Στη διαδικασία παρασκευής μεταφορικού mRNA εκτός κυττάρου (IVT), απαιτείται γραμμικοποιημένο DNA πλάσματος ως πρότυπο μεταφοράς IVT με τη βοήθεια της πολυμεράσης T7 RNA. Το υψηλής ποιότητας DNA πλάσματος είναι κρίσιμο για τη μεταφορά εκτός κυττάρου.
Με βάση την εξελιγμένη πλατφόρμα υπηρεσιών παρασκευής πλάσματος, η Yaohai Bio-Pharma μπορεί να προσφέρει υπηρεσία παρασκευής γραμμικοποιημένου DNA πλάσματος υψηλής καθαρότητας και υψηλών προτύπων για αποτελεσματική μεταφορά IVT.
Διαδικασία | Επιλογές Υπηρεσίες | Λεπτομέρειες Υπηρεσίας | Περίοδος Παράδοσης (εργασιακή μέρα) |
Παρασκευή Κυκλικού Πλάσματος | Σύνθεση γονιδίου | Σύνθεση Γονιδίου (Τρίτων Παρόχων) | 7-10 |
Επαμφότερη Επέκταση Plasmid | Επαμφότερη Επέκταση Plasmid | 2 | |
Απόσταγμα Plasmid | |||
Προετοιμασία Γραμμικού Plasmid | Γραμμικοποίηση και καθαρισμός πλάσμιδων | Γραμμικοποίηση πλάσμιδων | 1 |
Καθαρισμός Γραμμικοποιημένου DNA | |||
Έλεγχος ποιότητας DNA πλάσμιδας | Συγκέντρωση καθαρότητα | Ακτινοβολική Περιβολή (UV) Φασματοφωτομετρία | 1-2 |
Μορφή Plasmid | Ηλεκτροφόρηση σε Αγαρωσή (AGE) | ||
Καπιλλαρή Ηλεκτροφόρηση (CE) - Παραλλαγή | |||
Εξαγωγή Plasmid | Διάκριση ενζύμων περιορισμού / AGE |
Ευέλικτη επιλογή μεθόδων γραμμικοποίησης
Βελτιστοποίηση των μεθόδων εξαγωγής και καθαρισμού DNA για να επιτευχθούν υψηλοί ρυθμοί ανάκτησης.
Αυστηροί πρότυποι ελέγχου διεργασιών, με ρυθμό υπερελικοειδούς σχήματος πλάσματος για έρευνα πάνω από το 80%.
Υψηλού προτύπου και υψηλής αποδοσης υπηρεσίες παρασκευής και ελέγχου ποιότητας πλάσματος για να καλύψουν τις πειραματικές ανάγκες.
Λαμβάνοντας ως παράδειγμα το προϊόν mRNA_luciferase από το κατάλογο Yaohai Bio-Pharma, ο πρότυπος πλάσματος για μεταγραφή (ερευνητικού επιπέδου) έχει υπερελικοειδή λόγο πάνω από 90%, έναν λόγο γραμμικοποίησης κοντά στο 100% και έναν μεταγραφικό λόγο μέχρι 1:200 (γραμμικό DNA πλάσματος: mRNA).
Το mRNA_luciferase που προέρχεται από την παρασκευή ενός γραμμικοποιημένου πλάσματος ως πρότυπο μεταγράφεται σε κύτταρα 293T, και η δραστηριότητα της ενζυμο-υποστρώτης αντίδρασης αξιολογείται 24 ώρες μετά την μεταγραφή.
Μπορεί να ανιχνευθεί ένα ξεκάθαρο ισχυρό σήμα δραστηριότητας luciferase, δηλαδή το πρωτεΐνη luciferase εκφράζεται αποτελεσματικά, υποδηλώνοντας ότι η καθαρότητα του προτύπου μεταγραφής μπορεί πλήρως να καλύψει τις απαιτήσεις της παρασκευής υψηλής ποιότητας mRNA.
Δοκιμή Αναλογίας Υπερσυστολικού Πλάσμιδα
Επιβεβαίωση Εκφράσεως mRNA του Λουσιφέρασης Εξωτερικά