조합 단백질의 품질 관리 및 응용

재조합 단백질의 품질 관리가 실험 데이터의 신뢰성과 재현성에 매우 중요합니다. 프로젝트 설계부터 생산 공정까지 모든 단계에는 엄격한 품질 관리 전략이 필요합니다.

품질 관리 전략

산업 부문은 엄격한 표준 운영 절차를 준수하는 반면, 학계는 데이터 재현성을 개선하기 위해 전문 지식을 강화해야 합니다. 특정 생물학적 응용 분야 또는 생화학적 특성을 가진 단백질은 맞춤형 품질 관리(QC) 전략이 필요합니다.

도전적인 예와 해결책

Yaohai Bio-Pharma는 재조합 단백질 생산 및 정제 분야에서 광범위한 경험을 자랑하며, 전문가 팀과 함께 단백질 생산이 고순도로 완료되도록 보장합니다. 수백 개의 프로젝트에서 얻은 경험을 활용하여 Yaohai는 단백질 정제를 최적화하는 방법을 친절하게 요약합니다.

핵산 결합 단백질: 핵산 분해 효소나 PEI 침전과 같은 핵산 제거 단계가 필요합니다. A260nm/A280nm 비율을 모니터링하여 핵산 오염을 감지합니다.

크라이오-EM을 위한 마우스 페리틴 중쇄 1: 정제 단계를 최적화하고, 뉴클레아제를 추가해 A260nm/A280nm 비율을 낮추고 단백질 순도를 보장해야 합니다.

키메라 단백질 인간 dsRBEC: 세포 용해는 요소를 함유한 완충액을 사용한 후, 컬럼상에서 재접힘을 일으켜 기능적으로 활성화된 단백질을 얻습니다.

2가 양이온을 결합하는 단백질: 발현 및 정제 과정에서 특정한 2가 양이온을 첨가해야 하며, 킬레이트제는 피해야 합니다.

철-유황 단백질: [2Fe ± 2S] 클러스터의 파괴를 방지하고 올바른 단백질 접힘 및 기능을 보장하기 위해 이미다졸은 피해야 합니다.

LLT1의 가용성 단편: 돌연변이 설계는 이황화물 결합 형성과 단백질 접힘을 최적화하여 안정적이고 고수율의 단백질을 생성합니다.

CLK1 키나제 결정화: λ-포스파타제와의 공동 발현을 통해 인산화 부위에서 인산염이 제거되고, 크기 배제 크로마토그래피(SEC)와 음이온 교환 크로마토그래피를 사용하여 이질적인 인산화 없이 균일한 CLK1을 얻습니다.

항원 사용을 위한 단백질: 순도 평가는 고도로 면역원성인 단백질로 인한 오염을 피하기 위해 필요합니다. 구조적 에피토프 항체의 경우 항원의 3차원적 형태를 유지해야 합니다.

응집되기 쉬운 단백질: 다양한 균주를 선별하고 배양 온도를 낮추는 등의 전략을 사용하여 응집 문제를 제한하고 신속한 정제 전략을 설계합니다.

엔도톡신 제거: 양전하 크로마토그래피나 폴리양이온 리간드 친화성 크로마토그래피와 같은 방법은 엔도톡신을 제거하여 LPS 수준을 적용 한도 이하로 유지합니다.

단백질 복합체: 서브유닛은 별도로 발현되고 시험관 내에서 조립되거나 공동 발현되어 기능적 복합체를 형성합니다. 복합체 무결성은 균질성과 몰 질량으로 평가됩니다.

결론

단백질 생산은 생화학적 특성과 응용 분야를 고려한 전략적 설계로 시작됩니다. 발현, 정제 및 QC 동안 조건과 방법은 안정성, 비응집 및 기본 상태에 맞게 최적화됩니다. 정제된 단백질은 생물물리적 특성화와 같은 다양한 하류 용도에 사용됩니다.

Yaohai Bio-Pharma는 또한 기관 또는 개인 글로벌 파트너를 적극적으로 찾고 있으며 업계에서 가장 경쟁력 있는 보상을 제공합니다. 궁금한 사항이 있으면 언제든지 문의하세요. [email protected]