Tutustu Intrigoivaan Maailmaan Liumikloridi-Puraamisesta

Litiumproklaariprecipitaatio on laajalti käytössä RNA:n erottamiseksi liuosta.

Tässä on prosessin selitys:

1. Näytevalmistus: Aloita näytteellä, jossa on RNA, kuten in-vitro transkriptimiksaus.

2. Litiumproklaarin lisääminen: Lisää sopiva määrä keskittynyttä litiumproklaariliuosta RNA-liuokseen.

3. Inkubaatio: Kun olet lisännyt litiumproklaaria, ratkaisu inkuboidaan alhaisella lämpötilalla, yleensä noin -20°C. Tämä johtaa siihen, että RNA-molekyylit precipitoivat liuoksen ulkopuolelle.

4. Sentrifugoiminen: Inkubaation jälkeen ratkaisu sentrifugoidaan korkealla nopeudella. Tämä erottaa precipitoitunut RNA muusta liuoksesta, joka sisältää epäpuhdisteitä.

5. Pesu: Kun sentrifugoiminen on valmis, poista supernaatti huolellisesti ilman sekaantumista RNA-precipitaatioon. Pesi RNA-pareja kylmällä etanoolilla tai isopropanolilla poistaaksesi mahdolliset jäljellä olevat epäpuhdisteet.

6. RNA-uudelleensulatus: Pesun jälkeen RNA-putouma kuivataan lyhytaikaisesti ilmassa ja sitä sulatetaan sitten sopivassa paahdyksessä, kuten TE-paahdyksessa (Tris-EDTA paahdys) tai destillöityyn veteen. Hellä pipetointi tai pyörteet saattavat olla tarpeen RNA:n asianmukaista uudelleensulamista varten.

7. Määritys ja analyysi: Lopuksi eristetty RNA mitataan ultraviolettispektrofotometrialla tai fluoresenssimenetelmällä. Tämä määrittää RNA-näytteen konsentraation ja puhtauden, mikä on tärkeää seuraavissa sovelluksissa, kuten LNP-inkapseloinnissa ja solujen transfektiossa.

Yaohai Bio-Pharma on taitava käyttämään litiumkloridi-putoamismenetelmää tuotantoproressissa, koska se on yksinkertainen, alhaisena hintana ja tuottaa korkealaatuisen RNA:n useisiin molekyylibiologisiin sovelluksiin. On kuitenkin tärkeää optimoida ehkä (esim. litiumkloridin pitoisuus, inkubaatioaika, sentrifugointinopeus) saadakseen parhaat tulokset tiettyyn näyteeseen.

Perustuen vahvaan ja omistautuneeseen RNASci -alustallemme, tarjoamme myös mukautettuja RNA-kytkentäpalveluita sekä mRNA-(maalta 10 kb), circRNA-(maalta 4 kb) että LNP-katalogitotteita. Olemme kehittäneet täydellisen mRNA/circRNA-kytkentätekniikoiden joukon tuottamaan korkealaatuisia RNA-molekylejä, kuten sekvenssien suunnittelua ja optimointia, IVT:ää, ympyröintiä, puhdistusta ja LNP-pakkausta. Kaikki tuotteet julketaan tiukin laadunvalvonnan standardeihin.

Yaohai Bio-Pharma on ensimmäinen ja suurin biologisten molekyylien CRDMO, joka keskittyy mikrobiesitysjärjestelmiin Suuressa Kiinassa. Tarjoamme alusta asti mukautettuja koko prosessin ratkaisuja tai erillisiä palveluita, jotka ulottuvat RNA-synteesistä, käyttökiekon muokkaamisesta ja rakentamisesta, ylä- ja alasuuntaisen prosessin kehittämiseen sekä GMP- tai ei-GMP-tason lääkeaineiden valmistukseen ja täyttö- ja lopputuotantopalveluihin erilaisille modaliteeteille, kuten mRNA:lle, circRNA:lle, plasmid RNA:lle, rekombinoituneille proteiineille, pepteideille, enzyymeille, yksinkertaisille domeenille (sdAbs) ja VLP:ille. Olemme sitoutuneet vastaamaan kansainvälisten asiakkaiden klinikko- ja kaupallisiin tarpeisiin biologisissa lääkkeissä, rokotteissa ja diagnostiikassa sekä ihmisten että eläinten käytössä.

Yaohai Bio-Pharma etsii myös aktiivisesti instituutionaalista tai yksilöllistä globaalista kumppanuutta ja tarjoaa kilpailukykyisimmät palkkiot teollisuudessa. Jos sinulla on mitään kysymyksiä, ota meihin yhteyttä iloisin sydämellä: [email protected]