Σύμφωνα με την κεντρική υπόθεση, το μεσινό RNA (mRNA) είναι η γέφυρα για τη μεταφορά του γενετικού υλικού από το DNA στα πρωτεΐνα.
το mRNA διαδραματίζει βιολογικό ρόλο με την κωδικοποίηση πρωτεινών μέσα στο οργανισμό, και το εξέλικτο mRNA σε ευκαρυωτικούς οργανισμούς αποτελείται από πέντε συστατικά: 5' Cap (καπέλο), 5' UTR (μη κωδικοποιούμενη περιοχή), το ORF (ανοικτή ζώνη ανάγνωσης), 3ʹ UTR, και 3' polyA tail (πολυαδενυλάτικη άκρη).
Λεπτομέρειες Υπηρεσιών
| Διαδικασία |
Επιλογές Υπηρεσίες |
Λεπτομέρειες Υπηρεσίας |
Περίοδος Παράδοσης (Ημέρα) |
| σχεδιασμός και Βελτιωμένη Ακολουθία mRNA |
Σχεδιασμός και βελτίωση κωδικοποιημένων ακολουθιών |
.Alignments ακολουθίας CDS
Βελτιωμένη κωδικοποίηση CDS
|
1 |
| Σχεδιασμός και βελτιωτική ανάπτυξη μη κωδικών ακολουθιών |
σχεδιασμός και βελτιωμένος σχεδιασμός ακολουθίας 5' UTR
σχεδιασμός και βελτιωμένος σχεδιασμός ακολουθίας 3' UTR
σχεδιασμός και βελτιωμένος σχεδιασμός ακολουθίας polyA
|
1-2 |
Προσαρμόσιμες επιλογές
| 5’ UTR/3’ UTR |
- Φυσική ακολουθία UTR
- Αλλοιωμένη/Μηχανικά σχεδιασμένη ακολουθία UTR
|
| 3' PolyA Δευτερόλογο |
- 100A ~120A Ουρά (συστεματικά)
- Διαμερισμένη ουρά polyA
- Άλλη προσαρμογή
|
Κοινές Στρατηγικές για την Σχεδίαση Ακολουθίας mRNA
| συστατικά mRNA |
Βιολογικές Λειτουργίες |
Στρατηγικές Βελτιωτικών Μέτρων |
| 5' Κάπο |
Να προστατεύουν το mRNA από κατάρρευση από εξονουκλεάσεις και να δρουν συντονιστικά με το polyA άλλο με το 3' τέλος, το πρωτεΐνη δέσμευσης polyA και το πρωτεΐνη εναρξητικού παράγοντα μετάφρασης για να ξεκινήσει την μετάφραση πρωτεΐνης. |
Η φυσιολογική δομή Cap1 αποφεύγει τις αναγνωριστικές διαδικασίες μοτίβων και μειώνει έτσι τη φυσιολογική ανοσοποιητική απόκριση, η οποία μπορεί να επιτευχθεί με μια βήματα συνδιαγραφικής κάλυψης ή με δύο βήματα ενζυματικής κάλυψης [δείτε λεπτομέρειες για την ενζυματική κάλυψη mRNA και τη συνδιαγραφική κάλυψη]. |
| 5' UTR |
Ο 5' UTR μπορεί να αναγνωριστεί από ριβοσόματα, να ρυθμίζει τη μετάφραση του mRNA και να επηρεάζει τη σταθερότητα του mRNA. |
Περιέχουν ακολουθίες Kozak χωρίς πολύ σταθερή δευτερεύουσα δομή. Φυσικές UTRs από υψηλά εκφραζόμενα γονίδια είναι προτιμώμενες για τις μ-RNA εξωτελικής μεταγωγής (IVT) όπως το α-globin και το β-globin. |
| CDS |
Περιοχές κωδικοποίησης πρωτεΐνων και ακολουθίες κωδικοποίησης για αντιγόνα, αντισώματα ή άλλες λειτουργικές πρωτεΐνες. |
Η βελτιστοποίηση κώδικα αυξάνει το επίπεδο μετάφρασης, επισημαίνοντας ότι ορισμένοι μη βελτιστοποιημένοι κώδικες μπορεί να έχουν ρόλο στην κατατεύξη της πρωτεΐνης. |
| 3' UTR |
Διέπουν τη μετάφραση και τη σταθερότητα της μ-RNA. |
Φυσικές UTRs από υψηλά εκφραζόμενα γονίδια είναι προτιμώμενες για IVT μ-RNA όπως το α-globin και το β-globin. |
| 3' polyA ουρά |
Διέπουν την έκφραση πρωτεΐνης και προστατεύουν την καπελλοειδή δομή από κατάλυση. |
Απαιτείται επαρκής μήκος (100-150 bp); η κωδικοποίηση της polyA ουράς στο πλάσμα προtypoύ μεταγωγής εξασφαλίζει ένα πιο ορισμένο μήκος polyA ουράς. |
Οι Προσφερόμενες Ικανότητες
- Επιλογή ποικίλων πηγών UTR
Πολλαπλές πηγές φυσικών και τροποποιημένων βιβλιοθηκών UTR με υψηλή έκφραση; ώριμη στρατηγική τροποποίησης UTR;
- Πρωτοπόρος ομάδα βελτιωμένων CDS
Συνεργασία με μια εξειδικευμένη ομάδα AI αλγορίθμων για την ολοκλήρωση της βελτιστοποίησης κωδικών.
- Ισορροπημένη κατανομή polyA ουράς
Προσθήκη ακολουθιών polyA σύμφωνα με τα πρότυπα DNA για να ελέγχεται η μήκος του mRNA με μεγαλύτερη ακρίβεια.
- Ποικίλες συνδυασμένες βελτιώσεις
Επίτευξη αποδεκτής έκφρασης mRNA με χαμηλή ανοσογεννητικότητα.
Μελέτη περιπτώσεων
Σχεδιασμός ακολουθίας διπλού αναφορικού mRNA: mRNA mCherry-eGFP
Η υπηρεσία mRNA της Yaohai Bio-Pharma συνεχίζει να αναβαθμίζεται με τον σχεδιασμό και την βελτιστοποίηση μιας διπλής ακολουθίας τανδεμ αναφορικών γενών, η οποία επιτυγχάνει τη συν-έκφραση δύο γενών.
Χρησιμοποιώντας συνήθη μεταφορικό φάρμακο, η διπλή ακολουθία τοπικού πλήκτη mCherry-eGFP mRNA μεταφέρεται σε κύτταρα 293T, και ανιχνεύονται δύο φωτεινές σήματα mCherry (κόκκινο) και ενισχυμένου πράσινου φωτεινού πρωτεΐνη (eGFP) με ταυτόχρονη έκφραση μετά από 48 ώρες, και ο στοιβαγμένος γράφος επισημαίνεται με κίτρινο.
Έκφραση mCherry-eGFP mRNA σε κύτταρα 293T
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
