재조합 단백질의 품질 관리 및 응용

재조합 단백질의 품질 관리는 실험 데이터의 신뢰성과 재현성에 매우 중요합니다. 프로젝트 설계부터 생산 공정까지의 모든 단계에서 엄격한 품질 관리 전략이 필요합니다.

품질 관리 전략

산업 부문은 엄격한 표준 운영 절차를 준수하지만, 학계는 데이터 재현성을 개선하기 위해 전문적 지식을 강화할 필요가 있습니다. 특정 생물학적 용도나 생화학적 특성을 가진 단백질은 맞춤형 품질 관리(QC) 전략이 필요합니다.

도전적인 사례와 해결책

야오하이 바이오-파마는 풍부한 재조합 단백질 생산 및 정제 경험과 전문가 팀을 보유하고 있어 귀하의 단백질 생산이 높은 순도로 완료될 수 있도록 보장합니다. 수백 개의 프로젝트 경험을 바탕으로 야오하이는 단백질 정제 최적화 방법을 요약해드립니다.

핵산 결합 단백질: 핵산 제거 단계, 예를 들어核酸분해효소나 PEI 침전이 필요합니다. A260nm/A280nm 비율은 핵산 오염을 감지하기 위해 모니터링됩니다.

Cryo-EM용 마우스 페리틴 중쇄 1: 정제 과정을 최적화하고 핵산 분해 효소를 추가하여 A260nm/A280nm 비율을 낮추고 단백질 순도를 보장해야 합니다.

임의 단백질 인간 dsRBEC: 세포 균열에는 유레아가 포함된 버퍼가 사용되며, 이후 기능적으로 활성화된 단백질을 얻기 위해 컬럼 상에서 재접합이 이루어집니다.

이가람 이온과 결합하는 단백질들: 발현 및 정제 과정에서 특정 이가람 이온을 첨가해야 하며, Chelating 에이전트는 피해야 합니다.

철-황 단백질들: [2Fe ± 2S] 클러스터를 방해하지 않도록 임다졸을 피하고, 올바른 단백질 접힘과 기능을 유지해야 합니다.

LLT1의 용해성 조각: 돌연변이 설계는 이황화물 결합 형성 및 단백질 접힘을 최적화하여 안정적이고 고수율의 단백질을 생성합니다.

CLK1 케인아제結晶화: Λ-포스파타제와의 공발현은 인산화 부위에서 인산기를 제거하며, 크기 배제 크로마토그래피 (SEC) 및 음이온 교환 크로마토그래피를 사용하여 비균일한 인산화 없이 동질적인 CLK1을 얻습니다.

항원용 단백질: 높은 면역원성을 가진 단백질 오염을 피하기 위해 순도 평가가 필요합니다. 구조적 에피토프 항체의 경우 항원의 삼차원 구조가 유지되어야 합니다.

집락 경향 단백질: 다양한 균주를 스크리닝하고 배양 온도를 낮추는 등의 전략을 사용하여 집락 문제를 제한하고, 신속한 정제 전략이 설계됩니다.

엔도톡신 제거: 양전하 크로마토그래피 및 다중 양이온 리간드 친화 크로마토그래피 같은 방법들은 엔도톡신을 제거하며, LPS 수준이 적용 가능한 한도 이하임을 보장합니다.

단백질 복합체: 서브 유닛들은 별도로 표현되어 체외에서 조립되거나 공동 표현되어 기능적 복합체를 형성한다. 복합체의 완전성은 동질성과 분자량을 통해 평가된다.

결론

단백질 생산은 생화학적 특성과 응용을 고려한 전략적 설계로 시작된다. 발현, 정제 및 품질 관리 과정에서 안정성, 비집합성 및 원래 상태를 위해 조건과 방법이 최적화된다. 정제된 단백질은 생물 물리적 특성 분석 등의 다양한 후속 용도에 사용된다.

야오하이 바이오-파마는 또한 적극적으로 글로벌 기관 또는 개인 파트너를 모색하고 있으며, 업계에서 가장 경쟁력 있는 보상을 제공합니다. 문의 사항이 있으시면 언제든지 연락 주십시오: [email protected]