LC-MS দ্বারা মৌলিক ওজন নির্ধারণ
পূর্ণ মৌলিক ওজন সর্বদা বায়োলজিক্সের একটি গুরুত্বপূর্ণ বৈশিষ্ট্য হিসেবে চিহ্নিত হয়েছে। পূর্ণ মৌলিক ওজন বিশ্লেষণ ব্যবহৃত হয় প্রোটিন/পিপটাইড পণ্য দেখাতে এবং বায়োলজিক্সকে যাচাই করতে। মৌলিক ওজন মাপাটি নিয়ন্ত্রণ নির্দেশিকার একটি আবশ্যকতা।
যাওহাই বায়ো-ফার্মা প্রাকৃত, হ্রাসকৃত, N-ডেগ্লাইকোসিলেটেড শর্তাবলীতে পূর্ণ মৌলিক ওজন বিশ্লেষণ প্রদান করে। আমরা পূর্ণ মৌলিক ওজন নির্ধারণের জন্য তরল ক্রোমাটোগ্রাফি-ম্যাস স্পেক্ট্রোমেট্রি (LC-MS) ব্যবহার করি।
মৌলিক ওজনের জন্য নিয়ন্ত্রণ নির্দেশিকা
ইচ কিউ৬-এ পরামর্শ দেওয়া হয়েছে যে "মৌলিক ওজন (অথবা আকার) নির্ধারণ করা হবে সাইজ এক্সক্লুশন ক্রোমাটোগ্রাফি, এসডিএস-পলিঅ্যাক্রিলামাইড জেল ইলেকট্রোফোরেসিস (রিডিউসিং এবং নন-রিডিউসিং শর্তে), ম্যাস-স্পেকট্রোমেট্রি (এমএস), এবং অন্যান্য উপযুক্ত পদ্ধতি ব্যবহার করে।"
বিশ্লেষণাত্মক পদ্ধতি
বিশ্লেষণ |
পদ্ধতি |
আণবিক ওজন |
LC-MS / তরল ক্রোমাটোগ্রাফি/ইলেকট্রোস্প্রে ম্যাস স্পেকট্রোমেট্রি (LC/ES-MS) ব্যবহার করে আদি, রিডিউস, N-ডিগ্লাইকোসিলেটেড প্রোটিন বা উপাংশ |
বিশ্লেষণাত্মক পদ্ধতি
পূর্ণ মৌলিক ওজন:
- আদি নমুনার উপর LC-MS পরিচালনা করা হয়।
- LC-MS ডেটা বিশ্লেষণ।
রিডিউস মৌলিক ওজন:
- প্রোটিন নমুনাকে একটি উপযুক্ত রিডিউসিং এজেন্ট দিয়ে চিকিত্সা করা হয়;
- রিডিউস প্রোটিনের উপর LC-MS পরিচালনা করা হয়;
- LC-MS ডেটা বিশ্লেষণ।
এন-ডিগ্লাইকোসিলেটেড মৌলিক ওজন:
- যথেষ্ট এনজাইম ব্যবহার করে এন-গ্লাইক্যান সরানো;
- এন-ডিগ্লাইকোসিলেটেড প্রোটিনের উপর LC-MS পরিচালনা করা;
- LC-MS ডেটা বিশ্লেষণ।
কমানো এবং এন-ডিগ্লাইকোসিলেটেড মৌলিক ওজন:
- প্রোটিন নমুনাকে একটি উপযুক্ত রিডিউসিং এজেন্ট দিয়ে চিকিত্সা করা হয়;
- যথেষ্ট এনজাইম ব্যবহার করে এন-গ্লাইক্যান সরানো;
- LC-MS পরিচালনা করা হ্রাস এবং এন-ডিগ্লাইকোসিলেটেড প্রোটিনের উপর;
- LC-MS ডেটা বিশ্লেষণ।
প্রোটিন সাবইউনিট মৌলিক ওজন:
- সাবইউনিট ক্লিভেজ
- প্রোটিন সাবইউনিটের উপর LC-MS পরিচালনা করা
- LC-MS ডেটা বিশ্লেষণ