Tutustu litiumkloridisaostuksen kiehtovaan maailmaan

Litiumkloridisaostusta käytetään laajalti RNA:n erottamiseen liuoksesta.

Tässä on prosessin erittely:

1. Näytteen valmistelu: Aloita näytteestä, joka sisältää RNA:ta, esim in vitro transkriptiosekoitus.

2. Litiumkloridin lisäys: Lisää sopiva tilavuus väkevää litiumkloridiliuosta RNA-liuokseen.

3. Inkubointi: Litiumkloridin lisäämisen jälkeen liuosta inkuboidaan alhaisessa lämpötilassa, yleensä noin -20 °C:ssa. Tämä aiheuttaa RNA-molekyylien saostumisen liuoksesta.

4. Sentrifugointi: Inkuboinnin jälkeen liuos sentrifugoidaan suurella nopeudella. Tämä erottaa saostuneen RNA:n muusta liuoksesta, joka sisältää epäpuhtauksia.

5. Pesu: Kun sentrifugointi on valmis, poista supernatantti varovasti, mutta häiritsemättä RNA:n saostumista. Pese RNA-partikkelit kylmällä etanolilla tai isopropyylialkoholilla jäljellä olevien epäpuhtauksien poistamiseksi.

6. RNA:n uudelleensuspendointi: Pesun jälkeen RNA-sakka ilmakuivataan lyhyesti ja suspendoidaan sitten uudelleen sopivaan puskuriin, kuten TE-puskuriin (Tris-EDTA-puskuri) tai tislattuun veteen. Hellävarainen pipetointi tai pyörrevirta voi olla tarpeen RNA:n riittävän uudelleensuspendoimiseksi.

7. Kvantitointi ja analyysi: Lopuksi eristetty RNA kvantifioidaan ultraviolettispektroskopialla tai fluoresenssimenetelmällä. Tämä määrittää RNA-näytteen pitoisuuden ja puhtauden, mikä on tärkeää jatkosovelluksissa, kuten LNP-kapseloinnissa ja solutransfektiossa.

Yaohai Bio-Pharma osaa käyttää litiumkloridisaostusmenetelmää tuotantoprosessissa, koska se on yksinkertainen, edullinen ja tuottaa korkealaatuista RNA:ta, joka soveltuu erilaisiin molekyylibiologian sovelluksiin. On kuitenkin tärkeää optimoida olosuhteet (esim. litiumkloridipitoisuus, inkubointiaika, sentrifugointinopeus), jotta saavutetaan parhaat tulokset tietylle näytteelle.

Luotamme tehokkaaseen ja patentoituun RNASci-alustaan, tarjoamme myös räätälöityjä RNA-synteesipalveluita sekä mRNA:ta (jopa 10 kb), circRNA:ta (jopa 4 kb) ja LNP-luettelotuotteita. Olemme perustaneet täydellisen sarjan mRNA/circRNA-synteesitekniikoita korkealaatuisen RNA:n tarjoamiseksi, kuten sekvenssisuunnittelun ja optimoinnin, IVT:n, kiertokirjeen, puhdistamisen ja LNP-kapseloinnin. Kaikki tuotteet julkaistaan ​​tiukkojen laadunvalvontastandardien mukaisesti.

Yaohai Bio-Pharma on ensimmäinen ja suurin biologisten aineiden CRDMO, joka on omistautunut mikrobien ilmentämisjärjestelmiin Suur-Kiinassa. Tarjoamme kokonaisvaltaisia ​​räätälöityjä ratkaisuja tai itsenäisiä palveluja RNA-synteesistä, kantasuunnittelusta ja rakentamisesta, alku- ja loppupään prosessikehityksestä GMP- tai ei-GMP-tason lääkeaineiden valmistukseen sekä täyttö- ja viimeistelypalveluita erilaisiin tarpeisiin. modaliteetit, kuten mRNA, sircRNA, plasmidi-RNA, rekombinanttiproteiinit, peptidit, entsyymit, yksidomeeniset vasta-aineet (sdAb:t) ja VLP:t. Olemme sitoutuneet vastaamaan globaalien asiakkaiden kliinisiin ja kaupallisiin tarpeisiin biologisten lääkkeiden, rokotteiden ja diagnostiikan alalla sekä ihmisten että eläinten käyttöön.

Yaohai Bio-Pharma etsii myös aktiivisesti institutionaalisia tai yksittäisiä globaaleja kumppaneita ja tarjoaa alan kilpailukykyisimmän palkkion. Jos sinulla on kysyttävää, ota rohkeasti yhteyttä: [email protected]