Η παρασκευή του CircRNA απαιτεί γραμμικό RNA ως πρόδρομο υλικό (πρόδρομος RNA) για κυκλοποίηση, όπου ο πρόδρομος RNA συνήθως παρασκευάζεται χρησιμοποιώντας γραμμικοποιημένο πλασμιδικό DNA ως πρότυπο μεταγραφής και μεταγράφεται in vitro με τη βοήθεια πολυμεράσης RNA Τ7.
Το υψηλής ποιότητας πλασμιδικό DNA είναι απαραίτητο για την in vitro μεταγραφή (IVT). Με βάση την πλατφόρμα υπηρεσίας παρασκευής ώριμου πλασμιδίου, η Yaohai Bio-Pharma μπορεί να παρέχει μια υπηρεσία προετοιμασίας υψηλής καθαρότητας και τυπικής γραμμικοποιημένης πλασμιδικής DNA (pDNA) για να διασφαλίσει την ακεραιότητα των προϊόντων IVT.
Στοιχεία υπηρεσιών
| Διαδικασία |
Προαιρετική εξυπηρέτηση |
Λεπτομέρειες υπηρεσιών |
Περίοδος παράδοσης (Εργάσιμη ημέρα) |
| Κυκλική παρασκευή πλασμιδίου |
Γονιδιακή σύνθεση |
Γονιδιακή σύνθεση (τρίτου μέρους) |
7-10 |
| Ενίσχυση πλασμιδίου |
Ενίσχυση πλασμιδίου |
2 |
| Εκχύλιση πλασμιδίου |
| Γραμμικοποιημένο παρασκεύασμα πλασμιδίου |
Γραμμικοποίηση και καθαρισμός πλασμιδίου |
Γραμμικοποίηση πλασμιδίου |
1 |
| Γραμμικοποίηση Καθαρισμός DNA |
| Έλεγχος ποιότητας πλασμιδίου DNA |
Καθαρότητα συγκέντρωσης |
Φασματοφωτομετρία υπεριώδους (UV). |
1-2 |
| Διαμόρφωση πλασμιδίου |
Ηλεκτροφόρηση γέλης αγαρόζης (AGE) |
| Τριχοειδής ηλεκτροφόρηση (CE)-προαιρετική |
| Ταυτοποίηση πλασμιδίου |
Αναγνώριση περιοριστικού ενζύμου/ AGE |
Τα χαρακτηριστικά μας
- Πρότυπο πλασμιδίου Freecut
Ευέλικτη επιλογή μεθόδων γραμμικοποίησης
Βελτιστοποίηση των μεθόδων εξαγωγής και καθαρισμού DNA για την επίτευξη υψηλών ποσοστών ανάκτησης.
- Αυστηρός ποιοτικός έλεγχος
Αυστηρά πρότυπα ελέγχου διεργασιών, με ποσοστό υπερέλικας διαμόρφωσης δειγμάτων πλασμιδίου για έρευνα άνω του 80%.
- Διαδικασία ώριμης πλατφόρμας
Υπηρεσίες παρασκευής πλασμιδίου και ποιοτικού ελέγχου υψηλών προδιαγραφών και υψηλής απόδοσης για την κάλυψη των πειραματικών αναγκών.
Μελέτη περίπτωσης
Λαμβάνοντας ως παράδειγμα το προϊόν mCherry circRNA της Yaohai Bio-Pharma, η υπερτυλιγμένη αναλογία δειγμάτων πλασμιδίου προτύπου μεταγραφής (βαθμός έρευνας) είναι μεγαλύτερη από 70%, με ποσοστό γραμμικοποίησης κοντά στο 100%.
Το mCherry circRNA παρασκευάζεται με γραμμικοποιημένο πλασμίδιο ως εκμαγείο και επιμολύνεται σε κύτταρα 293Τ. Υψηλό επίπεδο έκφρασης φθορισμού (κόκκινος φθορισμός) ανιχνεύεται μετά από 24 ώρες επιμόλυνσης, το οποίο θα ενισχυθεί μετά από 48 ώρες και μπορεί ακόμα να ανιχνευθεί την 7η ημέρα και τη 14η ημέρα μετά τη διαμόλυνση.
Η πρωτεΐνη mCherry εκφράζεται σταθερά και αποτελεσματικά και η καθαρότητα του μεταγραφικού προτύπου μπορεί να καλύψει την απαίτηση του φαρμακευτικού προϊόντος circRNA (DP) με υψηλή ποιότητα.
Επικύρωση έκφρασης in vitro του mCherry circRNA
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
ΟΧΙ
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
